导读:本文包含了抗体可变区基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,抗体,单克隆抗体,序列,噬菌体,氯霉素,抗原。
抗体可变区基因论文文献综述
闫敏,米丹阳,孙向东,张振强,曾华辉[1]（2017）在《小鼠抗人S100A9单克隆抗体可变区基因克隆及其序列分析》一文中研究指出目的克隆小鼠抗人S100A9单克隆抗体(mAb)可变区基因并对其序列进行分析。方法从分泌小鼠抗人S100A9mAb的杂交瘤细胞株(ⅡD4B10)中提取RNA,采用逆转录PCR扩增出轻链可变区基因VL和重链可变区基因VH,并对VL和VH进行克隆测序与BLAST同源性比较分析。结果小鼠抗人S100A9 mAb VL基因编码区291 bp,编码97个氨基酸,属于IGKV14-111*01家族;VH基因编码区324 bp,编码108个氨基酸,属于IGHV1-80*01家族。所获取的VH和VL序列有明显抗体可变区特征,具有骨架区和互补决定区。结论获得鼠抗人S100A9 mAb的重链和轻链可变区基因,为构建基因工程抗体奠定基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2017年02期）
龙敏,董柯,王希,陈曦,刘冲[2]（2014）在《抗人AEG-1单克隆抗体可变区基因克隆及序列分析》一文中研究指出AEG-1基因位于人染色体8q22,编码582个氨基酸,参与多种信号转导途径并与多种恶性肿瘤的发生、发展及生物学表型密切相关。为更好地探讨AEG-1生物学功能,以纯化的p GSTag-AEG-1蛋白免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术并经筛选及鉴定,获得了分泌抗人AEG-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1 E3;Western blot及免疫组化证实该细胞株分泌的单克隆抗体能与肿瘤细胞中AEG-1蛋白特异性结合;RT-PCR方法从1E3细胞中克隆出抗AEG-1抗体的VH和VL基因片段,通过测序分析、碱基和蛋白序列的比对确认该株抗体为鼠源性Ig G的轻、重链可变区基因。进一步运用Kabat System在线分析系统对VH和VL基因进行结构分析,确证FWRs和CDRs的结构完整,VH编码117个氨基酸;VL编码119个氨基酸,属于轻链κV家族。实验结果为进一步研究AEG-1与恶性肿瘤发生、发展的关系及在其临床诊断中的应用奠定了基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2014年12期）
樊红艳,刘树玲,房婷,杨秀旭,于长明[3]（2013）在《抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体可变区基因的5'RACE扩增及序列分析》一文中研究指出目的:克隆并分析抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体轻链和重链的可变区基因。方法:从分泌抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株中提取总RNA,根据小鼠IgG恒定区序列设计特异性引物,通过5′RACE法扩增其轻链和重链的可变区基因,克隆入pMD18-T载体,测序并分析其可变区序列。结果:3株抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体的重链可变区基因序列全长均为423 bp,编码141个氨基酸残基;轻链可变区基因序列全长均为393 bp,编码131个氨基酸残基;在GenBank中对氨基酸序列进行比对分析,均符合小鼠IgG可变区基因的特征;根据Kabat法则对3株抗体轻链和重链可变区氨基酸序列进行分析,确定了3个抗原互补决定区、4个框架区和前导肽。结论:通过5'RACE法得到了3株抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体轻链与重链可变区基因,为进一步研究抗体叁维结构、人源化改造奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2013年04期）
孙元杰,李永明,刘志佳,张葵,魏玉英[4]（2013）在《抗SEB单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的基因构建和表达》一文中研究指出目的从分泌抗SEB的单克隆抗体(FMU-SEB-No.1)杂交瘤细胞中,克隆出FMU-SEB-No.1重链和轻链可变区(VH和VL)基因,构建FMU-SEB-No.1单链抗体(scFv)的原核表达载体,并进行scFv基因的蛋白表达。方法从FMU-SEB-No.1杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR扩增出VH和VL基因;通过在引物上设计linker序列,拼接VH和VL为完整FMU-SEB-No.1的scFv基因(FMU-SEB-scFv)。将测序正确的scFv基因克隆入PGEX4T-1载体,转化入E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达。通过SDS-PAGE,Western blot法分析其表达水平和特异性,酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定其抗原结合活性。结果测序结果显示,本实验成功克隆出FMU-SEB-No.1重链及轻链可变区基因,并成功构建FMU-SEB-scFv基因,所得的基因全长为750 bp,编码250个氨基酸。SDS-PAGE和Western blot分析表明,PGEX4T1-FMU-SEB-scFv在E.coli BL21(DE3)可表达为Mr约54 000的可溶型scFv/GST融合蛋白。间接ELISA检测结果表明,可溶型scFv/GST融合蛋白与SEB具有较高的抗原结合活性。结论制备并鉴定了针对SEB的基因工程抗体,为开发出针对SEB的治疗性抗体奠定了实验基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2013年01期）
邹明,陈杖榴[5]（2011）在《抗二氟沙星单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析》一文中研究指出采用RT-PCR技术,从抗二氟沙星单克隆抗体X1杂交瘤细胞株总RNA中扩增VH和VL基因片段,克隆入pUC18载体,测序进行(X1)可变区基因的克隆及序列分析。通过互联网检索发现VH和VL基因与Ig同源,分别符合小鼠IgVH和Igκ基因特征。VH基因全长363bp,编码121个氨基酸;VL基因全长为348bp,编码116个氨基酸。氨基酸序列分析结果显示,可变区含有明确的4个骨架区和3个抗原决定簇互补区。本试验成功获得X1株单抗的重、轻链可变区基因,为基因工程抗体的构建奠定了基础。(本文来源于《核农学报》期刊2011年06期）
刘瑞敏,王明丽,季泽俊,刘峰涛,白慧玲[6]（2011）在《利用噬菌体表面展示技术克隆抗人DR5抗体可变区基因》一文中研究指出目的:利用噬菌体表面展示技术制备抗人DR5单链抗体。方法:从抗DR5杂交瘤细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增VH和VL基因,并利用重迭扩增PCR将VH和VL拼接为scFv基因。将scFv与PAK100载体通过相同的酶切位点连接后,转化大肠杆菌XL1-Blue,经VSCM13辅助噬菌体拯救,构建成鼠抗人DR5单链抗体库。以DR5作为固相筛选分子,对噬菌体展示肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"生物筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选10个单克隆噬菌体扩增后进行ELISA鉴定,对所筛选克隆进行DNA序列测定和通过phage-ELISA验证噬菌体单链抗体的结合特异性。结果:经过3轮筛选后,对随机选取的10个噬菌体克隆进行鉴定,其中4个具有和DR5结合的特异性。结论:利用噬菌体表面展示技术筛选单链抗体,结果更加可信。(本文来源于《河南大学学报(医学版)》期刊2011年01期）
王鑫,张莹,何金生[7]（2010）在《β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5′RACE扩增及序列分析》一文中研究指出目的:克隆并分析抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因。方法:从分泌抗β淀粉样肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株A8中提取总RNA,根据恒定区序列设计基因特异性引物,通过5′RACE法扩增抗体的轻链和重链可变区基因,测定并分析可变区基因序列,并克隆入pMD18-T载体。结果:重链可变区基因序列全长450bp,编码150个氨基酸残基;轻链可变区基因序列全长429bp,编码143个氨基酸残基。在GeneBank中对氨基酸序列进行比对分析,二者均符合小鼠IgG可变区基因的特征。根据Kabat法则对A8抗体轻链和重链可变区氨基酸序列基因进行分析并确定了3个抗原互补决定区(CDR)、4个框架区(FR)和信号肽。结论:通过5′RACE法得到了抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因,为进一步研究抗体叁维结构,以及对该抗体进行人源化改造奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2010年02期）
李黄金,赵林,陈伟,刘家劲,李秋[8]（2009）在《抗氯霉素抗体可变区基因的克隆与序列分析》一文中研究指出[目的]克隆并分析抗氯霉素单克隆抗体(抗CAPmAb)的轻、重链可变区基因VL和VH。[方法]从分泌抗CAPmAb的杂交瘤细胞株4D10中提取总RNA,利用RT-PCR技术和一系列简并引物扩增VL和VH基因,扩增产物克隆于pMD18-T后测序,利用VBASE2数据库进行比对分析。[结果]有多对引物扩增到VL或VH基因,但同一基因的不同引物扩增到的序列相同。VL和VH基因长度分别为342bp和357bp,分别编码114个和119个氨基酸残基,编码产物均具有4个FR区、3个CDR区和2个特征性半胱氨酸残基,符合典型的KABAT结构特点,分别属于IGKV1亚群和IGH-V3609VH8家族。所克隆序列已被GenBank收录,序列号分别为FJ477893和FJ477894。[结论]成功克隆到抗CAPmAb的VL和VH基因,为进一步构建氯霉素残留检测用基因工程抗体打下了基础。(本文来源于《现代预防医学》期刊2009年24期）
杨娟[9]（2008）在《抗CD45单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析》一文中研究指出目的抗CD45单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析,为进一步的基因工程抗体改造研究奠定基础。方法1.杂交瘤细胞总RNA的提取:以异硫氰酸胍-苯酚-氯仿法提取总RNA。2.引物的设计:利用V区N端相对保守的特点,根据Ig可变区的序列,在N端和恒定区CH1合成5’和3’端兼并的“通用”引物。3. McAbV区基因的扩增:以RNA为模板,采用cDNA合成试剂盒合成第一条链cDNA,以cDNA为模板,用TaqDNA酶扩增McAbV区基因。4. V区基因核苷酸序列分析:用胶回收试剂盒回收PCR产物后,将McAb的VH基因和VL基因分别与pGEM-T载体连接,并转化大肠杆菌,经菌落PCR鉴定阳性菌。每一种连接产物挑取3个阳性菌进行序列分析。5.利用DNAtools,IMGT/QUEST及EBI TOOLS:ClustalW2分析软件对轻链和重链基因分别进行同源性比较。结果1.第一次PCR用2条重链上游引物(MH1,MH2),一条下游引物(IgG1-C 3’);轻链上(MK)下(Kc)游各一条引物进行扩增,测序结果获得编码单克隆抗体可变区的核苷酸序列。含引物的VH长397bp,VL长377bp,此次扩增出的基因序列无信号肽序列,适于ScFv的构建,进一步以更换引物进行二次PCR,来扩增含信号肽序列的基因。2.第二次PCR用3条重链上游(VH5’1,2,3),一条下游引物(IgG1-C 3’);3条轻链上游(VL5’1,2,3)引物,下游引物(Kc)进行扩增,测序结果:VH为有功能的基因片段,长348bp,编码116个氨基酸,在VH前有57bp的信号肽序列,编码19个氨基酸;含引物的Vκ长369bp,扩增的为非功能性Vκ链。经分析发现扩增出非功能轻链的上游引物为VL5’1,为了扩增出有功能的轻链基因,需重新设计引物。3.第叁次PCR用新合成的VL5’4,5取代原轻链上游引物VL5’1,用4条轻链上游引物(VL5’2,3,4,5),新合成下游引物(VL3’1),扩增出的Vκ核苷酸序列长333bp,编码111个氨基酸,在Vκ前有57bp的信号肽序列,编码19个氨基酸,经IMGT/QUEST系统分析为有功能的轻链基因。对所扩增的Ig基因进行同源性比较结果:抗CD45单抗有功能的轻链均属于IGκV1-117’01家族;功能性重链属于IGHV2-9-1’01家族。其中扩增出的非功能的轻链属于IGκV3-12’01家族。结论成功获取抗CD45单抗的轻链与重链基因,以及含有信号肽的基因,为进一步通过基因工程技术改造抗体奠定了良好的基础。(本文来源于《华中科技大学》期刊2008-05-01）
王宏,陈丹,邓宁,向军俭,靳英杰[10]（2007）在《抗重组人bFGF单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的构建和表达》一文中研究指出目的:从分泌抗重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株B2F3中克隆抗体可变区(V)基因,构建bFGF单链抗体(scFv),并进行可溶性表达。方法:从分泌bFGF mAb杂交瘤细胞株B2F3提取总RNA,用RT-PCR方法扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链的可变区基因(VL);再通过重迭延伸拼接(SOE)PCR方法,在VH和VL基因之间引入linker(Gly4Ser)3,构建bFGFscFv。将测序正确的scFv基因克隆到表达载体pCANTAB5E中,选择非抑制型菌株E.coli HB2151进行可溶性表达;经SDS-PAGE检测抗体表达水平,ELISA鉴定其抗原结合活性。结果:测序分析结果显示,VH基因序列全长375碱基对,编码125个氨基酸,VL基因序列全长399碱基对,编码133个氨基酸,二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FR)、3个抗原互补决定区(CDR)及抗体特征性的2个半胱氨酸残基;构建的scFv全长789碱基对,编码263个氨基酸,连接结构为VH-linker-VL。SDS-PAGE分析表明scFv基因在大肠杆菌为可溶性表达,表达产物主要位于周质腔中,表达产物的Mr为27000,与理论预期值相符;间接ELISA检测结果显示原核表达的scFv具有与bFGF特异性结合的活性。结论:成功地克隆bFGF mAb可变区基因,并构建表达bFGF scFv,为下一步研究bFGF抗体人源化改造奠定实验基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2007年12期）
抗体可变区基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
AEG-1基因位于人染色体8q22,编码582个氨基酸,参与多种信号转导途径并与多种恶性肿瘤的发生、发展及生物学表型密切相关。为更好地探讨AEG-1生物学功能,以纯化的p GSTag-AEG-1蛋白免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术并经筛选及鉴定,获得了分泌抗人AEG-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1 E3;Western blot及免疫组化证实该细胞株分泌的单克隆抗体能与肿瘤细胞中AEG-1蛋白特异性结合;RT-PCR方法从1E3细胞中克隆出抗AEG-1抗体的VH和VL基因片段,通过测序分析、碱基和蛋白序列的比对确认该株抗体为鼠源性Ig G的轻、重链可变区基因。进一步运用Kabat System在线分析系统对VH和VL基因进行结构分析,确证FWRs和CDRs的结构完整,VH编码117个氨基酸;VL编码119个氨基酸,属于轻链κV家族。实验结果为进一步研究AEG-1与恶性肿瘤发生、发展的关系及在其临床诊断中的应用奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗体可变区基因论文参考文献
[1].闫敏,米丹阳,孙向东,张振强,曾华辉.小鼠抗人S100A9单克隆抗体可变区基因克隆及其序列分析[J].细胞与分子免疫学杂志.2017
[2].龙敏,董柯,王希,陈曦,刘冲.抗人AEG-1单克隆抗体可变区基因克隆及序列分析[J].中国生物工程杂志.2014
[3].樊红艳,刘树玲,房婷,杨秀旭,于长明.抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体可变区基因的5'RACE扩增及序列分析[J].生物技术通讯.2013
[4].孙元杰,李永明,刘志佳,张葵,魏玉英.抗SEB单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的基因构建和表达[J].细胞与分子免疫学杂志.2013
[5].邹明,陈杖榴.抗二氟沙星单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析[J].核农学报.2011
[6].刘瑞敏,王明丽,季泽俊,刘峰涛,白慧玲.利用噬菌体表面展示技术克隆抗人DR5抗体可变区基因[J].河南大学学报(医学版).2011
[7].王鑫,张莹,何金生.β淀粉样肽单克隆抗体可变区基因的5′RACE扩增及序列分析[J].生物技术通讯.2010
[8].李黄金,赵林,陈伟,刘家劲,李秋.抗氯霉素抗体可变区基因的克隆与序列分析[J].现代预防医学.2009
[9].杨娟.抗CD45单克隆抗体可变区基因的克隆及序列分析[D].华中科技大学.2008
[10].王宏,陈丹,邓宁,向军俭,靳英杰.抗重组人bFGF单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的构建和表达[J].细胞与分子免疫学杂志.2007
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