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鸡马立克病病毒康乐株meq基因的克隆与分析

2020-12-07阅读(228)

鸡马立克病病毒康乐株meq基因的克隆与分析

论文摘要

为了解甘肃省鸡群马立克病病毒(MDV)的分子流行病学特征及meq基因的遗传演化规律,以甘肃省康乐县某鸡场马立克病的自然发病鸡为研究对象,采集9只病鸡肝脏组织,提取肝细胞基因组DNA,进行meq基因的PCR扩增、克隆及测序,将所得序列用BioEdit软件与GenBank上登录的参考毒株进行比较分析。结果显示,MDV meq基因在进化上存在某种地理位置上的相关性,国内毒株成为一个分支,国外毒株成为另一个分支。本研究所获9株康乐株与国内近几年分离株GXY2、0095亲缘关系很近,与国内近几年分离株的核苷酸同源性在99.3%以上,且第319位核苷酸由T突变成C,第502位核苷酸由C突变成G,这两处突变是近几年国内分离的野毒株特有的。此外,9株康乐株均在550位核苷酸由C突变成T,其中4株在304、306位核苷酸由G突变为A和C,这些突变是否与毒株致肿瘤性和毒力有关,有待探究。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 样品来源
  •     1.1.2 载体和感受态细胞
  •     1.1.3 主要药品和试剂
  •     1.1.4 实验器材
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 肝脏组织中病毒DNA的提取
  •     1.2.2 引物的设计与合成
  •     1.2.3 MDV目的基因的扩增
  •     1.2.4 PCR 产物的回收与纯化
  •     1.2.5 目的基因的克隆（1）连接
  •     1.2.6 重组质粒菌液PCR鉴定
  •     1.2.7 重组质粒序列测定
  •     1.2.8 DNA序列的比较分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 9只MDV病鸡肝细胞基因组总DNA的提取
  •   2.2 meq基因的PCR扩增
  •   2.3 重组质粒pMDl8-T-meq的鉴定
  •   2.4 meq基因的序列测定与分析
  •     2.4.1 MDV康乐株meq基因的同源性分析
  •     2.4.2 MDV康乐株meq基因的变异性分析
  •     2.4.3 康乐株meq基因进化关系
  • 3 讨论与结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 东丽丽

    关键词: 马立克病病毒,基因,克隆,序列分析

    来源: 畜牧兽医杂志 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 甘肃省定西市临洮农业学校

    分类号: S852.65

    页码: 11-16

    总页数: 6

    文件大小: 1256K

    下载量: 63

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