快速扩增末端论文_李玉华,邓培渊,赵奇,雷志华

导读:本文包含了快速扩增末端论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:快速,糖苷酶,扇贝,基因,人参,皂苷,薯蓣。

快速扩增末端论文文献综述

李玉华,邓培渊,赵奇,雷志华[1](2015)在《cDNA末端快速扩增法克隆高山离子芥原叶绿酸酯氧化还原酶基因及其表达特异性分析》一文中研究指出用cDNA末端快速扩增技术从高山离子芥中克隆得到完整的原叶绿酸酯氧化还原酶(POR,EC:1.3.1.33)基因,命名为CbPORB,DNAMAN软件分析CbPORB和其他几种植物的POR基因,有很高的同源性,将其cDNA序列提交到NCBI数据库(序列接受号为FJ390503)。CbPORB基因全长1444bp,包含1个1209bp的开放阅读框(ORF),编码402个氨基酸的蛋白CbPORB(序列号为ACJ12925)。NCBI数据库在线软件计算高山离子芥CbPORB蛋白的等电点为9.43,推测其相对分子量为43.37kD。组织特异性表达分析显示:CbPORB在叶、茎中表达,根中不表达,具有器官特异性;干旱胁迫处理抑制CbPORB的转录水平;而表油菜素内酯(24-epibrassinolide;EBR)处理提高了CbPORB的转录水平。(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2015年03期)

刘凤栾,郗琳,阿不都热扎克·依沙克,陈晓丽,马男[2](2012)在《利用蔷薇科植物基因5'UTR快速扩增狗蔷薇RcPIN1和RcPLT的5'末端》一文中研究指出狗蔷薇不定根可被噻苯隆(TDZ)高效诱导形成类原球茎,深入探讨其诱导阶段的分子生物学机制,有利于指导切花月季建立类似高效再生和遗传转化体系。快速、准确克隆和筛选狗蔷薇类原球茎发生的关键基因是进行分子生物学水平研究的一个重要前提。利用苹果(Malus×domestica)、桃(Prunus persica)和草莓(Fragaria vesca)高同源性基因5'UTR(非翻译区)的相对保守性,在其内保守区域设计上游简并引物,以M-MLV逆转录酶反转录合成cDNA为模板,直接扩增蔷薇科植物狗蔷薇(Rosa canina)RcPIN1(pin-formed)和RcPLT(plethora)基因5'末端,大大减少了获取众多目的基因全长的时间及成本。结果显示,在狗蔷薇RcPIN1和RcPLT基因与其对应苹果、桃和草莓高同源性基因的5'UTR内,很多区域表现出较高保守性,表明在5'UTR相对保守区域设计上游简并引物扩增目的基因5'末端的合理性。与常规5'CDNA末端快速扩增技术(5'RACE)相比,本方法无需对cDNA模板5'末端加尾同聚物和引入锚定引物,即不必使用昂贵的5'RACE试剂盒,具有快捷、节约等优点,是一种获取蔷薇科植物基因5'末端的可行途径。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2012年10期)

贺斌,黄兴奇,余腾琼,钟巧芳,王玲仙[3](2012)在《cDNA末端快速扩增技术及其方法的改进》一文中研究指出cDNA末端快速扩增(RACE)技术可以快速扩增mRNA3'和5'末端,从而获得全长的cDNA序列,为分离和研究新的基因提供了一个快速简便的方法。从RACE的原理出发,综述RACE技术的优缺点,阐述RACE技术的改良,并对其应用现状和发展前景进行了分析。(本文来源于《浙江农业科学》期刊2012年09期)

梁爱玲,刘勇军,侯敢,黄迪南[4](2012)在《扇贝防御素基因改良5′cDNA末端快速扩增聚合酶链反应筛选方法的研究》一文中研究指出目的应用改良5′cDNA末端快速扩增聚合酶链反应(RACE)筛选扇贝抗菌肽基因,寻找基于基因序列同源性的双壳类抗菌肽(AMP)的筛选方法。方法 TRIzol法提取扇贝血淋巴中总RNA。根据贻贝抗菌肽的保守序列设计基因特异性简并引物,进行改良5′RACE钓取可能防御素基因cDNA的5′端序列、AT克隆、DNA测序和同源性分析。结果采用改良5′RACE从扇贝血淋巴RNA中得到多个未知基因的cDNA 5′端序列,挑选600bp以下的基因片段进行AT克隆和DNA测序后得到3个插入片段序列,其长度分别为257、275和511bp。通过BLAST程序搜索GenBank核酸数据库,未发现与之高度同源的基因。结论从扇贝血淋巴中获得的3个5′端cDNA序列可能属于新的基因。应用改良5′RACE能钓取含防御素保守序列的新基因片段,由此表明此方案具有可行性。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2012年10期)

梁爱玲,刘勇军,侯敢,黄迪南[5](2011)在《改良3' cDNA末端快速扩增PCR法筛选扇贝抗菌肽基因》一文中研究指出目的应用改良3′ cDNA末端快速扩增PCR法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)筛选扇贝抗菌肽基因。方法设计M13和T7启动子分别修饰的基因特异性引物(gene special primer,GSP)、锚定引物,提取扇贝血淋巴总RNA进行改良3′ RACE和5′ RACE,获得cDNA准全长序列并在GenBank中进行同源性比较。结果从扇贝血淋巴中获得3个cDNA的3′端序列基因和1个准全长cDNA(544bp),在GenBank中未发现与之高度同源的基因。结论从扇贝血淋巴中获得的1个准全长cDNA、3个cDNA的3′端序列可能属于新基因。应用改良3′ RACE能钓取含抗菌肽保守序列的新基因片段,该方法可行。(本文来源于《现代药物与临床》期刊2011年05期)

骆宁,金凤燮,鱼红闪[6](2010)在《RACE技术对薯蓣皂苷糖苷酶基因cDNA3′末端的快速扩增》一文中研究指出对微生物Absidia sp.G3d产薯蓣皂苷糖苷酶基因cDNA3′末端的序列进行了调取。根据薯蓣皂苷糖苷酶基因的CDS区已知序列设计特异性引物,应用3′RACE(Rapid-Amplification of cDNA 3′Ends)技术,快速扩增得到cDNA 3′端未知序列片段,将PCR产物切胶回收,直接测序得到长度为258 bp的产物序列,经比对其中编码区长度为122 bp,非编码区长度为136 bp,Poly A部分长度为28 bp。这对其他类中草药高活性皂苷糖基水解酶基因cDNA3′末端的序列的调取提供了参考。(本文来源于《大连工业大学学报》期刊2010年03期)

仇旭升,孙庆,王伟伟,董丽,吴双[7](2009)在《简化cDNA末端快速扩增技术测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒基因组末端序列及分析》一文中研究指出【目的】简化cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNAends,RACE)流程,测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基因组两侧末端序列,并对NDV的leader和trailer进行分析。【方法】利用T4 RNA连接酶将特定寡聚核苷酸片段的连接于病毒基因组RNA和cDNA,再利用RT-PCR或PCR方法对病毒基因组的末端进行快速的扩增。【结果】建立一套操作简单、低成本、可重复性高的RACE方法,测定了叁种基因型5株NDV3’末端leader和5’末端trailer序列比对分析。【结论】本实验测定的鹅源VII型毒株JS/7/05/Ch基因组的15,184 nt由一个T变为了C,5’端trailer与3’端leader的连续互补序列由8 nt变为12 nt,而其它4株基因Ⅲ型和VI型NDV均未发现该突变。通过RNA的二级结构分析,NDV基因组和反向基因组RNA的3’末端形成一个发卡结构。JS/7/05/Ch等3株NDV U→C(T→C)的突变位于发卡环上,不影响二级结构的形成,发卡环的RNA序列突变为3’-UCUC-5’,与基因组3’端发卡环的3’-UCUUA-5’相似,推测可能影响了基因组RNA的复制速度。(本文来源于《微生物学报》期刊2009年07期)

段静波,白方文,白林含[8](2008)在《cDNA末端快速扩增试剂盒研发进展》一文中研究指出DNA扩增的方法有许多种,其中cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)因其操作简单、成功率相对较高、重复性好,被广泛应用于真核生物基因全长的克隆与分析。本文比较了市售的RACE试剂盒所采用的模板制备策略及改进的扩增方法。(本文来源于《生命的化学》期刊2008年05期)

杨菲,汤敏谦,袁晓东,金凤燮,鱼红闪[9](2007)在《人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因的cDNA 5′末端的快速扩增》一文中研究指出根据人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因的CDS区已知序列设计引物,应用"去帽法"原理快速扩增出了人参皂苷-α-鼠李糖苷酶cDNA 5′端未知序列.测序结果表明,扩增出的5′端未知序列长度为421 bp.通过与已知的CDS区序列比对,确定扩增出的5′端未知序列就是目的序列,其5′端非编码区长度为61 bp.(本文来源于《大连轻工业学院学报》期刊2007年04期)

王程毅,王少元[10](2007)在《cDNA末端快速扩增技术及其在血液疾病上的应用》一文中研究指出克隆新基因及获得其cDNA全长是现代生命科学中研究基因功能的重要前提。以PCR为基础的cDNA末端快速扩增(RACE)技术是一种简单、敏感且有效扩增cDNA全长的方法。该文主要概述RACE技术的原理、进展及其在血液疾病基因克隆方面的应用。(本文来源于《医学综述》期刊2007年01期)

快速扩增末端论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

狗蔷薇不定根可被噻苯隆(TDZ)高效诱导形成类原球茎,深入探讨其诱导阶段的分子生物学机制,有利于指导切花月季建立类似高效再生和遗传转化体系。快速、准确克隆和筛选狗蔷薇类原球茎发生的关键基因是进行分子生物学水平研究的一个重要前提。利用苹果(Malus×domestica)、桃(Prunus persica)和草莓(Fragaria vesca)高同源性基因5'UTR(非翻译区)的相对保守性,在其内保守区域设计上游简并引物,以M-MLV逆转录酶反转录合成cDNA为模板,直接扩增蔷薇科植物狗蔷薇(Rosa canina)RcPIN1(pin-formed)和RcPLT(plethora)基因5'末端,大大减少了获取众多目的基因全长的时间及成本。结果显示,在狗蔷薇RcPIN1和RcPLT基因与其对应苹果、桃和草莓高同源性基因的5'UTR内,很多区域表现出较高保守性,表明在5'UTR相对保守区域设计上游简并引物扩增目的基因5'末端的合理性。与常规5'CDNA末端快速扩增技术(5'RACE)相比,本方法无需对cDNA模板5'末端加尾同聚物和引入锚定引物,即不必使用昂贵的5'RACE试剂盒,具有快捷、节约等优点,是一种获取蔷薇科植物基因5'末端的可行途径。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

快速扩增末端论文参考文献

[1].李玉华,邓培渊,赵奇,雷志华.cDNA末端快速扩增法克隆高山离子芥原叶绿酸酯氧化还原酶基因及其表达特异性分析[J].河南农业大学学报.2015

[2].刘凤栾,郗琳,阿不都热扎克·依沙克,陈晓丽,马男.利用蔷薇科植物基因5'UTR快速扩增狗蔷薇RcPIN1和RcPLT的5'末端[J].农业生物技术学报.2012

[3].贺斌,黄兴奇,余腾琼,钟巧芳,王玲仙.cDNA末端快速扩增技术及其方法的改进[J].浙江农业科学.2012

[4].梁爱玲,刘勇军,侯敢,黄迪南.扇贝防御素基因改良5′cDNA末端快速扩增聚合酶链反应筛选方法的研究[J].检验医学与临床.2012

[5].梁爱玲,刘勇军,侯敢,黄迪南.改良3'cDNA末端快速扩增PCR法筛选扇贝抗菌肽基因[J].现代药物与临床.2011

[6].骆宁,金凤燮,鱼红闪.RACE技术对薯蓣皂苷糖苷酶基因cDNA3′末端的快速扩增[J].大连工业大学学报.2010

[7].仇旭升,孙庆,王伟伟,董丽,吴双.简化cDNA末端快速扩增技术测定基因Ⅲ、Ⅵb和Ⅶd型新城疫病毒基因组末端序列及分析[J].微生物学报.2009

[8].段静波,白方文,白林含.cDNA末端快速扩增试剂盒研发进展[J].生命的化学.2008

[9].杨菲,汤敏谦,袁晓东,金凤燮,鱼红闪.人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因的cDNA5′末端的快速扩增[J].大连轻工业学院学报.2007

[10].王程毅,王少元.cDNA末端快速扩增技术及其在血液疾病上的应用[J].医学综述.2007

论文知识图

′RACEPCR产物电泳表明该cDNA序列由5′...一9快速末端扩增法的实验原理,虚线上方...PR12Southen杂交结果一10快速末端扩增法的PCR反应条件一3’AR注的原理(引自秦峥松,2田3)原理示意图

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