药西瓜(Citrullus colocynthis)UDP-糖基转移酶基因表达分析

药西瓜(Citrullus colocynthis)UDP-糖基转移酶基因表达分析

论文摘要

以药西瓜为试材,采用连接转化、双酶切等方法,在前期克隆得到的2个药西瓜UDP-糖基转移酶基因UDP-E1、UDP-E2的基础上,将目的基因UDP-E1、UDP-E2与pET28a连接,构建重组质粒pET28a-UDP-E1和pET28a-UDP-E2,将重组质粒转化至E.coli BL21中,经过不同浓度的IPTG诱导,期望出现目的蛋白条带,且上清中的目的蛋白条带较沉淀与对照组明显。结果表明:成功构建原核表达重组质粒,IPTG浓度为1.0 mmol·L-1时,UDP-E1的融合蛋白分子量约为49 kDa,IPTG浓度为0.8 mmol·L-1时,UDP-E2的融合蛋白分子量约为32 kDa,目的蛋白在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 引物的设计与合成
  •     1.2.2 原核表达载体的构建
  •     1.2.3 重组蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 糖基转移酶特性及亲缘发育树构建
  •   2.2 原核表达载体的构建
  • 3 重组蛋白的诱导表达
  • 4 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨铭慧,陈蒙,刘海峰

    关键词: 药西瓜,糖基转移酶,原核表达

    来源: 北方园艺 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 农作物

    单位: 延边大学农学院

    基金: 国家自然科学基金资助项目(31511140284)

    分类号: S567

    页码: 135-140

    总页数: 6

    文件大小: 1600K

    下载量: 218

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