导读:本文包含了引物二聚体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:PCR,特异性引物,引物二聚体,回收再利用
引物二聚体论文文献综述
陈琪,刘晓峰[1]（2018）在《PCR过程中生成引物二聚体回收再利用的研究》一文中研究指出目的聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)过程中生成的引物二聚体(Primer Dimer,PD)回收再利用。方法重组质粒pET28a(+)-ProDer f 1转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,以ProDer f 1基因特异性引物PCR验证阳性菌落,PCR产物行1%琼脂糖凝胶电泳,切胶回收菌落PCR过程中生成的引物二聚体,分光光度计260nm检测回收产物浓度;以重组质粒pET28a(+)-ProDer f 1为模版,不同浓度的回收产物为引物进行PCR扩增,产物行1%琼脂糖凝胶电泳,目的条带切胶回收并测序。结果回收产物为引物的PCR产物,在1000bp处出现特意条带,其核苷酸序列与ProDer f 1基因特异性引物PCR产物序列一致。结论 PCR过程中生成的引物二聚体可以作为特异性引物回收再利用。(本文来源于《江西医药》期刊2018年08期）
林艳,李照熙,董卫华,王天云[2]（2012）在《一种去除聚合酶链式反应引物二聚体的简便方法》一文中研究指出目的提供一种去除聚合酶链式反应(PCR)引物二聚体的简便方法。方法根据聚乙二醇(PEG)能够选择性沉淀DNA片段的原理,确定分别去除100 bp、100～200 bp、100～300 bp条带的PEG 6000最终质量分数,因引物二聚体大小一般为200 bp,最终运用到去除含有引物二聚体的PCR产物中。结果最终质量分数为10.67%、9.00%、8.00%的PEG能分别除去100 bp、100～200 bp、100～300 bp条带。最终质量分数为24.00%的PEG能有效去除PCR引物二聚体并纯化PCR产物。结论 PEG 6000能有效去除PCR扩增产物的引物二聚体,达到纯化PCR产物的效果。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2012年06期）
夏乾峰,覃西,钱士匀,涂植光[3]（2011）在《新型二聚体突变荧光引物定量检测沙眼衣原体》一文中研究指出目的以二聚体突变荧光引物技术为基础建立对沙眼衣原体进行定量检测的新方法。方法以沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因构建重组质粒作为DNA标准品,设计二聚体突变荧光引物,优化定量PCR体系并进行性能评价;同时对148例临床生殖道标本进行检测。结果建立的二聚体突变荧光引物的定量PCR方法,其线性范围为101～109 copies/μL,灵敏度为10 copies/μL;低浓度样品的批内变异系数(CV)为4.71%,批间CV为5.57%;高浓度样品的批内CV为3.20%,批间CV为3.66%;常见生殖道病原菌检测结果均为阴性;对确诊的148例患者标本检测准确率为99.32%。结论建立的沙眼衣原体定量PCR检测方法具有快速、准确、结果可靠等特点,可为沙眼衣原体感染的诊断、治疗监测和流行病学调查提供较好的技术支持。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2011年04期）
夏乾峰[4]（2011）在《二聚体突变引物定量PCR技术的研发及其临床应用》一文中研究指出实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)技术分为内掺式染料技术和探针技术两类。内掺式染料技术方法简单,成本较低,但特异性差,故不适于临床检测。探针技术采用了基于荧光淬灭原理或荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)的探针,包括TaqMan探针、Amplifluor探针、分子信标、蝎型探针等。这些探针均是在与模板互补的同一寡核苷酸链上,分别标记荧光基团和淬灭基团,特异性高,定量准确,因而被广泛应用于临床诊断中。但这些探针均属于多标记探针,其合成难度和成本较高,制约了其推广应用。不少研究人员试图采用单标记探针来降低合成难度和成本,如杂交探针(hybridization probes)和荧光置换探针(displacing probes),取得了较好效果。但为防止探针与靶序列杂交引起自身延伸而被破坏,仍然需要在探针末端磷酸化来阻断其延伸,因此,并非真正意义的单标记探针技术。基于上述分析,本课题设计了一种全新的二聚体突变引物,其具有独特的结构,为真正意义的单标记探针。与其它多标记荧光探针相比,二聚体突变引物有以下优点:1.结构上具有天然的“热启动”功能,增加了方法的特异性;2.荧光报告基团和淬灭基团空间距离近,报告基团可被有效抑制,降低了方法的本底,一旦扩增开始两者便彻底分离,产生的荧光信号强,增加了方法的灵敏度;3.真正实现荧光探针的单标记,降低了合成、纯化难度,因此降低了成本。这种新型定量检测系统既具有染料法对新生双链DNA均能示踪、成本低的特点,又具有探针法高特异性,是一种高通用性、高特异性和灵敏性、操作简单、价廉的新型real-time PCR技术。我们选取乙型肝炎病毒和沙眼衣原体为具体研究对象,系统地对二聚体突变引物技术进行方法学和临床应用价值评价。证实二聚体突变引物技术具有高灵敏度、宽线性范围、重复性好、检测成本低等优点,可用于临床病原体检测或流行病学调查研究。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2011-04-01）
闻新棉,陈英剑,胡成进,李云龙,刘泽军[5]（2005）在《实时荧光定量检测中引物二聚体的优化》一文中研究指出实时定量检测中引物二聚体的存在会严重影响检测结果的准确性,本文提出多方面的优化策略,以减少或消除实时定量检测中引物二聚体的集聚。(本文来源于《国外医学.临床生物化学与检验学分册》期刊2005年07期）
张驰宇,张高红,杨敏,贲昆龙[6]（2004）在《四步法消除SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR中引物二聚体的影响》一文中研究指出为建立一种新的SYBRgreenⅠ实时定量RT PCR方法 ,使之能够有效消除引物二聚体 (PDs)对实时定量结果的影响 .对RT PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析 .依据PDs和扩增产物的熔解温度 (Tm)特点 ,在通用的叁步法的延伸步骤之后 ,增加一个短暂的 (5s)恒温和荧光检测步骤 ,使这个步骤的温度高于PDs的Tm,但低于扩增产物的Tm,简称该法为四步法 .PDs的Tm 通常高于 72℃ ,但低于扩增产物的Tm .将四步法第四步的温度设置在高于PDs的Tm ,但低于扩增产物的Tm 时 ,四步法能够有效地消除PDs的影响 .对叁步法和四步法SYBRgreenⅠ实时定量RT PCR进行了比较 ,发现叁步法根本不能用于RNA的实时定量 ,而四步法能够实现包括低丰度RNA在内的RNA的定量 .选择Tm 值尽可能小的引物 ,使PDs与扩增产物Tm 值之间有足够的差距 ,将更有利于四步法的应用 ,并可成功地用于低丰度RNA的准确定量(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2004年03期）
徐祥,刘昕,梁华平,代佳平,毛琼国[7]（2001）在《引物二聚体在目的基因克隆中的应用初探》一文中研究指出目的 根据引物二聚体形成原理 ,建立一种新的克隆目的基因的方法。方法 人工合成两条或两条以上 3′端互补配对的寡核苷酸链 ,寡核苷酸链、Taq酶和dNTP按一定比例混合 ,PCR扩增延伸 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。结果 PCR产物经电泳鉴定 ,可见一条清晰的特异条带。结论 此方法能合成 5 0 0bp以下的短片段目的基因。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2001年03期）
引物二聚体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的提供一种去除聚合酶链式反应(PCR)引物二聚体的简便方法。方法根据聚乙二醇(PEG)能够选择性沉淀DNA片段的原理,确定分别去除100 bp、100～200 bp、100～300 bp条带的PEG 6000最终质量分数,因引物二聚体大小一般为200 bp,最终运用到去除含有引物二聚体的PCR产物中。结果最终质量分数为10.67%、9.00%、8.00%的PEG能分别除去100 bp、100～200 bp、100～300 bp条带。最终质量分数为24.00%的PEG能有效去除PCR引物二聚体并纯化PCR产物。结论 PEG 6000能有效去除PCR扩增产物的引物二聚体,达到纯化PCR产物的效果。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
引物二聚体论文参考文献
[1].陈琪,刘晓峰.PCR过程中生成引物二聚体回收再利用的研究[J].江西医药.2018
[2].林艳,李照熙,董卫华,王天云.一种去除聚合酶链式反应引物二聚体的简便方法[J].新乡医学院学报.2012
[3].夏乾峰,覃西,钱士匀,涂植光.新型二聚体突变荧光引物定量检测沙眼衣原体[J].临床检验杂志.2011
[4].夏乾峰.二聚体突变引物定量PCR技术的研发及其临床应用[D].重庆医科大学.2011
[5].闻新棉,陈英剑,胡成进,李云龙,刘泽军.实时荧光定量检测中引物二聚体的优化[J].国外医学.临床生物化学与检验学分册.2005
[6].张驰宇,张高红,杨敏,贲昆龙.四步法消除SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR中引物二聚体的影响[J].中国生物化学与分子生物学报.2004
[7].徐祥,刘昕,梁华平,代佳平,毛琼国.引物二聚体在目的基因克隆中的应用初探[J].临床检验杂志.2001