导读:本文包含了纤维二糖酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:纤维,曲霉,聚糖,酵母,盲肠,分子,基因组。
纤维二糖酶论文文献综述
朱永瑞,曾柏全,曾磊,刘辉[1]（2016）在《黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析》一文中研究指出以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(Gen Bank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据库的Aspergillus niger(Gen Bank登录号JX982101.1)同源性达到了99%;生物信息学分析表明,纤维二糖酶为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白;二级结构以α-螺旋、β-折迭和无规则卷曲为结构元件;该基因经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明,重组表达产物的相对分子量约为93.3 k D,与预期相符;纤维二糖酶在大肠杆菌BL21中胞内融合表达,重组蛋白p NPG酶活为5.847U/m L,最适反应温度为50℃,最适p H值为5.0。(本文来源于《生物技术通报》期刊2016年02期）
张翔,李书润,翟文韬,曹莹泽,齐宏旭[2]（2015）在《非表面活性剂模板溶胶-凝胶法制备磁性介孔二氧化硅实现纤维二糖酶的原位固定》一文中研究指出以非表面活性剂为模板,通过引入磁性纳米颗粒,制备了磁性介孔硅材料,实现了纤维二糖酶的原位固定,得到了磁性固定化酶.制备流程操作简单、原料易得、使用方便.溶胶-凝胶反应在水相、常温、中性条件下进行,适用于工业化生产.对磁性固定化酶进行了气体吸附分析、热重分析、表面形貌分析和磁性表征.结果表明,磁性固定化酶具有较大的比表面积、较窄的介孔分布和软铁磁性.与非介孔固定化酶相比,磁性固定化酶表观酶活明显提高.磁性颗粒的引入对酶活性没有显着的影响,并且可以非常方便和快速地从反应系统中回收再利用,结合磁场的可控性,非表面活性剂模板溶胶-凝胶法有望实现固定化酶的大规模可控释放与回收.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2015年11期）
王蕊,王林风,闫德冉,赵子高,刘乐[3]（2015）在《基因工程菌毕赤酵母发酵产纤维二糖酶条件研究》一文中研究指出本文对基因工程菌毕赤酵母产纤维二糖酶活的发酵条件进行研究,结果表明:确定最优摇瓶培养基为小麦B浆4%,硫酸镁0.05%,玉米浆1%。其摇瓶最佳产酶条件为诱导时间12h,诱导前适宜的增殖时间为16h,接种量10%,转速220r/min,发酵pH值为6。在此基础上进行了50L发酵罐发酵中试,50L发酵罐诱导产酶高达125U。(本文来源于《山东化工》期刊2015年17期）
江春雨,魏益龙,李步轮[4]（2015）在《日粮精粗比对驴盲肠微生物纤维二糖酶活性的影响》一文中研究指出为了研究不同纤维水平日粮对驴盲肠微生物纤维二糖酶活性的影响,设置3个不同精粗比饲料组(高纤维日粮组、常规日粮组和高淀粉日粮组)进行饲喂试验,测定驴盲肠微生物纤维二糖酶的活性。结果发现,与常规组相比,高纤维组和高淀粉组对驴盲肠微生物纤维二糖酶活性均有显着影响(P<0.05)。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2015年17期）
阳芳[5]（2015）在《嗜热厌氧菌纤维二糖酶的克隆表达及酶学性质表征》一文中研究指出全球能源消耗特别是化石燃料消耗促进了利用生物技术将木质纤维素转化为生物燃料和生物产品,比如生物乙醇、生物柴油等。关于木质纤维素的应用研发,科学家普遍认为其关键在于纤维素的高效降解为可发酵糖。纤维二糖酶(EC3.2.1.21),属于水解酶类,可水解结合于末端、非还原性的β-D-糖苷键。纤维二糖酶是纤维素酶的重要组成成分,其在纤维素降解过程中通过水解纤维二糖释放葡萄糖以降低纤维二糖对其它纤维素酶和内切葡聚糖酶的抑制作用。此外,该酶还常被用作风味酶,以提高啤酒、茶叶、果汁等的风味。以纤维二糖为唯一碳源,发酵培养Thermoanaerobacterium aotearoense P8G3#4,在该菌株细胞内可检测到纤维二糖酶(β-glucosidase,BGL)活性。藉此,本文克隆鉴定了该菌株的纤维二糖酶基因bgl。序列分析表明,该bgl基因开放阅读框长1314 bp,编码446个氨基酸残基。序列比对和叁维结构预测显示,该BGL属于糖苷水解酶家族1(Glycoside Hydrolase Family 1,GH1),具有糖苷水解酶家族1典型的(β/α)8TIM桶结构。通过尝试多种肠杆菌分子伴侣质粒与p ET30a-bgl共表达,以增加其可溶活性表达量。结果表明BGL与分子伴侣质粒p Gro7共表达所得BGL粗酶活最高,约为无分子伴侣表达粗酶活的9.2倍,达到256.3 U/mg湿重细胞。纯化的BGL最适反应温度和p H分别为60°C和6.0,且表现出了较好的热稳定性和p H稳定性。金属离子对酶活的影响研究表明,5 m M Na+和K+可显着提高BGL的酶活。本论文所得的BGL具有很好的纤维二糖水解活性,最大反应速率可达740.39±10.23 U/mg,Km值为25.45 m M。此外,该酶显示出很好的葡萄糖耐受性,抑制常数Ki高达800 m M。甘蔗渣水解实验表明,本研究所得的BGL可提高商品化纤维素酶(Cellic®Ctec2,Novozymes)的催化效率,葡萄糖产量提高20%。本论文克隆表达纯化所得的BGL,具有较好的温度稳定性和p H稳定性,且对纤维素中降解过程中产生的纤维二糖具有很高的催化效率,有助于大幅度缓解纤维素降解过程中纤维二糖对其他纤维素酶活性的抑制;而该酶所显示出的高葡萄糖耐受性,使得该酶在纤维素降解过程中具有很好的工业应用价值和潜力。(本文来源于《华南理工大学》期刊2015-06-02）
王蒙[6]（2014）在《热纤梭菌内切葡聚糖酶和纤维二糖酶分子改造及融合酶活性的变化研究》一文中研究指出内切葡聚糖酶CelD和纤维二糖酶CelS作为热纤梭菌(Clostridium thermocellum)纤维小体中酶活性最高的内切纤维素酶和外切纤维素酶组分,其在纤维素降解中的应用价值逐渐被人们所关注。内切葡聚糖酶能够从纤维素单链内部随机水解β-l,4-糖苷键,将长链纤维素分子截短,产物为长链纤维糊精。纤维-二二糖酶能够和纤维小体支架蛋白相互作用,从局部断裂的纤维素分子链的非还原端开始切割,产物主要是纤维二糖,同时有少量的纤维叁糖和葡萄糖。但是目前CelD和CelS在纤维素降解的产业化应用方面仍然存在许多问题:(1)Ce1D和CelS来自热纤梭菌,而热纤梭菌是严格的嗜热厌氧菌,这给研究和利用纤维素酶带来了很大困难;(2)虽然有研究在大肠杆菌中表达了 CelD和CelS,但都是以包涵体的形式,并未实现可溶性表达,因此并不能满足工业化的需求;(3)天然的CelD和CelS对纤维素底物降解活性不高,酶的稳定性有待提高。本试验将来自热纤梭菌的内切葡聚糖酶基因ce/D成功克隆到本实验室构建的高效热激表达载体pHsh上,实现了在大肠杆菌中对内切葡聚糖酶的高效可溶性表达。对基因celD进行分子改造,在基因celD的C-端去掉dockerin编码序列,融合纤维素结合域编码序列(CBD),构建了新型融合酶(NcelD)。对融合酶与原始的内切葡聚糖酶进行酶学性质测定和分析,结果表明,融合酶对底物CMC的摩尔催化活性比原始CelD提高了 86.32%,对底物Avicel的摩尔催化活性比原始CelD提高了 115.53%。酶学性质测定发现:在酶的最适反应pH值方面,原始的CelD和融合酶NcelD的最适反应pH值以及酶活力随着pH值变化的趋势相似,基本上没有差异,但是pH值的变化对酶活力的影响显着。CelD和融合酶NcelD的最适反应pH均为4.5,在4.5～5.5之间酶的相对活性较高,但当pH小于4.5或大于5.5以上时酶的活性急剧下降。但是融合酶NcelD在相同反应pH值的条件下酶活力(本论文中用摩尔催化活力表示酶活力)显着高于原始的CelD的酶活力。在pH稳定性方面,CelD和融合酶NcelD在pH4.0的条件下都极不稳定,60分钟后剩余酶活力不到20%。在pH4.5～8.0的条件下酶剩余活力较高,在pH5.0～7.0的条件下60分钟后酶活力几乎没有损失。通过pH稳定性的测定,结果表明融合酶NcelD和原始的CelD的pH稳定性相似,但是在pH4.0和pH8.0的条件下融合酶NcelD的pH稳定性要比原始CelD的稳定性好。CelD及NcelD的最适反应温度以及反应温度范围测定结果显示:CelD催化的最适反应温度为60℃,在40～75℃之间CelD的相对活性均在50%以上,融合酶催化的最适反应温度为55℃,在40℃～70℃之间时酶的相对活性在80%以上。在相同反应温度条件下NcelD对底物CMC的摩尔催化活性显着高于CelD的摩尔催化活性,在55℃反应条件下NcelD的比酶活最高,在此温度下比酶活比CelD的增幅最大。对内切葡聚糖酶酶活力半衰期的测定结果分析:对于原始的CelD而言,在45℃孵育1小时后剩余酶活力有92.5%,在65℃孵育1小时后剩余酶活力仍然有69.8%,在70℃酶活力半衰期约为1小时。测定融合酶NcelD的酶活力半衰期发现,在45℃孵育1小时后剩余酶活力有93.51%,在65℃孵育1小时后剩余酶活力仍然有71.9%,在70℃孵育1小时后剩余酶活力仍然大于50%。分析酶活力半衰期的测定结果发现,CelD和融合酶NcelD的温度半衰期趋势相似,融合酶Nce1的温度稳定性略优于原始CelD。与CelD相比,融合酶在45-70℃温度区间内稳定性更好,酶的半衰期更长,这更有利于内切葡聚糖酶的工业化应用。以上数据显示融合酶在改善酶的热稳定性,扩宽酶的作用pH,提高酶对底物的催化能力等方面均得到提高,在工业中有广泛的应用前景。通过对酶分子上的改造,融合CBD编码序列以及本实验室的热激表达系统pHsh的应用策略,实现了内切葡聚糖酶CelD高效可溶性表达,酶学性质得到优化,能够很好的满足工业化生产的要求。本研究还将来自热纤梭菌的纤维二糖酶基因celS成功克隆到本实验室构建的高效热激表达载体pHsh上,并对该基因进行分子改造,SDS-PAGE检测结果表明,实验中没有实现纤维二糖酶在大肠杆菌中的可溶性表达。在试验中又构建了纤维二糖酶分泌型表达质粒pHsh-ex-CelS,表达系统pHsh-ex可以将外源蛋白分泌到细胞周质空间,降低胞内蛋白浓度,促进外源蛋白的正确折迭。利用分泌型热激表达载体pHsh-ex对纤维二糖酶在大肠杆菌中进行分泌表达。收集大肠杆菌细胞周质空间蛋白,进行SDS-PAGE检测和酶活性测定。结果显示在分泌型表达载体中CelS有少量可溶性表达。分析原因可能是基因ce/S编码的产物太大(82 kDa),或者是载体pHsh-ex的信号肽不适合纤维二糖酶基因的分泌表达。(本文来源于《南京师范大学》期刊2014-04-28）
马经纬,张梁,薛卫,石贵阳[7]（2013）在《树干毕赤酵母基因组文库的构建及纤维二糖酶基因的筛选》一文中研究指出首次构建了树干毕赤酵母DNA基因组文库,该文库包含3 000个克隆,插入片段长度为0.5～8.0 kb。树干毕赤酵母染色体基因为15 441 179 bp,该文库覆盖1.08倍树干毕赤酵母染色体基因,筛选出任一基因或序列的概率为97%。提取文库中的质粒醋酸锂法转化酿酒酵母W303-1A,涂布于纤维二糖为唯一碳源的平板,通过纤维二糖酶对底物纤维二糖的底物特异性筛选文库,首次获得树干毕赤酵母来源的一个1.82 kb的纤维二糖酶基因。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2013年05期）
戴嘉[8]（2012）在《绿色木霉与黑曲霉固态混菌发酵生产纤维素酶、木聚糖酶和纤维二糖酶复合酶方法的研究》一文中研究指出以绿色木霉(Trichoderma viride)和黑曲霉(Aspergillus niger)诱变菌株为生产菌种,先用绿色木霉菌株在玉米芯等农林废弃物上进行培养,一段时间后再接入黑曲霉进行混菌培养生产纤维素酶、木聚糖酶和纤维二糖酶复合酶。结果表明其复合酶各酶最大活性条件为:绿色木霉液体种子接种量为80%,黑曲霉麸曲种子的孢子自绿色木霉接种后第6天接入。纤维素酶、木聚糖酶和纤维二糖酶第10天酶活分别为211IU/g、8038IU/g、355IU/g。(本文来源于《轻工科技》期刊2012年05期）
何可可,薛栋升,姚善泾[9]（2012）在《耐盐耐热型纤维二糖酶的分离纯化和性质研究》一文中研究指出采用由实验室从海底淤泥中筛选得到曲霉Aspergillus sp.菌株,进行固体发酵生产胞外纤维二糖酶,粗酶液经过硫酸铵沉淀、超滤和两次离子交换层析纯化后,得到了电泳纯的纤维二糖酶,酶的比活力由10.98 U mg 1提高到131.21 U mg 1。考察了该酶的酶学性质,结果表明该酶的最适温度为65℃,最适pH为4.5,具有较好热稳定性和pH稳定性。盐浓度对酶活力有较大影响,当NaCl浓度为40 g L 1时具有最佳酶活,在20~150 g L 1的高NaCl浓度环境下的酶活均高于不含NaCl环境下的酶活,是典型的耐盐型酶。在高盐浓度下,该酶的热稳定性有较大的提高,半衰期比无盐条件下提高了2~3倍,说明纯化得到的纤维二糖酶具有明显的海洋酶耐盐和耐热特性,有更广的应用范围。(本文来源于《高校化学工程学报》期刊2012年02期）
赵海峰,夏黎明[10]（2012）在《黑曲霉液体深层发酵产纤维二糖酶的研究》一文中研究指出纤维二糖酶(cellobiase)是纤维素酶系中的重要组分之一,目前由里氏木霉(Trichoderma reesei)生产的纤维素酶制剂中纤维二糖酶的活力明显偏低,限制了纤维素的糖化效率。本文采用一个黑曲霉菌株(Aspergillus niger ZU-04),在液态发酵条件下生产纤维二糖酶,对主要的发酵工艺参数进行了研究,结果表明,培养基中添加1.0%的麸皮对纤维二糖酶的形成有明显的促进作用;葡萄糖、玉米浆粉的适宜浓度分别为2.0%、0.3%;变温培养缩短了产酶周期,培养4d,酶活力达到最高,为6.23IU/mL。采用黑曲霉纤维二糖酶与里氏木霉纤维素酶协同水解酸预处理后的玉米芯,当纤维素酶用量为20IU/g底物时,纤维二糖酶活力和滤纸酶活力比例为0.43,2d酶解得率达到91.1%。(本文来源于《中国酿造》期刊2012年04期）
纤维二糖酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以非表面活性剂为模板,通过引入磁性纳米颗粒,制备了磁性介孔硅材料,实现了纤维二糖酶的原位固定,得到了磁性固定化酶.制备流程操作简单、原料易得、使用方便.溶胶-凝胶反应在水相、常温、中性条件下进行,适用于工业化生产.对磁性固定化酶进行了气体吸附分析、热重分析、表面形貌分析和磁性表征.结果表明,磁性固定化酶具有较大的比表面积、较窄的介孔分布和软铁磁性.与非介孔固定化酶相比,磁性固定化酶表观酶活明显提高.磁性颗粒的引入对酶活性没有显着的影响,并且可以非常方便和快速地从反应系统中回收再利用,结合磁场的可控性,非表面活性剂模板溶胶-凝胶法有望实现固定化酶的大规模可控释放与回收.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纤维二糖酶论文参考文献
[1].朱永瑞,曾柏全,曾磊,刘辉.黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析[J].生物技术通报.2016
[2].张翔,李书润,翟文韬,曹莹泽,齐宏旭.非表面活性剂模板溶胶-凝胶法制备磁性介孔二氧化硅实现纤维二糖酶的原位固定[J].高等学校化学学报.2015
[3].王蕊,王林风,闫德冉,赵子高,刘乐.基因工程菌毕赤酵母发酵产纤维二糖酶条件研究[J].山东化工.2015
[4].江春雨,魏益龙,李步轮.日粮精粗比对驴盲肠微生物纤维二糖酶活性的影响[J].安徽农业科学.2015
[5].阳芳.嗜热厌氧菌纤维二糖酶的克隆表达及酶学性质表征[D].华南理工大学.2015
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[9].何可可,薛栋升,姚善泾.耐盐耐热型纤维二糖酶的分离纯化和性质研究[J].高校化学工程学报.2012
[10].赵海峰,夏黎明.黑曲霉液体深层发酵产纤维二糖酶的研究[J].中国酿造.2012
论文知识图
