点突变提高甲酸脱氢酶(CbFDH)的酶活和催化效率

论文摘要

甲酸脱氢酶（FDH）是工业上常用的辅酶NADH再生酶,而天然的FDH主要缺陷是酶活和催化效率低。作者通过序列比对7种不同来源的FDH,发现其中来源于Candida boidinii的FDH的第93位氨基酸为缬氨酸（V）,而其余6种来源均为异亮氨酸（I）。进一步根据疏水性大小,构建4个突变体酶V93L、V93I、V93A和V93G。酶学性质研究表明,除了V93L外,突变体酶的酶活随着第93位氨基酸残基的疏水性增强而提高。其中,V93I的比酶活提高22.6%、催化效率（NAD+）提高了133%。利用V93I偶联L-亮氨酸脱氢酶用于不对称还原2-氧代戊酸合成L-正缬氨酸,结果表明V93I能够提高2-氧代戊酸的转化效率。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郑俊贤,王子渊,杨套伟,张显,徐美娟,饶志明

关键词: 甲酸脱氢酶,疏水性,定点突变,催化效率,正缬氨酸

来源: 食品与生物技术学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 江南大学生物工程学院

基金: 国家自然科学基金项目(31570085),国家863计划项目(2015AA021004),江苏省杰出青年基金项目(BK20150002),江苏省自然科学基金项目(BK20161292),江苏高等教育机构优先学科课程发展项目

分类号: Q55

页码: 1-9

总页数: 9

文件大小: 2623K

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