导读:本文包含了组织培养法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:软骨,组织,细胞,基质,小麦,存活率,成活率。
组织培养法论文文献综述
韩运宁,亓建洪[1]（2017）在《体外组织培养法保存关节软骨的研究进展》一文中研究指出同种异体软骨移植是成功治疗大面积关节软骨缺损的一种选择。大量研究报道,异体骨软骨移植后软骨移植物的存活率较高,10年存活率在71%~85%之间,15年存活率高达74%,20年存活率可以达到66%~([1])。相对于关节置换手术,同种异体软骨移植术后的患者恢复快、效果好。运动人群中88%的病人可重新运动,其中79%的病人可以恢复到受伤前的运动水平~([2])。总体来说,同种异体骨软骨移植治疗已经取得很好的效果。然而,在保存期间软骨细胞生物活性的降低限制了同种异体软骨移植的应用。有研究发现(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2017年06期）
李军,亓建洪,陈彬,魏振华,门猛[2]（2014）在《组织培养法中骨软骨移植物的体积大小对软骨细胞存活率及力学性质的影响》一文中研究指出目的通过在体外组织培养液中保存不同体积大小的羊膝关节软骨一定时间后比较其软骨细胞存活率及生物力学性质差异,并且观察新型组织培养液TSMU-1液对软骨细胞存活率的影响,为进一步寻找最佳的骨软骨移植物保存方式及保存液提供有效的实验依据。材料与方法以羊膝关节软骨为实验材料,无菌条件下用ARTHREX骨软骨移植器械在羊膝关节股骨髁关节面内外侧负重区获取圆柱状骨软骨块100枚,包括软骨下骨全长约10mm,(本文来源于《第十叁届亚洲运动医学大会论文汇编》期刊2014-10-20）
李军[3]（2014）在《组织培养法保存软骨移植移植物体积对软骨细胞存活率及力学性质的影响》一文中研究指出目的通过在体外组织培养液中保存不同体积大小的羊膝关节软骨一定时间后比较其软骨细胞存活率及生物力学性质差异，并且观察新型组织培养液TSMU-1液对软骨细胞存活率的影响，为进一步寻找最佳的骨软骨移植物保存方式及保存液提供有效的实验依据。材料与方法以羊膝关节软骨为实验材料，无菌条件下用ARTHREX骨软骨移植器械在羊膝关节股骨髁关节面内外侧负重区获取圆柱状骨软骨块100枚，包括软骨下骨全长约10mm，直径约为6mm，PBS液冲洗3遍备用。将骨软骨块随机分为2组（每组各50枚），即两个不同培养液成分的无菌培养瓶中进行保存。A1组： TSMU-1液（泰山医学院1号软骨保存液），TSMU-1液具体成分为基础保存液中添加部分改善细胞活性的因子（具体配置方法及成份正在申请专利）；B1组：基础保存液。基础保存液成份为99%EMEM培养液和1%的青链霉素（各100UI/ml）。在4℃、每隔两天换液的条件下，于保存第1天、35天每瓶随机各取出20块进行检测软骨细胞存活率（EB/FDA双荧光法）。第35天A1组取出10枚标本，以特制骨刀切取软骨试样标本加工成长度6mm，宽度4mm，厚度2-3mm的试样，在日本岛津AG-10TA自动控制电子万能实验机上对10个软骨试样进行一维拉伸实验。实验机的拉伸实验速度为5mm/min。主要观察试件拉伸最大载荷、最大位移、最大应力、最大应变等力学指标。无菌条件下，用消毒钢锯切取羊股骨髁半髁关节面（包括软骨下骨约10mm）20个，随机分2组（每组各10个），同样分配至以上A、B两种保存液中保存，并标记为A2组（TSMU-1液+半股骨髁关节面）,B2组（基础保存液+半股骨髁关节面组）。同样条件下，再切取完整的羊股骨髁关节面（包括软骨下骨约10mm）20个，分组及保存方式同上，标记为A3组（TSMU-1液+完整股骨髁关节面组）,B3组（基础保存液+完整股骨髁关节面组）。保存第1天、35天，无菌条件下用ARTHREX骨软骨移植器械在不同种类保存液中的全髁和半髁关节面负重区随机获取直径约为6mm的圆柱状骨软骨块，每组每次各20枚，检测软骨细胞存活率。保存第35天时，A2组和A3组再随机各取10枚圆柱状骨软骨块，同样加工成长度6mm，宽度4mm，厚度2-3mm的试样，与A1组共同进行一维拉伸力学性质实验。拉伸实验速度为5mm/min。观察试件拉伸最大载荷、最大位移、最大应力、最大应变等力学指标。采用SPSS17.0统计分析软件进行统计处理，所有数据均用x s表示。对各个保存组及每组不同时间点之间细胞存活率采用重复测定数据的方差分析，然后对具有统计学意义的处理因素（A因素即不同营养液，35天；B因素指同一种营养液不同的软骨保存体积，35天），分别进行单因素方差分析q检验（S-N-K法）。一维拉伸力学性能指标数据的统计学分析采用单因素方差分析q检验。P<0.05代表有统计学差异。结果第1天时各组软细胞成活率均保持在90%以上，各组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。第35天时,骨软骨块各组中软骨细胞成活率均出现降低。A液（TSMU-1液）各组比较，A1组＞A2组，A1组＞A3组，A2组＞A3组,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。B液(基础保存液)各组之间比较，B1组＞B2组，B1组＞B3组，B2组＞B3组。结果是同种保存液里，柱状软骨块保存效果最佳，半髁关节面组好于全髁关节面组（见表1）A、B两种保存液之间比较，可见A1组＞B1组，A2组＞B2组，A3组＞B3组。各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。表明A液（TSMU-1液）好于B液(基础保存液)（见表1）A液各组中一维拉伸实验结果表明，最大载荷、最大位移、最大应力、最大应变等生物力学数据为A1组＞A2组，A1组＞A3组，A2组＞A3组。柱状软骨块的软骨拉伸力学性能保持的最好，半髁关节面组好于全髁关节面组（见表2）结论体外组织培养中骨软骨移植物的体积大小对其软骨的细胞存活率及生物力学有一定影响，体积较小的骨软骨移植物软骨细胞存活率更高，力学性质更好。另外，新型骨软骨组织培养液TSMU-1液能够有效提高体外液体保存的骨软骨移植物的软骨细胞存活率。意义关节软骨缺损的修复方法一直是困惑运动医学及骨科医生的难题。目前在临床上用新鲜的同种异体骨软骨移植治疗全层软骨损伤取得了一定的效果，但由于新鲜异体软骨的取材受到许多方面的限制，影响了异体骨软骨移植的临床应用与推广。因此，延长骨软骨移植物的体外保存时间并保持其活性成为学者研究的焦点。本课题研究发现体外组织培养法中较小的骨软骨移植物与大块移植物比较有更好的保存效果，另外泰山医学院运动医学研究所课题组多年研究，创新研制的新型骨软骨组织培养液TSMU-1液具有提高软骨细胞成活率以及组织活性的作用，从而为研究更为理想的组织培养保存液以及临床推广应用奠定了基础。(本文来源于《泰山医学院》期刊2014-04-01）
陈琦,王晓丽[4]（2014）在《组织培养法保存新鲜天麻样品对天麻块茎总DNA提取效果的影响》一文中研究指出目的以天麻块茎为材料,研究组织培养法用于保存新鲜天麻样品对天麻块茎DNA提取的纯度和浓度的影响。方法将新鲜天麻块茎切割成为1cm3形状,接种于MS培养基中,在温度T=21℃的条件下暗培养。分别在培养10d,20d,30d,40d,50d和60d的时候取出样品,再用改良的CTAB法提取其总DNA,测定DNA浓度及纯度。结果组织培养法保存10d,20d,30d后的天麻样品DNA提取,获得的DNA浓度和纯度都较为理想,而保存40d以后提取的样品DNA虽纯度不理想,但浓度较高。结论经过组织培养法保存的天麻样品,能够长时间的保持一定的生长状态,同时也能提取出浓度较高的基因组DNA。(本文来源于《现代中药研究与实践》期刊2014年01期）
刘北辰[5]（2013）在《用组织培养法种果树》一文中研究指出美国的农业管理体制较为完善，随着新农业法的实施和管理方法创新，美国农业管理体制呈现着向高科技方向发展。其中贝特茨维尔农业研究中心的功劳不可磨灭。 贝特茨维尔农业研究中心是世界上专门研究食物生产的最全面的实验所之一。在它那2900公顷农场里，有果(本文来源于《中国质量报》期刊2013-09-04）
刘召庆[6]（2013）在《ZVAD-fmk、L-NAME对体外组织培养法保存异体软骨组织活性的影响》一文中研究指出目的在体外组织培养液中加入ZVAD-fmk、L-NAME用于保存同种异体骨软骨组织一定时间，观察其是否具有提高软骨细胞成活率、保持软骨组织活性的作用，进而探索具有提高软骨组织保存效果的培养液成分。材料与方法以羊膝关节骨软骨为研究标本，无菌条件下，用自制取软骨器获取同样大小的骨软骨块270枚，包括软骨下骨全长约5mm，直径约为4.5mm，PBS液冲洗3遍，随机分配到A组、B组、C组叁个不同培养液成分的无菌培养瓶中进行保存，分别为A组(对照组）：基础保存液，B组：基础保存液中添加50uMol/L的ZVAD-fmk，C组：基础保存液中添加15mg/L的L-NAME。基础培养液成份为99%EMEM培养液和1%的青链霉素（各100UI/ml）。在4℃、每隔两天换液的条件下，分别于保存第1、21、35天每瓶取出30块进行检测，包括EB/FDA双荧光法测软骨细胞存活率，Annexin V-FITC与PI双染色法测定软骨细胞凋亡率（流式细胞仪定量检测），软骨组织番红-O染色。结果第1天时,叁组细胞成活率均保持在90%以上，各组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。叁组细胞凋亡率凋亡率均在5%左右，差异不具有统计学意义（P＞0.05）。软骨基质番红-O染色IOD值均在190左右，叁组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。第21天时,叁组软骨细胞成活率均出现下降，其中A组(基础保存液)下降明显，C组（基础保存液中+L-NAME）次之，B组（基础保存液+ZVAD-fmk）仍能保持在85%，叁组间差异有统计学意义(P<0.05)。各组细胞凋亡率均有上升，以其中C组最为明显，叁组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组软骨IOD值均有下降，B组较高，C组次之，A组最低。各组之间差异比较具有统计学意义（P<0.05）。第35天时，各组成活率均出现下降，其中A组(基础保存液)、C组（基础保存液中+L-NAME）下降明显，已经降至50%以下。B组（基础保存液+ZVAD-fmk）仍能保持在70%以上，且叁组间差异比较有统计学意义(P<0.05)。各组凋亡率均出有上升，其中A组(基础保存液)、C组（基础保存液中+L-NAME）上升明显，已经升至70%。B组（基础保存液+ZVAD-fmk）仍能保持在25%左右，且各组间差异有统计学意义(P<0.05)。叁组软骨IOD值均继续下降，其中B组软骨IOD值仍能保持在60以上，而其他两组则下降明显，叁组间差异比较有统计学意义(P<0.05)。结论在基础保存液中添加50uMol/L的ZVAD-fmk，能够有效提高体外液体保存的异体软骨组织活性以及软骨细胞存活率；在基础保存液中添加15mg/L的L-NAME，没有提高体外保存的异体软骨组织活性以及软骨细胞存活率。意义关节软骨全层缺损的修复方法与效果不佳一直是困扰临床运动医学医生与骨科医生的一大难题。虽然，国外临床上异体骨软新鲜骨移植治疗全层软骨损伤取得了肯定的效果，其优点为取材相对容易、无需二次手术等，但由于没有理想的体外液体保存软骨移植物的方法，影响了临床应用与推广。因此，延长同种异体软骨移植物的体外保存时间并保持其活性成为学者研究的焦点。本课题研究发现组织体外培养液中加入ZVAD-fmk具有保持软骨细胞成活率以及组织活性的作用，为下一步研究理想的组织培养保存液奠定了基础。(本文来源于《泰山医学院》期刊2013-03-01）
魏松红,张景远,李斐,王振[7]（2012）在《应用组织培养法筛选抗草甘膦水稻愈伤组织》一文中研究指出应用组织培养法,诱导并筛选抗性水稻愈伤组织。在0.001、0.01、0.1、0.5、1、5、10 g/L草甘膦处理的条件下确定水稻愈伤组织的存活率及鲜重的EC50分别为0.512、0.494 g/L,以此确定诱变筛选水稻愈伤组织的浓度。本研究采用梯度筛选法及诱变等度筛选2种方法进行筛选,梯度筛选法筛选出的抗性愈伤组织其存活率及鲜重的EC50为11.04、11.64 g/L,诱变等度筛选法筛选出的抗性愈伤组织其存活率及鲜重的EC50为10.25、11.81 g/L,2种抗性水平都有很大程度的提高。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2012年11期）
杨健,黄伟,宋国立,梁熙,陈浩[8]（2011）在《应力环境组织培养法保存的人骨软骨移植物中胶原和基质金属蛋白酶组织抑制剂3》一文中研究指出背景:应力可以对体内外软骨组织或软骨细胞产生多种影响。目的:观察应力环境对普通组织培养基体外保存的骨软骨移植物保存质量的影响。方法:将正常人的骨软骨移植物分成3组:对照组即新鲜移植物,普通组移植物采用普通组织培养法保存,应力组用摇床作为动态加载装置对普通组织培养法保存的骨软骨移植物进行持续周期性应力加载。结果与结论:储存移植物2周时,Western blot法和透射电镜观察显示,与静态环境下保存相比,动态加载环境使关节软骨细胞外基质中基质金属蛋白酶组织抑制剂3的表达明显提高(P<0.01),能更好地保护基质中胶原成分的超微结构。结果证实,应力环境有利于保存人同种异体移植物软骨细胞和胶原的超微结构,动态非接触加载可提供一种更好的库存人同种异体骨软骨移植物的方法。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2011年33期）
杨健[9]（2011）在《应力环境对组织培养法保存人骨软骨移植物的影响》一文中研究指出目的同种异体骨软骨移植是目前公认的治疗关节软骨缺损的方法。寻找长期有效的骨软骨移植物保存方法,对于建立骨软骨组织库,为临床修复软骨缺损提供组织来源具有重要意义。本研究推测应力环境对关节软骨的体外保存会产生积极影响。因此通过在传统组织培养法的基础上施加简单的应力环境,观察骨软骨移植物细胞功能和细胞外基质的超微结构的变化,以明确应力环境对组织培养法体外保存的骨软骨移植物的保存质量的影响,从而改进组织培养法保存软骨的效果。方法同种异体骨软骨移植取自6个20-40岁器官捐献者的正常股骨髁,随机分为3组分别为:1,对照组:即新鲜骨软骨标本不经过保存,取材24小时内即行检测;2,普通组织培养组(普通组):新鲜骨软骨标本放入含20%FBS的DMEM培养瓶中保存,培养瓶立置于37℃、5%CO2、饱和湿度下的孵箱中保存2周[1];3,应力加载组织培养组(应力组):新鲜骨软骨标本放入含20%FBS的DMEM培养瓶中保存,培养瓶立置于摇床上,并在37℃、5%CO2、饱和湿度下的孵箱中摇动保存2周。摇床作为动态加载装置对体外保存的骨软骨移植物施加持续周期性应力,以模拟体内关节软骨的应力环境。摇床频率设置为1Hz。采用western blotting对各组关节软骨中的肌动蛋白β-actin进行半定量分析,用透射电镜观察胶原的超微结构。结果与对照组相比,应力组和普通组储存后的软骨组织的β-actin的蛋白表达水平均下降(P<0.05,P<0.01);与静态环境下保存相比,应力加载组较高的保持了关节软骨细胞外基质中β-actin的蛋白表达水平,尤其在深层。(P<0.05,P<0.01)。电镜观察显示应力培养组胶原纤维网架结构完整性仍存在,但成束排列的纤维减少,密度有所降低,胶原纤维束出现散在溶解、破坏,胶原平均直径下降为74.6±25.6nm,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。但普通组胶原大量破坏,密度明显降低,多成单束排列,排列紊乱,直径明显减小,平均为:51.2±11.5nm。与对照组和应力组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论应力环境有利于保存人同种异体移植物软骨细胞功能和胶原的超微结构。因此,动态非接触加载可提供一种更好的库存人同种异体骨软骨移植物的方法,为关节软骨修复提供更好的组织来源。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2011-05-01）
[10]（2010）在《俄国用“组织培养”法育出更耐涝小麦》一文中研究指出当洪涝灾害发生后,在旱地生长的小麦植株如果长期被水浸泡就有可能因根部缺氧而死亡。为解决这一问题,俄罗斯研究人员通过诱导小麦的愈伤组织,培育出了耐涝能力更强的小麦品种。俄科学院植物生理学研究所的科研人员发布的公报显示,他们将取自某种小麦的一组细胞放入含生长素的培养液中,诱导其产生组织团块,这便是愈伤组织。将这种组织置于固态培养基中,可分化成新的小麦植株。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2010年10期）
组织培养法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的通过在体外组织培养液中保存不同体积大小的羊膝关节软骨一定时间后比较其软骨细胞存活率及生物力学性质差异,并且观察新型组织培养液TSMU-1液对软骨细胞存活率的影响,为进一步寻找最佳的骨软骨移植物保存方式及保存液提供有效的实验依据。材料与方法以羊膝关节软骨为实验材料,无菌条件下用ARTHREX骨软骨移植器械在羊膝关节股骨髁关节面内外侧负重区获取圆柱状骨软骨块100枚,包括软骨下骨全长约10mm,
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
组织培养法论文参考文献
[1].韩运宁,亓建洪.体外组织培养法保存关节软骨的研究进展[J].中国医药生物技术.2017
[2].李军,亓建洪,陈彬,魏振华,门猛.组织培养法中骨软骨移植物的体积大小对软骨细胞存活率及力学性质的影响[C].第十叁届亚洲运动医学大会论文汇编.2014
[3].李军.组织培养法保存软骨移植移植物体积对软骨细胞存活率及力学性质的影响[D].泰山医学院.2014
[4].陈琦,王晓丽.组织培养法保存新鲜天麻样品对天麻块茎总DNA提取效果的影响[J].现代中药研究与实践.2014
[5].刘北辰.用组织培养法种果树[N].中国质量报.2013
[6].刘召庆.ZVAD-fmk、L-NAME对体外组织培养法保存异体软骨组织活性的影响[D].泰山医学院.2013
[7].魏松红,张景远,李斐,王振.应用组织培养法筛选抗草甘膦水稻愈伤组织[J].江苏农业科学.2012
[8].杨健,黄伟,宋国立,梁熙,陈浩.应力环境组织培养法保存的人骨软骨移植物中胶原和基质金属蛋白酶组织抑制剂3[J].中国组织工程研究与临床康复.2011
[9].杨健.应力环境对组织培养法保存人骨软骨移植物的影响[D].重庆医科大学.2011
[10]..俄国用“组织培养”法育出更耐涝小麦[J].东北农业大学学报.2010
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