论文摘要
白细胞介素1β（IL-1β）在免疫调节和炎症反应中起着重要作用。为了解黄鳝IL-1β基因的功能,以黄鳝肝脏cDNA为模板,PCR扩增IL-1β基因后将其亚克隆至pET28a表达载体中。将序列测定验证过的重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,筛选阳性重组菌进行IPTG诱导后Ni2+亲和柱分离纯化获得重组蛋白rIL-1β;用SDS-PAGE电泳和Western Blot检测rIL-1β。按2μg/kg剂量对黄鳝进行腹腔注射rIL-1β,用荧光定量PCR分析注射rIL-1β对肝脏IL-1β、NF-κB、AKR和Nrf2等基因表达的影响。结果表明:成功构建了黄鳝IL-1β基因的原核表达载体并实现了重组蛋白的分离纯化;重组的rIL-1β蛋白具有较好的生物活性,腹腔注射rIL-1β显著提高了肝脏IL-1β和NF-κB基因的表达水平,却对AKR和Nrf2基因的表达有明显的抑制作用。研究为进一步深入探索鱼类IL-1β基因在免疫系统中的功能提供了参考资料。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 杨龙,臧彧伟,郑淑婷,李伟
关键词: 白细胞介素,黄鳝,活性分析,重组表达
来源: 生物学杂志 2019年06期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 长江大学生命科学学院
基金: 湖北省科技创新创业服务能力建设专项项目(2017BEC006)
分类号: Q78
页码: 42-46
总页数: 5
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