王艳俊程万宏隗玉川杨智翔应朝晖（辽宁大连大学附属新华医院胸外科116000）
【中图分类号】R734.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)14-0235-01
【摘要】目的探讨Ad-IL-12-MSC分泌的IL-12对A2细胞生物学行为的影响。方法以Ad-IL-12转染MSC，MTT法和流式细胞仪检测外源性IL-12对A2生长和凋亡的影响。结果Ad-IL-12-MSC细胞IL-12基因在mRNA和蛋白质水平均有表达，实验组A2细胞活力受到显著抑制(P<0.05)，凋亡增加。结论Ad-IL-12-MSC分泌的外源性IL-12能显著抑制A2细胞增殖，促进凋亡。
【关键词】白细胞介素-12间充质干细胞基因转染
TheexpressionofIL-12inMSCinfectedbyrecombinantadenoviralvectorAd-IL-12anditseffectinhumanlungadenocarcinoma
【Abstract】Objective:ToassestheeffectiveofIL-12onA2cells.Methods:AfterAd-IL-12-MSCwasconstructed,MTTandFlowcytometrywereusedtodetectthegrowthandtheapoptosisofA2cells.Results:IL-12genewasexpressedbothinmRNAandproteinlevels.ThegrowthofA2cellsintransfectedgroupwassignificantlyinhibited(P<0.05)andtheapoptosisincreased.Conclusion:IL-12caneffectivelyinhibittheproliferationandincreasetheapoptosisoftheA2cells.
【Keywords】IL-12MesnchymalstemcellsGenetransfect
白细胞介素-12(IL-12)的抗肿瘤活性需要在较大剂量水平上才能发挥，且往往伴随严重的毒副作用。本研究构建Ad-IL-12-MSC，探讨其分泌的外源性IL-12对肺腺癌细胞株A2生物学行为的影响。
1材料与方法
1.1材料来源
重组腺病毒载体Ad-IL-12由大连大学中心实验室保存。
1.2实验方法
1.2.1构建Ad-IL-12-MSC，RT－PCR和WesternBlott检测IL-12表达
1.2.2外源性IL-12对A2细胞增殖和凋亡的影响
Transwell小室置于6孔板中，进行二维共培养，Transwell小室内分别培养对照组和转染组MSC，6孔板中培养A2。48小时后，检测分别与对照组和转染组MSC共培养的A2细胞增殖活性和凋亡情况。
2结果
2.1Ad-IL-12-MSC中IL-12基因mRNA和蛋白的表达
Ad-IL-12-MSC细胞IL-12基因有表达，而在亲代MSC细胞中未检测到IL-12的表达。
2.2外源性IL-12对A2细胞生物学行为的影响
二维共培养48h后，MTT法检测细胞增殖，实验组与对照组相比较均有统计学差异，P＜0.05。而各对照组之间比较差异无显著性，P＞0.05。流式细胞仪检测细胞凋亡，实验组凋亡率为5.99%，而对照组为1.34%。
3讨论
IL-12有巨大的抗肿瘤效应，但是，要达到这种效果往往必需高剂量的IL-12，故常伴有严重的毒副作用，主要损害淋巴造血系统、肠、肝和肺，甚至于导致病人死亡[1`2]。因而，寻找一种最高效能又是最低毒性的治疗平台，是目前急切需要解决的问题。
本研究结果显示，转染后，Ad-IL-12-MSC细胞IL-12基因在mRNA水平和蛋白质水平均获得成功表达。而Ad-IL-12-MSC分泌的外源性IL-12能够显著抑制A2细胞的增殖，同时促进凋亡。作为一种将IL-12基因局限于肿瘤所在部位表达并激发其免疫生物学活性方法，无疑将会给肿瘤治疗学带来希望。
参考文献
[1]TominagaS，YamaguchiT，etal.NegativeregulationofadipogenesisfromhumanmesenchymalstemcellsbyJunN-terminalkinase.BiochemBiophysResCommun，2005,326:499-504.
[2]TemblayJN,BertelliE.ProductionofIL-12byPeyerpatch-dendriticcellsiscriticalfortheresistancetofoodallergy,JAllergyClinImmunol.2007Sep,120(3):659-65.Epub2007Jun28.