利用CRISPR/Cas9技术对蒙古冰草落粒相关基因Sh1的编辑

利用CRISPR/Cas9技术对蒙古冰草落粒相关基因Sh1的编辑

论文摘要

落粒性是禾本科植物在进化过程中为了抵御恶劣环境条件、繁衍后代,通过长期的生存竞争,逐渐形成的一种适应机制,是禾本科植物系统演化过程中的里程碑事件。本研究通过CRISPR/Cas9技术对蒙古冰草中的Sh1基因进行编辑,从而终止其对蒙古冰草的落粒性的调控。所构建的载体在原生质体水平靶向敲除蒙古冰草落粒相关基因Sh1,通过载体构建、验证、原生质体转化等方法,结果表明,3个靶位点的突变类型主要为点突变和小片段缺失(1 bp或5 bp缺失),说明CRISPR/Cas9系统在蒙古冰草原生质体水平发挥了作用,为后续进行蒙古冰草基因编缉提供实验依据。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 靶位点设计和CRISPR/Cas9表达载体的构建
  •   1.2 突变体检测
  •   1.3 突变率及突变类型的统计和计算
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 试验材料及载体
  •   3.2 靶位点设计和CRISPR/Cas9表达载体的构建
  •   3.3 酶切和测序分析验证突变位点
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张文静,融晓萍,田青松,李婷婷,武志娟,刘慧艳,韩冰

    关键词: 蒙古冰草,落粒性,基因编辑,原生质体

    来源: 分子植物育种 2019年15期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,农作物

    单位: 内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古农业技术推广站,中国农业科学院草原研究所

    基金: 中国科学院“西部之光”人才培养项目,内蒙古自治区成果转化项目(CGZH2018143)共同资助

    分类号: S543.9;Q943.2

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.005021

    页码: 5021-5025

    总页数: 5

    文件大小: 1418K

    下载量: 261

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