基于代谢工程与生物正交反应的病毒原位标记技术研究

基于代谢工程与生物正交反应的病毒原位标记技术研究

论文摘要

示踪病毒在细胞内的感染路径对探究病毒的感染机制具有重要意义,病毒标记是实现病毒示踪的关键。针对目前病毒标记方法中存在的不足,该文提出了一种基于代谢工程的病毒原位生物正交标记技术。脂质/氨基酸/单糖的叠氮衍生物经细胞代谢将叠氮基团修饰在病毒表面,被修饰病毒粒子识别结合宿主细胞后与携带二苯基环辛炔(DBCO)的荧光探针经生物正交反应连接从而实现病毒标记。结果显示,叠氮基团在囊膜病毒和非囊膜病毒表面都有很好的修饰效果,并且在原位生物正交中携带二苯基环辛炔基团的荧光探针可快速捕捉到叠氮修饰的病毒粒子实现病毒标记。该标记方法不仅操作简单,而且适用于囊膜病毒与非囊膜病毒的标记。

论文目录

  • 1引言
  • 2材料与方法
  •   2.1材料
  •   2.2实验方法
  •     2.2.1脂质叠氮衍生物AE-cho的制备
  •     2.2.2细胞培养
  •     2.2.3细胞毒性实验
  •     2.2.4叠氮在细胞内的代谢表征
  •     2.2.5叠氮修饰的病毒粒子的制备
  •     2.2.6叠氮修饰的病毒粒子的表征
  •     2.2.7原位生物正交标记叠氮修饰的病毒粒子
  • 3结果与分析
  •   3.1细胞毒性测试分析
  •   3.2叠氮衍生物在细胞内的代谢表征
  •   3.3叠氮基团修饰的病毒粒子的鉴定
  •   3.4 原位生物正交标记叠氮修饰的病毒粒子
  • 4讨论
  • 5结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王芳芳,潘宏,何华美,马轶凡,蔡林涛

    关键词: 原位生物正交,代谢工程,叠氮基团,囊膜病毒,非囊膜病毒

    来源: 集成技术 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 信息科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中国科学院深圳先进技术研究院,中国科学院大学

    基金: 国家自然科学青年基金项目(81601552),深圳市科技计划(自由探索)项目(JCYJ20170306160217433,JCYJ20170818163739458)

    分类号: Q939.4

    页码: 1-9

    总页数: 9

    文件大小: 1120K

    下载量: 170

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