导读:本文包含了视皮层损伤论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:皮层,基质,干细胞,视神经,骨髓,损伤,细胞。
视皮层损伤论文文献综述
张鹏[1]（2010）在《骨髓源神经干细胞联合基质胶修复大鼠脑损伤及动态MEMRI成像大鼠视皮层实验研究》一文中研究指出研究背景随着社会的不断发展,交通设施更为发达,机动车辆增多,施工工地和工厂多,所导致的交通事故和工伤相应增加,创伤伤员逐年增多。在这些创伤中,颅脑损伤(Traumatic brain injury, TBI)的发生率较高,并且是创伤致死原因中的首要因素,在存活病例中,其致残率也较高,给患者带来极大的痛苦,也给社会和患者家人带来负担。尽管在颅脑损伤的院前救护、影像学技术、危重症急救和康复锻炼等临床技术方面已经有了显着的进步,但治疗的目的仅在于尽可能保存残留的神经功能,降低致死致残率,而对于已经发生的神经损害尚无有效的治疗手段。如何促进颅脑损伤后神经再生和神经功能恢复是当前研究的热点及难点。TBI后修复面临的主要问题是：原发性和继发性的神经元的缺失,以及受损部位周围的局部微环境存在一些不利于轴突再生的因素,主要有髓鞘相关轴突生长抑制因子(Nogo-A、MAG、Omgp等)、炎症反应、细胞外基质(ECM)改变、胶质瘢痕的形成等,因此治疗脑损伤的策略之一在于补充缺失的神经元,改善损伤局部的微环境。虽然大量的实验已经表明,无论是在成年还是未成年的动物中枢神经系统(central nerve system, CNS)内都有神经干细胞(neural stem cells, NSCs)的存在,这类细胞群能自我更新,并且具有分化成神经元和神经胶质细胞的能力,在一定条件下可以进行增殖、迁移和分化,在一定的程度上参与修复缺损的神经功能,但是在成体中枢神经损伤后此类细胞再生能力有限,远远不能完成神经功能再生修复的功能,特别是大面积受损的中枢神经组织,仅靠自身的神经干细胞修复是无法实现的。随着干细胞研究的不断进步,已经有大量的研究通过自体或者异体移植不同的干细胞(包括不同来源的成体间充质干细胞和胚胎干细胞等)而取得了一些令人振奋的效果,所以干细胞移植治疗颅脑创伤后中枢神经功能缺损为我们带来了新的希望。在种子细胞来源方面,骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells, BMSCs)来源丰富易获取,有研究表明成人骨髓基质细胞在体外可快速有效地诱导分化成为成人骨髓源性神经干细胞(human adult bone marrow-derived neural stem cells, MDNSCs),而且成人骨髓源性神经干细胞具有和自身脑源性的神经干细胞相似的生物学特征,如果应用于患者自身移植,避免了可能的免疫排斥反应,并且没有伦理争议。除了要解决种子细胞的问题外,还要改善损伤局部的微环境,使其适于神经组织的修复,同时移植入外源性细胞替代失去功能或死亡的细胞,并与宿主细胞形成具有功能的整合,改善神经功能缺陷。组织工程支架材料的发展为解决这一问题带来了希望,支架材料类似于细胞外基质的结构和功能,提供种子细胞粘附的支架,在代替细胞外基质方面起着重要的作用,目前研究的神经组织工程支架材料主要有：天然生物材料、合成材料、化学修饰材料、复合材料、生物衍生材料及纳米材料等。鉴于以上因素,本实验选用骨髓基质细胞诱导得到的神经干细胞作为种子细胞与作为支架材料的基质胶(BD Biosciences, Matrigel)联合移植来观察对脑损伤的修复作用。种子细胞来源的不断丰富和组织工程支架材料的不断改进,推动干细胞移植疗法的发展,但是在应用干细胞疗法之前我们有很多问题需要解决,其中如何通过非侵入性的方法对干细胞在体内的迁移分化和功能情况等进行监测和评估就是其中之一,因为移植细胞和宿主细胞之间的相互作用和功能联系的机制还不甚清楚,而这些是我们把干细胞移植疗法应用于临床之前需要解决的问题,一种有效的非侵入性的评估干细胞移植疗法的方法对于我们制定临床策略和评价预后同样重要。在现有的多种方法中,神经影像学用于活体示踪是目前研究最热门的方法之一,主要包括磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)技术,核医学技术,荧光和生物发光技术等。通过纵向长期评价,而不需要处死动物,活体示踪能够更好的研究移植后细胞的迁移和移植细胞发挥作用的机制,这些不仅对于发展干细胞疗法有促进作用而且对于将来的临床应用有更大的实用价值。目前国内外的研究多是从结构上活体示踪移植干细胞的存活和迁移,如SPIO (Superparamagnetic iron oxide, SPIO)的应用等,但这些标记物结合影像学活体示踪无法从功能上追踪移植细胞在宿主神经组织内的功能状态,所以我们需要从功能上评估和示踪移植干细胞与宿主组织的功能整合。在功能成像研究方面,以往采用的FDG PET(F-fluoro-deoxy-D-glucose PET)及BOLD MRI(blood oxygenation level dependent MRI)方法只可提供区域脑组织活动的间接指标信息—脑局部糖代谢变化,尚难以直接反映神经功能活动变化,特别是尚无法在细胞水平上直接反映移植干细胞的功能活动。由此本实验组考虑应用活性诱导锰离子增强磁共振技术进行神经干细胞移植后功能恢复评估的前期研究。锰离子增强磁共振成像(manganese-enhanced MRI,MEMRI)技术,是一种功能磁共振成像技术。1997年,Lin YJ and Koretsky AP首次应用该技术进行大鼠电刺激前肢后脑功能成像,并阐述了MEMRI功能成像的原理：利用神经细胞发生电活动时电压依赖性钙离子通道开放,而锰离子作为钙离子的类似物、可以通过开放的电压依赖性钙离子通道进入细胞,加之锰离子是一种顺磁性物质,从而可以起到标记发生电活动的神经细胞的作用,使这些激活的区域获得磁共振增强效果,这基于其可以通过开放的电压依赖性钙离子通道进入神经细胞及在局部用药时可以沿神经束顺行传递这两方面特性,而且锰离子在神经功能活动发生时迅速进入激活的神经元后,在细胞内的清除期较长,锰离子可以在激活的神经元中持续增加聚集,这种锰离子显像时程累积效应将有助于从数以千万计的移植细胞中捕捉到更细微、更瞬时的神经元电活动,其既往应用主要包括神经功能成像、神经束成像和脑构筑成像等研究,近期也将其应用于神经系统疾病成像。鉴于大鼠视觉系统功能和解剖的确定性,以及国内外鲜见应用锰离子增强成像技术功能成像大鼠视觉皮层的研究,本实验中第二部分选择了视觉皮层为研究对象,尝试应用动态成像方法示踪大鼠视觉皮层的功能活动,为神经系统功能研究提供方法学上的支持。第一部分：骨髓源性神经干细胞联合基质胶对大鼠脑损伤的治疗作用目的：目前在修复脑损伤的研究中,关于干细胞和组织工程材料联合移植修复脑损伤的研究较少,尚鲜见有骨髓源性神经干细胞联合基质胶(Matrigel)修复脑损伤的研究,本实验主要探讨胞,并用bFGF、EGF和N2等诱导成骨髓源性神经干细胞,然后用荧光染剂DiI标记后移植。32只Wistar大鼠,随机分为4组：正常组,生理盐水组,单纯BMSC-D-NSCs移植组,BMSC-D-NSCs联合基质胶移植组。采用改良自由落体撞击脑损伤模型,损伤7天后采用损伤区移植,分别于细胞移植后1、7、14、21、28天进行动物行为学评分,移植4周后处死实验动物,相关组织学染色后,计算损伤所致空腔体积,分析移植细胞的存活和迁移情况,数据资料应用SPSS13.0软件进行分析,各组治疗后的体积比较采用单向方差分析；不同处理组在五个时间点的行为学评分采用重复测量数据的方差分析进行统计分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果：单纯BMSC-D-NSCs移植组和BMSC-D-NSCs联合Matrigel组在组织缺损体积方面较生理盐水组有显着减少,各组差异有统计学意义(P=0.000),且BMSC-D-NSCs联合Matrigel组较单纯BMSC-D-NSCs移植组损伤空腔体积显着减小,差异有显着性意义(P=0.000)；大鼠行为学评分,正常组评分一直稳定较低水平。经重复测量方差分析,结果显示组间差异显着(F=345.261,P=0.000),治疗组比不治疗组mNSS评分要低,治疗方法与时间之间有交互作用(F=20.193,P=0.000),提示不同治疗方法随时间的增加评分变化趋势不同。进一步分析单独效应,结果显示除1天外各时间点内各组间比较均有显着性差异(P均<0.05)。结论：BMSC-D-NSCs联合Matrigel移植组比单纯BMSC-D-NSCs移植组能更好的促进脑损伤的修复。第二部分：动态锰离子增强磁共振功能成像大鼠视觉皮层目的：虽然我们的前期研究表明,BMSC-D-NSCs联合Matrigel移植组比单纯BMSC-D-NSCs移植组能更好的促进神经功能恢复,但其在活体的功能情况仍不明了,本课题组拟采用动态MEMRI功能成像来研究BMSC-D-NSCs移植后在体内的功能情况,我们首先进行了一些成像方法上的初步研究,本部分用动态锰离子增强磁共振技术行大鼠视觉皮层功能成像,为神经系统功能研究提供方法学上的参考。方法：成年雄性Wistar大鼠6只,右颈外动脉插管后于连续的4个时段分别进行不同的处理,第一时段(5min)成像前不给予药物处理,无视觉刺激；第二时段(10min)成像前经右颈内动脉应用甘露醇开放血脑屏障和注射氯化锰,无视觉刺激；第叁时段(15min)成像前仅给与氯化锰注射,给予视觉刺激；第四时段(5min)成像前注射氯化锰与谷氨酸混合液,无视觉刺激；每一时段处理后立即进行大鼠头颅磁共振成像,应用SPM软件进行图像的配准和平滑处理,应用Matlab软件得出图像的配色图及等高线图；选取视觉皮层进行兴趣区(Regions of interest,ROI)分析,观察不同处理后磁共振中脑内特异性增强区域并比较大鼠视觉皮层的信号强度,数据资料统计分析用SPSS13.0软件进行,应用配对t检验比较第二阶段和第叁阶段的差异。结果：磁共振图像分析显示第一、二时段大鼠脑内未发现特异性增强区域,第叁时段大鼠右侧视觉皮层特异性增强,第四时段大鼠右侧脑内多个核团特异性增强；ROI分析显示第叁时段处理后的视觉皮层信号强度(1.897±0.172)明显强于第二时段(1.549±0.163),差异有统计学意义(P<0.05)。结论：本研究所采用的动态锰离子增强磁共振成像技术可用于分析大鼠视觉皮层功能活动,也为研究神经系统功能提供了新的方法。(本文来源于《南方医科大学》期刊2010-03-01）
陈倩,孙兴怀,俞道义,戴毅,笪翠弟[2]（2006）在《大鼠急性视神经损伤后初级视皮层即早基因的表达改变》一文中研究指出目的:探讨急性视神经损伤早期即早基因c—jun、c—fos在初级视皮层的表达分布及其与视神经损伤程度的关系。方法:采用视神经钳夹和视神经离断的方法分别造成SD大鼠单眼急性部分视神经损伤和视神经完全性损伤的动物模型。分别于正常组和损伤后2h、1d、3d、1w、1m取材行冰冻切片,以免疫荧光组织化学染色法检测大鼠损伤眼代表区初级(本文来源于《第叁届全球华人眼科学术大会暨中华医学会第十一届全国眼科学术大会论文汇编》期刊2006-08-01）
陈倩[3]（2006）在《急慢性视神经损伤模型的初级视皮层变化实验研究》一文中研究指出视神经损伤后初级视皮层神经元是否发生不可逆性变性或死亡是神经保护及人工视觉相关课题中的研究热点。本课题拟从实验角度出发探讨急慢性视神经损伤后视觉通路中初级视皮层的变化及其可能的机制。第一部分：大鼠急性视神经损伤后初级视皮层神经元的早期变化本部分的研究目的在于探讨急性视神经损伤早期即早基因c-jun、c-fos在初级视皮层的表达分布及其与视神经损伤程度的关系；此外了解视神经损伤早期初级视皮层神经元总数以及接受LGN输入的Ⅳ层神经元的数量是否发生改变。采用视神经钳夹和视神经离断的方法分别造成SD大鼠单眼急性部分视神经损伤和视神经完全性损伤的动物模型。分别于正常组和损伤后2h、1d、3d、1w、1m取材行冰冻切片，以免疫荧光组织化学染色法检测大鼠损伤眼代表区初级视皮层的c-Jun、c-Fos蛋白表达并计算阳性神经元分布密度，此外检测NeuN标记的初级视皮层神经元密度及接受LGN输入的Ⅳ层神经元密度，采用方差分析方法进行统计学检验。结果显示视神经损伤后2h初级视皮层即出现c-Jun蛋白的表达升高，1d达高峰；此后降低，但至1m时达另一峰值。视神经离断组c-Jun升高幅度高于视神经钳夹组，且高峰期维持时间较久。视皮层的c-Fos蛋白表达在视神经钳夹伤后2h降低，3d达谷底，之后回升；视神经离断组降低幅度小于视神经钳夹组，且2h时存在短暂表达升高。急性视神经损伤早期NeuN标记的初级视皮层的神经元密度和Ⅳ层神经元密度与正常组相比均无明显改变。第一部分的研究结果表明大鼠急性视神经损伤后2h初级视皮层即发生即早基因c-jun、c-fos的表达改变。急性视神经损伤早期(尤其2h～3d)初级视皮层的c-Jun、c-Fos蛋白表达呈相反态势，提示这两组转录因子可能通过作用相反的途径在初级视皮层引起不同的效应。除损伤程度的影响以外，c-Jun和c-Fos蛋白之间可能还存在某种平衡机制参与调节这两种转录因子的表达水平。第二部分：猕猴慢性高眼压模型初级视皮层的神经元改变第二部分的研究目的在于探讨不同时期猕猴慢性高眼压模型初级视皮层神经元的代谢和神经化学改变及其与RGC损失的关系，并了解不同时期猕猴慢性高眼压模型的初级视皮层神经元数量以及超微结构是否发生变化。研究对象为4只正常猕猴和11只通过激光小梁网烧灼方法造成的不同时期的慢性高眼压猕猴。取材于V1区视皮层，做冠状切面和切线位的脑组织冰冻切片，分别用组织化学方法进行细胞色素氧化酶(CO)的染色，荧光免疫组化方法进行NeuN神经元标记、GFAP胶质细胞活性检测、神经营养因子BDNF及其受体TrkB表达的检测。细胞色素氧化酶染色结果计算平均灰度值，NeuN标记的神经元计算其4C层的分布密度，GFAP和BDNF表达均计算阳性区域面积，分析结果与RGC轴突损失率之间的关系。并用透射电镜的方法观察初级视皮层4层神经元的超微结构改变。统计学分析采用方差分析法。结果显示正常组猕猴V1区视皮层4层CO染色均匀且致密，青光眼组猕猴因双眼分期不同4C层呈现深浅交替的眼优势柱结构，双眼绝对期者呈均匀一致的淡染。灰度值计算结果显示RGC轴突损失＜50％的模型眼代表区4C层平均灰度值与正常组相比无明显差异，而轴突损失＞50％的模型眼代表区4C层平均灰度值与正常组相比有高度统计学差异。4C层神经元计数在青光眼组与正常组间无统计学差异。与CO染色结果类似，当轴突损失＜50％时，模型眼代表区4C层GFAP表达与正常组无明显差异，当轴突损失＞50％时，模型眼代表区4C层GFAP表达明显高于正常组。青光眼组猕猴视皮层BDNF表达呈普遍性降低但分布均匀，且与RGC损失程度无关；TrkB表达也呈不同程度降低。青光眼组猕猴初级视皮层的超微结构改变包括尼氏体减少、线粒体肿胀、内质网扩张、脂褐素数量增加等，并无神经元不可逆变性或死亡的证据。以上结果表明在猕猴慢性高眼压模型中，初级视皮层表现出与RGC轴突损失率相关的神经元代谢活性改变和胶质细胞的活化，50％的RGC轴突损失率可能是视觉中枢皮层水平代谢活性改变的关键点，提示神经保护措施的实施可能在青光眼病程早中期RGC损失小于50％时更为有效。BDNF和TrkB的表达降低，表明初级视皮层神经元的功能抑制状态，并可能通过下行营养支持的削弱参与了青光眼病理机制中的恶性循环。鉴于在急慢性视神经损伤后初级视皮层均未发生神经元数量的减少，神经元超微结构也无神经元不可逆变性或死亡的证据，提示视神经损伤后的初级视皮层改变可能仅为皮层突触可塑性的一种表现形式。(本文来源于《复旦大学》期刊2006-04-12）
成文平[4]（2003）在《猫自体骨髓源性神经干细胞移植治疗视皮层损伤的实验研究》一文中研究指出第一部分 猫骨髓源性神经干细胞的培养和鉴定 目的 1、观察家猫骨髓基质细胞体外培养情况；2、探索其诱导分化为神经干细胞的可行性，为家猫骨髓基质细胞作为自体神经干细胞种子细胞提供理论依据。 材料和方法 1、材料：经检疫健康合格的成年家猫20只，雌雄各半，年龄1～2岁，体重2.5～4.0kg。 2、方法：氯胺酮肌肉注射麻醉后，从后肢股骨下端内侧抽取骨髓3～5ml，加神经干细胞培养基稀释，然后加入含细胞分离液3～4ml的离心管中，经密度梯度离心后分离得到骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells，BMSCs)。分离得到的BMSCs用神经干细胞培养基(Neural Stem cells medium，NSCM)重悬浮为(1～2)×10~5个/ml，种植于24孔培养皿中，给予不同的培养条件进行诱导分化。 根据培养基添加血清及因子情况不同分4组：(1)单纯NSCM组；(2)NSCM+FCS(20％终浓度)组；(3)NSCM+LIF(20ng/ml)+bFGF(20ng/ml)组；(4)NSCM+FCS(20％终浓度)+LIF(20ng/ml)+bFGF(20ng/ml)组。 根据去非贴壁细胞时间不同分4组:(1)4h组，培养4h去除非贴壁细胞;(2)24h组，培养24h去除非贴壁细胞;(3)4sh组，培养4sh去除非贴壁细胞组;(4)不去除贴壁细胞组。 倒置相差显微镜下观察不同培养条件下活细胞及免疫细胞化学染色情况。结果 猫BMSCS在无血清培养中不管是否添加LIF和bFGF都不能正常生长，大部分细胞很快凋亡;在有血清培养中，不管有无LIF和bFGF细胞生长都无明显差别，接种4h去除非贴壁细胞，可发现个别细胞贴壁，贴壁细胞呈椭圆形，有单个小突起，继续培养发现这些细胞无增殖，并且很快消失;培养24h后贴壁细胞数目明显增加，并看到有细胞突起增多增长，继续培养发现大部分细胞数量较多的培养孔细胞可增殖;培养48h后可观察到贴壁细胞有分裂增殖，继续培养l一2周细胞爬满培养皿底部，可传代重复上述过程，如不传代，在贴壁细胞上可长出大圆形细胞，并可形成克隆。在未去除非贴壁细胞的观察中发现:24h内即有大圆形细胞出芽，以后出芽端不断增长，并贴壁生长，这些细胞以后可形成岛屿状细胞克隆团，给予适当的分化条件后这些细胞能分化成具有细长突起、多种形态的细胞。 BMSCS在培养6一7天后，这些具有增殖能力的BMSCS表达神经干细胞特异性抗原Nestin，而且能将其诱导分化出神经元样细胞，免疫细胞化学检测可见有NSE、NeuN抗原表达。结论 家猫BMscS需要在有血清培养基中才能正常生长，其培养需要有一定密度，其具有干细胞特征，可传代扩增，经诱导可表达神经干细胞特异性抗原Nestin，在合适的条件下可分化出NetlN、NSE阳性细胞等具有神经细胞特征的细胞，证实家猫BMSCs可诱导为神经干细胞。第二部分猫骨髓源性神经干细胞移植修复视皮层损伤的实验研究 目的 1、建立猫视皮层损伤偏盲模型;2、探索猫骨髓源神经干细胞(Neuralstem cells，NSCs)修复视皮层损伤的可行性。材料和方法 1、材料:成年健康家猫10只(经术前神经生物学检查无异常)。 2、方法: (l)在全麻下行开颅手术，·电凝烧灼切除右侧枕叶皮层及与视觉有关的颗顶叶皮质(包括5、7、17、18、19、Zoa、20b、Zla、Zlb、DLS、VLS、PS、PMLS、PLLS、AMLS、ALLS和SVA等皮层区域及EVA的一部分)。术后行神经生物学检查，观察视野情况。 (2)从已经建模成功的偏盲动物抽取骨髓(术后5周)，从中分离得到BMSCS，在体外给予神经干细胞培养基培养增殖(1周)，经BrdU标记(3天)后植入视皮层损伤区，观察:a、动物模型行为学改变;b、用免疫组织化学方法观察移植细胞存活情况(移植术后24周灌注取材)。结果 l、制作偏盲模型10例，均为右侧视皮层切除。死亡2例，左侧瞬目反射消失7例、1例反射正常。左侧定向反射消失6例，未消失2例。 2、经干细胞移植治疗的视皮层损伤动物模型在本实验所观察的时限内未见有明显的行为学改变，但免疫组织化学检测发现损伤区有Brdu及Nestin阳性细胞。结论 l、通过切除单侧枕叶及与视觉有关的颖顶叶皮层，可以成功制作偏盲动物模型。 2、猫骨髓源性干细胞在移植入皮层损伤动物模型后，可以在脑内存活并分化为神经元样细胞，因而可以考虑将其作为视觉功能缺失细胞治疗的种子细胞。(本文来源于《中国人民解放军第一军医大学》期刊2003-05-01）
视皮层损伤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨急性视神经损伤早期即早基因c—jun、c—fos在初级视皮层的表达分布及其与视神经损伤程度的关系。方法:采用视神经钳夹和视神经离断的方法分别造成SD大鼠单眼急性部分视神经损伤和视神经完全性损伤的动物模型。分别于正常组和损伤后2h、1d、3d、1w、1m取材行冰冻切片,以免疫荧光组织化学染色法检测大鼠损伤眼代表区初级
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
视皮层损伤论文参考文献
[1].张鹏.骨髓源神经干细胞联合基质胶修复大鼠脑损伤及动态MEMRI成像大鼠视皮层实验研究[D].南方医科大学.2010
[2].陈倩,孙兴怀,俞道义,戴毅,笪翠弟.大鼠急性视神经损伤后初级视皮层即早基因的表达改变[C].第叁届全球华人眼科学术大会暨中华医学会第十一届全国眼科学术大会论文汇编.2006
[3].陈倩.急慢性视神经损伤模型的初级视皮层变化实验研究[D].复旦大学.2006
[4].成文平.猫自体骨髓源性神经干细胞移植治疗视皮层损伤的实验研究[D].中国人民解放军第一军医大学.2003
论文知识图
