论文摘要
细胞通过自噬清除不需要的大分子物质,为合成过程提供可重复利用的氨基酸、脂肪酸和核苷,在降解再生循环中驱动细胞中的物质流动。激活自噬的信号包括各种应激条件,如饥饿、缺氧、氧化应激、DNA损伤等。有研究发现,在哺乳动物细胞中,能量缺少或活性氧、活性氮处理的情况下,AMPK磷酸化,抑制mTOR活性,激活ULK1,启动自噬过程。Rho家族蛋白RhoB具有重要的生物学功能。本实验室之前的研究发现,在DNA损伤情况下,RhoB被SUMO化修饰并改变其细胞定位,招募TSC复合物聚集于溶酶体上,抑制mTORC1的活性,从而促进自噬的发生。此外,RhoB在蛋白质转运调控、细胞炎症反应调控、血管生成和血管功能调节、肿瘤的发生发展等过程中具有重要作用。在此,本文主要探索在可以激活自噬的各种应激条件下,RhoB蛋白的细胞生物学功能。本文通过CRISPR/Cas9技术特异性敲除人子宫颈癌HeLa细胞中的RhoB基因,获得了RhoB稳定敲除的细胞系。对RhoB稳定敲除细胞系及对照组细胞进行无糖、无血清、无氨基酸、无谷氨酰胺、过氧化氢处理,发现只有在过氧化氢处理时,两组细胞表现出明显的差异。过氧化氢处理时,对照组细胞中mTOR活性被抑制,激活自噬;而敲除RhoB的细胞中mTOR活性受抑制程度明显降低,抑制自噬激活。通过SUMO化实验,发现过氧化氢处理可以增强RhoB的SUMO化修饰,而RhoB蛋白SUMO化修饰是否与过氧化氢引起的自噬有关,还有待于进一步研究。
论文目录
文章来源
类型: 硕士论文
作者: 刘思琦
导师: 王洪睿
关键词: 自噬
来源: 厦门大学
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学,生物学
单位: 厦门大学
分类号: Q78
总页数: 75
文件大小: 4246K
下载量: 18
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标签：自噬论文;