导读:本文包含了植物单细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:慢性移植物抗宿主病,免疫图谱,发病机制,单细胞质谱流式技术
植物单细胞论文文献综述
高阳[1]（2019）在《基于单细胞质谱流式技术研究慢性移植物抗宿主病患者的免疫图谱》一文中研究指出研究背景:慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease,cGVHD)是引起异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)患者无复发死亡最常见并发症,可累及全身各个组织和器官,并且严重影响allo-HSCT长期存活患者的生存质量和重返社会的能力[1,33]。约30%-70%的allo-HSCT患者会发生cGVHD[2,15]。目前,由于cGVHD的免疫细胞和分子机制尚不明确,因此对cGVHD的有效预防与治疗进展缓慢。既往,对于参与cGVHD病理过程的免疫细胞的研究一般采用流式细胞技术。传统流式细胞仪,是基于荧光发射的检测系统,不同的荧光基团发射光谱存在重迭现象,因此,目前可同时检测的荧光信号标记一般少于15个,同时信号标记之间容易互相干扰,这在一定程度上影响了实验的准确性。目前新兴的质谱流式细胞技术(cytometry by time-of-flight,CyTOF)),以在细胞中含量极低的镧系金属代替传统的荧光蛋白来标记抗体,由于无需校正光谱的重迭干扰,可以同时检测单个细胞的最多100个标记,因此成为研究复杂免疫系统的有效手段。通过质谱流式细胞技术,我们能够从广度、深度研究参与cGVHD病理生理过程的免疫细胞亚群及其相应特征,为进一步揭示慢性移植物抗宿主病的发病机制提供新思路。目的:本研究为明确cGVHD患者的免疫细胞图谱,通过质谱流式技术深入分析免疫细胞亚群失衡在慢性移植物抗宿主病发生发展中的作用,从而进一步探索靶向特定免疫机制的慢性移植物抗宿主病治疗新策略。方法:(1)确定单细胞质谱流式细胞技术实验所需的42种免疫标记,初步构建上机方案,前期采集检测样本,单细胞质谱流式细胞仪进行分析,检测抗体质量,质检通过后正式构建慢性移植物抗宿主病CyTOF检测人体免疫试剂盒(包含42种CyTOF抗体,包括T细胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞、DC细胞、浆细胞和粒细胞、髓系细胞等细胞亚群标记);(2)接受allo-HSCT患者按照NIH诊断及分型标准分为无cGVHD患者组、中度cGVHD患者组、重度cGVHD患者组,同时按照病人cGVHD累及器官分为以皮肤cGVHD症状为主患者组和以肺部cGVHD症状为主患者组;(3)临床上收集异基因造血干细胞移植术后患者外周血标本31例,记录详细病程信息,同时收集健康捐献者外周血标本5例,所有参与研究者均需排除感染情况和自身免疫性疾病,空腹抽取静脉血10ml,EDTA抗凝,24小时内密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,每个待检测样本选取3×106个外周血单个核细胞染色质谱流式上机检测,剩余细胞-80摄氏度冰箱冷冻24小时后转入液氮中保存;(4)上机检测所得数据统计分析,进行后续实验。生物信息学方法:(1)原始数据预处理及质量控制:对数据进行标准化预处理,并去除批次等噪音影响,得到单个、活的、免疫细胞的有效数据进行下一步分析;(2)聚类分析:选择上机方案中指定的信号标记,采用xshift聚类算法进行分析;当单个文件细胞数量过大时,对数据采用随机降采样的方法以减少细胞数并同时不加入人为操作偏差。通过高性能的聚类算法获得对样本的免疫细胞亚群的分类(cluster);(3)聚类结果统计学分析及可视化展示:采用基于t分布随机领域嵌入(t-distributed stochastic neighbor embedding,t-SNE)的降维可视化方法对所获得的聚类结果进行可视化,并获得可视化随机网络嵌入(visual stochastic network embedding,viSNE)、热图(heatmap)等可视化展示;同时,对各样本中每个亚群的百分比(Frequency)进行差异性分析,根据病人临床信息,对样本进行分组,采用双边t检验的方法确认不同组别之差异性表达的特征免疫亚群。结果:(1)自2017年11月-2018年12月共收集31例异基因造血干细胞移植后患者外周血样,其中12例患者未发生cGVHD,7例患者发生中度cGVHD,12例患者发生重度cGVHD。在19例发生中度-重度cGVHD患者中,10例患者以皮肤cGVHD症状为主要临床表现,6例患者主要表现为肺部cGVHD症状,3例患者同时出现皮肤与肺部cGVHD症状;(2)通过质谱流式检测各分组患者外周血单个核细胞的细胞亚群组成和免疫表型,我们发现,中-重度cGVHD患者组与无cGVHD患者组相比,具有不同的细胞亚群分布图谱;(3)以肺部症状为主cGVHD患者组与无cGVHD患者组相比,具有不同的细胞亚群分布图谱;(4)以皮肤症状为主cGVHD患者组与无cGVHD患者组相比,具有不同的细胞亚群分布图谱;(5)中度cGVHD患者的外周血中骨髓来源抑制细胞的比例高于无cGVHD患者组,重度cGVHD患者的外周血中单核吞噬细胞的比例高于无cGVHD患者组;(6)以肺部症状为主cGVHD患者的外周血中两群特异的T细胞亚群(C5,C21)的比例高于无cGVHD患者组和以皮肤症状为主cGVHD患者组;(7)小鼠异基因骨髓移植模型构建后流式细胞术检测移植嵌合度,得到H2-Kb阳性细胞所占百分比超过90%,检测结果为完全嵌合,小鼠异基因骨髓移植模型建立成功;(8)小鼠cGVHD模型流式检测发现cGVHD严重程度与外周血CD11b+髓系细胞群的比例成正相关关系。结论:(1)骨髓来源抑制细胞与单核吞噬细胞可能与cGVHD的病理机制有关;(2)两群T细胞亚群可能参与肺部cGVHD的病理过程;(3)小鼠cGVHD模型证实CD11b+髓系细胞群可能与cGVHD的病理机制有关。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-05-15）
牛艳丽,柏胜龙,王麒云,刘凌云[2]（2017）在《单细胞组学技术及其在植物保卫细胞研究中的应用》一文中研究指出单细胞组学技术在动物研究中已经得到广泛应用,但在植物学领域尤其是保卫细胞研究中还处于起步阶段。由保卫细胞构成的气孔承担着植物生命过程中水分散发及气体交换大门的作用。将单细胞组学技术应用到保卫细胞功能解析中将有助于了解保卫细胞参与的基本生理过程。该文综述了植物单细胞组学技术的发展、保卫细胞研究现状及单细胞组学技术在植物保卫细胞研究中的初步应用,为借助该技术解决植物生物学中保卫细胞发育、代谢及对环境胁迫响应等基本问题提供研究思路和方法。(本文来源于《植物学报》期刊2017年06期）
何宇清,孙蒙祥[3]（2016）在《单细胞技术进展及其在植物研究中的应用》一文中研究指出多细胞生物体的生存依赖于不同类型细胞特异性的功能分工,不同类型的细胞尽管基因组相同,但有其独特的发育过程和应对环境变化的能力。生物学的一大挑战就是揭示基因如何在正确的位置、正确的时间表达到正确的水平,最近出现了很多通过细胞类型特异性方法研究单细胞组学的工具,这些新技术使我们能通过空前分辨率,理解多细胞生物体内不同类型的单个细胞基因表达特点及其适应环境变化的机制。单细胞样品的获取一直是单细胞研究的一大技术瓶颈,因此本文将以如何获得起始材料为重点,探讨单细胞研究的样品标记、单细胞分离及获取、组学数据分析和结果验证等技术方法及其在植物研究中的应用。(本文来源于《植物科学学报》期刊2016年03期）
刘俊桃,刘艳玲,程治,陈时靖,黄卫华[4]（2015）在《超微电极实时监测植物细胞壁参与调控的单细胞活性氧爆发（英文）》一文中研究指出植物细胞活性氧爆发在植物的抗病以及信号转导中起着非常重要的作用,植物内活性氧产生及代谢受到复杂而精确的机制调控,从而维持正常的活性氧水平以发挥其生理功能.然而,在单细胞水平开展活性氧爆发实时监测及其调控机制研究一直受到很大的挑战.本文以碳纤维微盘电极(CFMDE)为基底电极,利用Nafion的模板效应,采用电化学沉积法制得纳米铂颗粒修饰电极(NPt/Nafion/CFMDE);同时采用基于聚二甲基硅氧烷(PDMS)的软光刻技术,制备了一种高效固定植物悬浮细胞的琼脂糖阵列微孔芯片.使用NPt/Nafion/CFMDE实时监测了单个拟南芥原生质体活性氧爆发,并证明电化学监测活性氧的主要成分为过氧化氢.在此基础上,采用浅层培养法培养原生质体再生植物细胞壁.电化学监测结果表明,与单个原生质体相比,植物细胞在受到刺激时释放的过氧化氢量显着降低;然而当采用过氧化物酶抑制剂抑制植物细胞壁上过氧化物酶活性后,植物细胞释放过氧化氢量显着回升.研究结果表明,细胞壁在活性氧爆发过程具有很好的调控功能,可望促进植物细胞活性氧爆发及其调控机制的研究.(本文来源于《电化学》期刊2015年01期）
朱晓翠,徐安沁,苏昕,赵美萍[5]（2014）在《微流控阵列芯片上植物单细胞内3′核酸外切酶的荧光成像检测》一文中研究指出制备了高活性的拟南芥原生质体。通过在微流控芯片上设计适合原生质体尺寸的微孔阵列和微通道流路,实现了拟南芥原生质体的在线纯化和单细胞阵列捕获,其捕获效率达到40%。利用电穿孔技术将能特异性检测3′核酸外切酶的核酸探针导入原生质体,实现了单个原生质体内3′核酸外切酶的成像。该研究为开展单细胞内多种核酸酶的高通量原位检测,以及相关调控过程的研究提供了重要的方法学手段。(本文来源于《分析科学学报》期刊2014年05期）
储昭庆[6]（2013）在《抗逆植物多重抗逆基因资源的单细胞筛选》一文中研究指出农业工作者和育种家们都知道,多种非生物胁迫的同时出现对植物来说是最致命的。有效应对的方法是找出调控逆境组合反应的基因的上游调控因子。目前国内外通过基因芯片以及蛋白芯片从转录组和蛋白组方面得到海量的抗逆基因,包括各种蛋白激酶和转录因子。如何结合这些数据进一步从功能上快速的筛选控制逆境组合的基因将具有非常重要的意义。单细胞模式生物酵母的抗逆性研究近年来主要集中于基因组水平上对各种逆境条件下的表达谱分析,从而归结出逆境组合反应的核心基因群,进而分离出调控对不同逆境组合反应的基因的上游调控因子。本研究利用酵母中的蛋白激酶和转录因子的突变体中对各种逆境组合敏感的突变体来建立异源功能互补筛选平台,筛选植物中控制逆境组合的新基因,该平台将在其他非模式植物的抗逆基因的筛选中发挥重要作用。(本文来源于《生态文明建设中的植物学：现在与未来——中国植物学会第十五届会员代表大会暨八十周年学术年会论文集——第3分会场：植物分子生物学与基因组学》期刊2013-10-13）
张玲瑞,邢达[7]（2009）在《热激诱导植物细胞死亡早期器官行为特征单细胞在位成像》一文中研究指出以BCECF-AM(2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester)为荧光探针标记植物液泡,以GFP(Green fluorescence protein)为报告分子借助转基因技术活体标记植物线粒体,在激光共聚焦扫描显微镜下,单细胞水平上观测了热激诱导细胞死亡早期线粒体和液泡的行为特征变化。结果表明:40℃高温处理线粒体GFP标记的原生质体10 min,随后放在室温下30 min,观察到线粒体发生明显的形态改变——正常状态下长的丝状线粒体或圆的球状线粒体,各自的纵切面明显变大,并且出现多个线粒体聚集成团的现象。如果热激后放在室温下2 h,原来充斥着整个胞内空间的完整的、大的中央液泡就会破裂,这种破裂程度在6 h时达到一半。用二乙酸萤光素(fluorescein diacetate,FDA)检查细胞活力表明,热激导致细胞活力发生退行性下降:尽管前3 h细胞活力没有发生改变,但是从4 h开始细胞活力开始下降,8 h细胞活力下降到对照水平的50%,到了第20 h,细胞几乎全部死亡。总结可知,在热激诱导细胞死亡早期,线粒体首先发生形态改变,随后植物专一性器官液泡也发生破裂。本文的研究结果首次揭示了液泡在非生物胁迫诱导的植物细胞死亡过程中可能扮演着重要的角色;激光共聚焦扫描显微镜技术可以在细胞死亡早期活体、清晰地进行亚细胞行为特征成像。(本文来源于《中国遗传学会第十届全国激光生物学学术会议论文摘要集》期刊2009-04-01）
梁美娟,李萍,林嘉茵[8]（2009）在《水生植物生产单细胞蛋白饲料的可行性分析》一文中研究指出在河涌污染治理过程中会产生大量的水生植物,通过微生物培养将这些水生植物转化为富含单细胞蛋白(菌体蛋白)的动物饲料,就能变废为宝,在消除环境污染的同时提高资源的利用效率。有机废弃物生产单细胞蛋白技术受原料、菌种和生产工艺等叁方面因素的影响。在综述该技术研究和应用成果的基础上,从叁个方面分析了水生植物生产单细胞蛋白饲料的可行性。(本文来源于《广州化工》期刊2009年01期）
王超[9]（2007）在《毛细管电泳技术在二陈汤指纹图谱研究和植物细胞单细胞分析中的应用》一文中研究指出目的:研究毛细管电泳技术在中医药现代化研究中的应用,论文分为两部分研究内容:1.研究毛细管电泳技术在中药指纹图谱研究的应用,建立二陈汤毛细管电泳指纹图谱分析方法。2.研究毛细管电泳单细胞分析技术和激光诱导荧光检测技术在植物细胞单细胞分析中的应用,实现单个小麦胚性细胞内氨基酸的分析。方法:1.利用毛细管电泳技术对《局方》二陈汤的水煎液进行分析。分离缓冲液:选用35mmol/L硼砂(加乙腈浓度至10%)为运行缓冲液(pH 9.0)。用二极管阵列检测器对谱图在190nm～300nm进行全扫描得叁维光谱图,确定最佳检测波长为200nm。换用紫外检测器对二陈汤供试品进行检测,CE条件为:分析运行电压:25kV,极性从正极到负极;毛细管卡盒温度:25oC;压力进样:0.5psi×5s。2.运用毛细管电泳激光诱导荧光检测技术对单个小麦胚性细胞的氨基酸进行检测。利用电穿孔技术将荧光素FITC引入到活的原生质中进行细胞内的衍生。在细胞内的衍生反应完成后,进行CE-LIF检测。分离缓冲液:25×10-2 mol/L硼砂/1.25×10-2 mol/L NaOH-1.20×10-4 mol/L精胺(pH 9.45)。CE条件为:分析运行电压:25kV,极性从正极到负极:毛细管卡盒温度:25oC。结果:1.确定了二陈汤水煎液电泳分析的最佳缓冲液和最佳电泳条件,初步建立了二陈汤的指纹图谱,在一个电泳条件下实现了全方中20多个峰的分离,方法上也具有较好的重现性和稳定性。2.采用电穿孔方法将衍生试剂强制导入小麦细胞中,使氨基酸的衍生反应在细胞内进行,这能够有效得减小细胞内样品的稀释。结合LIF检测的高灵敏度实现了植物细胞内组分的分析。单个小麦胚性细胞中10种氨基酸得到了较为理想的分离。结论:毛细管电泳法具有分离模式多、分离效率高、速度快、使用范围广、所需样品量和试剂量少、可直接分析水溶液等特点,在中药指纹图谱分析和植物细胞单细胞分析中显示了其优越性。可以预见,毛细管电泳技术在中医药现代化研究中将有非常广阔的前景。(本文来源于《山东中医药大学》期刊2007-04-20）
高永毅,焦群英,唐果,王荣[10]（2005）在《植物单细胞内压的一种计算方法》一文中研究指出根据多面体植物单细胞的结构特点,以二维问题为研究对象,建立了便于组装成宏观植物模型和多细胞模型的多面体植物单细胞力学模型。在该模型的基础上,推出了用细胞周长以及用细胞模型节点坐标和位移表示的细胞内压改变量的计算公式。提出了一种便于理论分析和数值计算的多面体植物单细胞内压计算方法。从而,为细胞层次分析植物组织和植物细胞的力学行为提供了一种细胞内压的计算方法。(本文来源于《农业工程学报》期刊2005年07期）
植物单细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
单细胞组学技术在动物研究中已经得到广泛应用,但在植物学领域尤其是保卫细胞研究中还处于起步阶段。由保卫细胞构成的气孔承担着植物生命过程中水分散发及气体交换大门的作用。将单细胞组学技术应用到保卫细胞功能解析中将有助于了解保卫细胞参与的基本生理过程。该文综述了植物单细胞组学技术的发展、保卫细胞研究现状及单细胞组学技术在植物保卫细胞研究中的初步应用,为借助该技术解决植物生物学中保卫细胞发育、代谢及对环境胁迫响应等基本问题提供研究思路和方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
植物单细胞论文参考文献
[1].高阳.基于单细胞质谱流式技术研究慢性移植物抗宿主病患者的免疫图谱[D].南方医科大学.2019
[2].牛艳丽,柏胜龙,王麒云,刘凌云.单细胞组学技术及其在植物保卫细胞研究中的应用[J].植物学报.2017
[3].何宇清,孙蒙祥.单细胞技术进展及其在植物研究中的应用[J].植物科学学报.2016
[4].刘俊桃,刘艳玲,程治,陈时靖,黄卫华.超微电极实时监测植物细胞壁参与调控的单细胞活性氧爆发（英文）[J].电化学.2015
[5].朱晓翠,徐安沁,苏昕,赵美萍.微流控阵列芯片上植物单细胞内3′核酸外切酶的荧光成像检测[J].分析科学学报.2014
[6].储昭庆.抗逆植物多重抗逆基因资源的单细胞筛选[C].生态文明建设中的植物学：现在与未来——中国植物学会第十五届会员代表大会暨八十周年学术年会论文集——第3分会场：植物分子生物学与基因组学.2013
[7].张玲瑞,邢达.热激诱导植物细胞死亡早期器官行为特征单细胞在位成像[C].中国遗传学会第十届全国激光生物学学术会议论文摘要集.2009
[8].梁美娟,李萍,林嘉茵.水生植物生产单细胞蛋白饲料的可行性分析[J].广州化工.2009
[9].王超.毛细管电泳技术在二陈汤指纹图谱研究和植物细胞单细胞分析中的应用[D].山东中医药大学.2007
[10].高永毅,焦群英,唐果,王荣.植物单细胞内压的一种计算方法[J].农业工程学报.2005