利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究

利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究

论文摘要

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞上表达重组猪干扰素L3(rPoIFN-L3)进行抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的研究。首先通过间接免疫荧光和Western-blot验证rPoIFN-L3表达,并用Protein A亲和层析柱进行蛋白纯化;采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测rPoIFN-L3的抗病毒活性,含rPoIFN-L3的细胞上清的抗病毒活性为1×103AU/mL,纯化的rPoIFN-L3抗病毒活性为5×105AU/mg。进一步对纯化的rPoIFN-L3蛋白在IPEC-J2细胞上进行抗PEDV活性探究,结果显示,rPoIFN-L3可呈剂量依赖性抑制PEDV复制,并且上调相关干扰素-刺激基因(ISGs)的表达。由此证明,本研究表达的rPoIFN-L3具有抗病毒活性,并可有效抑制PEDV在IPEC-J2上的复制,对预防和治疗PEDV感染有重要意义。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郭珊珊,陈伟业,薛美,尹灵丹,罗毅,冯力,刘平黄

关键词: 猪干扰素,杆状病毒表达系统,昆虫细胞,猪流行性腹泻病毒

来源: 中国兽医科学 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

基金: 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2017RAXYJ050)

分类号: S852.65

DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0156

页码: 1269-1276

总页数: 8

文件大小: 2240K

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