含伯氏疏螺旋体OspA、OspC蛋白VLPs的构建及鉴定

含伯氏疏螺旋体OspA、OspC蛋白VLPs的构建及鉴定

论文摘要

莱姆病是一种经蜱传播的人兽共患病,随着人们经济的发展,伴侣动物的不断出现增加了人与动物经蜱传播莱姆病的风险,而当前并未有治疗莱姆病的有效方法,因此研制莱姆病疫苗成为一大热点。为了更好地预防莱姆病的发生,本研究通过替换新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白(haemagglutinin-neuraminidase protein,HN)胞外域的方式,利用昆虫杆状病毒表达系统分别构建了含伯氏疏螺旋体候选抗原表位外膜蛋白A(outer surface protein A,OspA)、外膜蛋白C(outer surface protein C,OspC)的新城疫病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),形成了含有伯氏疏螺旋体抗原表位的新城疫病毒样颗粒,为之后研制莱姆病疫苗提供了新思路、新想法。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌种、载体、细胞、主要试剂及主要仪器
  •   1.2 引物设计与合成
  •   1.3 目的基因的PCR扩增及鉴定
  •   1.4 重组穿梭质粒的构建及鉴定
  •   1.5 重组杆粒的构建及鉴定
  •   1.6 重组杆状病毒的拯救与鉴定
  •   1.7 OspA/OspC蛋白VLPs的组装、纯化及鉴定
  • 2 结果
  •   2.1 目的基因的扩增
  •   2.2 克隆质粒的鉴定
  •   2.3 重组穿梭质粒的鉴定
  •   2.4 重组杆粒的鉴定
  •   2.5 sf9细胞病变
  •   2.6 重组杆状病毒的基因组鉴定
  •   2.7 重组杆状病毒的Western blot鉴定
  •   2.8 OspA/OspC VLPs的鉴定及电镜观察
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 于喜冰,李俊姣,常瑾,费亦东,穆佳琦,丁佳欣,李金斗,丁壮,尹仁福

    关键词: 伯氏疏螺旋体候选抗原蛋白,昆虫杆状病毒表达系统,新城疫病毒样颗粒

    来源: 中国兽医学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室

    基金: 国家重点研发计划资助项目(2016YFD0501005)

    分类号: S852.61

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.07.17

    页码: 1336-1341+1346

    总页数: 7

    文件大小: 1429K

    下载量: 40

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