通过可调控Lhx2的表达制备小鼠造血干细胞系

通过可调控Lhx2的表达制备小鼠造血干细胞系

论文摘要

【目的】研究一种永生化小鼠造血干细胞系的制备方法。【方法】通过添加Doxycycline来诱导Lhx2基因在成年骨髓的血液祖细胞/干细胞中表达,获得造血干细胞系。而在这些永生化的造血干细胞移植前,撤销Doxycycline,终止Lhx2基因的表达。【结果】永生化的造血干细胞系和原代造血干细胞一样,能在受体小鼠骨髓中增殖,并在外周分化为T细胞、B细胞和髓系细胞。Lhx2的异位表达可能会改变这些细胞以降低其在体内的适应性。【结论】本研究通过条件性表达Lhx2获得的永生化造血干细胞系与成年小鼠骨髓中的原代造血干细胞相比,具有相似的表面标志物,从而证明Lineage-Sca-1+c-kit+,永生化的造血干细胞系极易扩增,可以获得大量均一的细胞群体。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 实验材料
  •   1.3 实验方法
  •     1.3.1 质粒的构建与鉴定
  •     1.3.2 重组质粒转染
  •     1.3.3 骨髓培养
  •     1.3.4 流式分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 Lhx2基因的核苷酸序列
  •   2.2 逆转录病毒载体TtRMPVIR质粒图谱
  •   2.3 工艺流程
  •   2.4 永生化的造血干细胞系与原代造血干细胞对比显示
  • 3 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杜江龙,曹欣,薛宇佳,许强,杨学才,蔡葵蒸

    关键词: 造血干细胞,骨髓,永生化

    来源: 西南农业学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 甘肃省动物细胞工程技术研究中心,西北民族大学生命科学与工程学院

    基金: 国家自然科学基金(31700763,81760287),甘肃省青年科技基金计划(17JR5RA277)

    分类号: Q813

    DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2019.6.038

    页码: 1452-1456

    总页数: 5

    文件大小: 1629K

    下载量: 70

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