分化体外论文_严继贵,赵正梅,盛夕曼,杨宇清

导读:本文包含了分化体外论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:干细胞,细胞,神经,骨髓,甲状旁腺,牙髓,转录。

分化体外论文文献综述

严继贵,赵正梅,盛夕曼,杨宇清[1](2019)在《IL-10对体外培养胚胎大鼠中脑NSCs增殖分化的影响》一文中研究指出目的:观察白细胞介素-10(IL-10)对体外培养胎鼠大鼠中脑神经干细胞(NSCs)增殖及分化的影响。方法:将孕14d的SD胎鼠中脑制成单细胞悬液,悬浮培养5d,分别行NSCs免疫荧光鉴定、传代及加入IL-10诱导分化实验。实验分空白对照组和IL-10组。在倒置显微镜下观察各组细胞的生长状况,用免疫荧光染色法检测巢蛋白(nestin)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)、神经元特异烯醇化酶(NSE)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达。结果:IL-10组Nestin、caspase-3、GFAP表达与对照组有统计学差异(P<0.05);两组在NSE的表达上差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-10能促进NSCs增殖及向神经胶质细胞分化,但对其向神经元分化无明显影响,NSCs数量的增多亦可能与抑制caspase-3表达相关。(本文来源于《长江大学学报(自然科学版)》期刊2019年12期)

谭卉卉,林灿辉,李街青,陈佳玲,史建强[2](2019)在《Phb2/REA过表达慢病毒载体对体外Th17分化条件下小鼠单核细胞IL-17a表达的影响》一文中研究指出目的探讨Phb2/REA过表达慢病毒转染小鼠初始T细胞后,在Th17细胞分化条件下对该细胞IL-17a表达的影响。方法提取小鼠脾脏淋巴细胞,分离纯化小鼠T淋巴细胞,将其分为空白组、空载体组、慢病毒组、Th17分化组和Th17+慢病毒组。空白组采用1640培养液培养,空载体组在37℃、5%CO_2条件下用空载体慢病毒感染T淋巴细胞,14 h后换回常规培养基;慢病毒组在37℃、5%CO2条件下用含雌激素活性抑制因子(REA)过表达载体的慢病毒感染T淋巴细胞,14 h后换回常规培养基;Th17分化组在空白组培养条件下加用anti-CD3ε、anti-CD28、anti-IFN-γ、antiIL-4抗体及IL-6、TGF-β1、IL-23等细胞因子,诱导原始T细胞向Th17细胞分化。Th17+慢病毒组在空载体组条件下加用Th17细胞分化。72 h后,收集5组细胞,采用Realtime-PCR检测REA、维甲酸依赖性孤核受体γt(ROR-γt)、IL-17a的mRNA的表达,验证Th17细胞分化的效果,探讨Phb2/REA过表达慢病毒载体对Th17细胞的分化及IL-17a表达的影响。结果 Th17+慢病毒组的REA、RORγt mRNA表达较慢病毒组高,且慢病毒组、Th17+慢病毒组REA、RORγt的mRNA明显高于Th17分化组,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);空载体组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Th17分化组的IL-17A mRNA表达明显上调(P<0.01),且高于Th17+慢病毒组(P<0.01);空白组、空载体组、慢病毒组的IL-17A mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Phb2/REA过表达慢病毒转染小鼠T淋巴细胞后,可以抑制Th17细胞的分化,同时抑制炎症因子IL-17的表达。(本文来源于《广东医科大学学报》期刊2019年05期)

熊贵娅,赵利娜,左真子,周志俊,常秀丽[3](2019)在《体外百草枯染毒后神经干细胞的分化特点》一文中研究指出[背景]百草枯(PQ)作为一种广泛使用的除草剂,其神经发育毒性及机制尚未完全明确,且针对PQ对神经干细胞分化影响的研究较少。[目的]研究PQ对神经干细胞分化趋势的影响,并探究神经干细胞分化结局良好的观察时点。[方法]分离提取新生C57BL/6小鼠侧脑室下区原代神经干细胞(mNSCs)进行体外培养,使用0、10、20、40μmol/L浓度PQ处理m NSCs 24 h后,采用MTT法检测细胞活力,并用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)生成。PQ处理mNSCs 24 h后,更换不含PQ的分化培养基持续培养5 d,分别在培养1、3、5 d后镜下观察细胞分化状态,用免疫荧光检测PQ处理对mNSCs分化成神经元及星形胶质细胞的影响。[结果]当PQ浓度为40μmol/L时,细胞活力下降到对照组的86%,且ROS水平升高至对照组的1.67倍(P <0.05)。m NSCs分化3 d后出现明显的细胞分层,经免疫荧光鉴定可知上层主要为神经元细胞。分化5 d后,上层细胞已经长出明显的神经突起样结构,而细胞数量较分化3 d后检测结果无肉眼可见差异。采用免疫荧光方法计数分化后的各种细胞数量,发现随着PQ染毒剂量的增加,神经元细胞比例呈现逐渐下降的趋势,且神经元与星形胶质细胞生成比也呈现逐渐降低的趋势,当PQ浓度为20、40μmol/L时差异有统计学意义(P <0.05)。[结论]PQ可抑制原代培养的mNSCs向神经元方向的分化,这种作用可能与PQ诱导细胞氧化应激相关。体外培养的mNSCs分化5 d可作为良好的研究干细胞分化的时点。(本文来源于《环境与职业医学》期刊2019年10期)

龚婷,吴红昆,楼北雁,Peter,X.Ma[4](2019)在《人牙髓干细胞来源的外泌体在体外促进人牙髓干细胞分化及矿化》一文中研究指出目的:外泌体(Exosomes,Exos)是一种包含了复杂RNA和蛋白质的由细胞分泌的直径为50-150nm的盘状囊泡。由于外泌体可调节受体细胞相关生物活动,并且没有天然或组织工程干细胞移植的免疫排异反应,因而在组织再生领域逐渐受到重视。本研究旨在探讨人牙髓干细胞(human Dental pulp stem cells,hDPSCs)外泌体在体外促进hDSPCs分化及矿化的作用。方法:hDPSCS在促矿化培养基(odontogenic media,OM)中培养14天后,从上清液中分离出外泌体,命名为OM-hDPSCExos。通过直径表征和特异性表面标记物证明提取的为外泌体。利用hDPSCs研究外泌体对其迁移、分化和矿化的影响。结果:茜素红染色显示,OM+OM-hDPSC-Exos处理后14天,基质矿化程度明显高于单纯OM处理。实时聚合酶链反应结果显示,在OM中添加OM-hDPSC-Exos 14天后,牙本质唾液磷蛋白(DSPP)和runt相关转录因子2 (RUNX2)表达上调。Transwell迁移实验表明,OM-hDPSCExos引起细胞迁移的多少与外泌体浓度成正比。结论:OM-hDPSC-Exos与OM协同诱导hDPSCs向成牙细胞分化,并在体外诱导矿化。来自hDPSCs的外泌体可能是一种很有前途的促进牙本质再生的工具。(本文来源于《2019年中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十四次全国老年口腔医学学术年会论文汇编》期刊2019-10-15)

郑春青,盖雅雯,张艳丽,郑梓婷,王霁蕾[5](2019)在《PTH模拟肽MY-1对骨髓间充质干细胞成骨分化的体外研究》一文中研究指出目的:甲状旁腺素(Parathyoid Hormone,PTH)是正常人体内的钙调节激素,N端34个氨基酸多肽(PTH(1-34),特立帕肽)是临床上治疗骨质疏松的促骨形成药物,但因持续应用会促进破骨吸收,故仅限于间断使用。在课题组前期实验中,我们已经验证并合成了能够特异性激活PKC通路的PTH模拟肽(MY-1),通过对其进行体外和体内实验,我们发现间断注射MY-1肽具有促进成骨细胞分化,但不激活破骨细胞分化和增殖的作用。本课题组进一步通过体外实验,评价持续应用MY-1肽对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:体外培养骨髓间充质干细胞,并通过CCK8、茜素红染色、qRT-PCR、western blot等分析持续应用MY-1肽对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。结果:同对照组和PTH作用组相比,发现持续应用MY-1肽组具有比PTH更好的促进成骨分化的作用,并且未表现出和PTH一样的促进破骨分化的作用。结论:持续应用MY-1肽能促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。(本文来源于《2019年中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十四次全国老年口腔医学学术年会论文汇编》期刊2019-10-15)

葛斌[6](2019)在《探究催产素在体外对牙周膜干细胞增殖、迁移、成骨分化的影响》一文中研究指出目的:探究催产素在体外对牙周膜干细胞的增殖、迁移及成骨分化的作用并初步探究其可能机制。材料与方法:取材新鲜拔除的正畸所需前磨牙根中1/3的牙周膜干细胞,采用有限稀释法分离培养,采用流式细胞仪鉴定其干性;免疫荧光法检测牙周膜干细胞表面是否表达催产素受体;CCK8试剂盒检测不同浓度催产素对牙周膜干细胞增殖的影响;细胞迁移试验检测不同浓度催产素对牙周膜干细胞迁移的影响;茜素(本文来源于《2019第九次全国口腔生物医学学术年会论文汇编》期刊2019-10-11)

邓明,谢萍,吴飞,马永刚,周炎[7](2020)在《人尿源性干细胞体外向神经元样细胞诱导分化及对大鼠脊髓损伤的保护作用》一文中研究指出背景:人尿源性干细胞是近年来新发现的成体干细胞,其来源不受限制,提取简便,具备良好的增殖能力及多向分化潜能,近年来已应用于泌尿系疾病中的神经功能修复,如应激性尿失禁以及膀胱输尿管返流等。目的:探索人尿源性干细胞向神经元样细胞诱导分化能力及对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法:体外获取人尿源性干细胞后利用流式细胞仪检测其细胞表型,将人尿源性干细胞向神经元样细胞诱导后进行免疫组织化学染色鉴定。采用Allen方法制作大鼠T9节段脊髓损伤模型,24只SD大鼠被随机分为2组:脊髓损伤组和人尿源性干细胞组,每组12只。人尿源性干细胞组在脊髓损伤后第1天于损伤脊髓边缘注入2μL细胞浓度为1.0×1011 L-1人尿源性干细胞,脊髓损伤组注入等量含体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养液,于造模后第1,10,20,30天进行BBB评分,第30天取各组损伤脊髓组织分别进行Luxol Fast Blue染色、小胶质细胞/巨噬细胞染色和胶质纤维酸性蛋白染色,并计算损伤脊髓面积和胶质纤维酸性蛋白荧光强度。结果与结论:①人尿源性干细胞高表达CD29、CD90,而低表达CD45,并且在体外可向神经元样细胞诱导分化;②造模后第1,10天两组大鼠BBB评分差异无显着性意义(P>0.05),第20,30天人尿源性干细胞组BBB评分明显高于脊髓损伤组(P<0.05);③人尿源性干细胞组脊髓损伤面积明显低于脊髓损伤组(P<0.05),胶质纤维酸性蛋白染色显示人尿源性干细胞组荧光强度明显低于脊髓损伤组(P <0.05);④结果表明,人尿源性干细胞能向神经元样细胞分化,并对大鼠脊髓损伤具有修复作用。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2020年01期)

刘洋,吕洋,王浩宇,李娇,任君旭[8](2019)在《1,25-维生素-D_3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度》一文中研究指出目的探讨1,25-维生素D_3(1,25-vitamin-D_3)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的最适浓度。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,应用3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D_3对第2代BMSCs进行定向诱导,倒置相差显微镜下动态观察细胞生长状况。运用流式细胞仪对BMSCs进行鉴定。应用免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测诱导后4周的BMSCs原肌球蛋白(TPM)、间隙连接蛋白43(Cx43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况。运用透射电子显微镜观察分化细胞与心肌细胞类似的超微结构。在诱导后1、2和4周这3个时间点,以Real-time PCR法检测细胞心肌早期转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、Nkx2.5的表达。结果 1.倒置相差显微镜下观察,原代细胞培养72 h后,大部分细胞呈短梭形;培养1周后,细胞呈现出多样化的形态;诱导4周的BMSCs,相邻细胞间联系紧密,排列具有明显的方向性。不同浓度1,25-vitamin-D_3诱导后的BMSCs,其数量及形态存在差异。2.流式细胞术的鉴定结果显示,CD29、CD45、CD90的阳性表达率分别为97.4%、3.3%和91.4%。3.免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测不同浓度1,25-vitamin-D_3诱导4周后的BMSCs均可见TPM、Cx43及cTnT的阳性表达,其中6 nmol/L组的表达均最高,而未诱导组细胞呈弱阳性或阴性表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.透射电子显微镜观察,细胞诱导培养至4周,胞质内可见较多平行排列的肌丝及线粒体、核糖体、粗面内质网等细胞器。5.Real-time PCR检测结果显示,GATA4及Nkx2.5基因于诱导后1周表达增强,2周表达减弱,4周表达增强;4个诱导组相比较,6 nmol/L组明显优于其他3组(P<0.05)。结论 1,25-vitamin-D_3可以诱导BMSCs获得心肌分化表型,其诱导分化最适浓度为6 nmol/L。(本文来源于《解剖学报》期刊2019年05期)

杨海杰,付启冉,雷冰冰,袁昕,尚思楠[9](2019)在《THBS4上调转录因子Ngn1影响NG2细胞的体外神经元分化》一文中研究指出NG2细胞作为中枢神经系统中的第四类胶质细胞群体,具备分化成神经元的潜力,或许可为神经细胞的再生治疗提供细胞来源。但NG2细胞向神经元转分化的具体机制尚未完全明了。该研究发现,血小板反应蛋白4(thrombospondin 4, THBS4)参与了NG2细胞的神经元分化。THBS4过表达时, NG2细胞中的多个神经元标志物的mRNA和蛋白质表达水平均显着上调,如Tuj1、MAP2、NeuN。相对应地,胶质细胞的标志物表达则出现明显下调,如GFAP和Olig2。当THBS4基因沉默后,这些标志物的表达趋势刚好相反。对NG2细胞分化过程中转录因子的研究表明, THBS4介导的NG2细胞分化可能与转录因子Ngn1、ATF6、Olig2有关。研究结果表明,THBS4可以促进NG2细胞向神经元转分化,这为NG2细胞应用于神经损伤的治疗提供有利的理论依据。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2019年09期)

陈盼盼,赵星星,管小菊,陈芬芬,季敏鹏[10](2019)在《生精小管表面干细胞向Leydig和肌样myoid细胞谱系分化的体外研究》一文中研究指出目的:我们之前研研究发现,位于成年大鼠生精小管外周的干细胞能够在体外分化为Leydig细胞。这些细胞被命名为Leydig干细胞(SLCs)。其增殖和分化受局部产生的因子调节,包括Desert Hedgehog(DHH)及PDGF等家族蛋白。DHH可刺激SLC增殖并诱导其向Leydig细胞的分化。PDGF家族的两个成员PDGF-AA和PDGF-BB似乎在SLC增殖和分化中发挥独特作用。PDGF-AA能够刺激SLC向Leydig谱系的增殖和分化,而PDGF-BB刺激增殖但抑制这些细胞向Leydig谱系的分化。由于PDGF-BB是平滑肌细胞发育的强诱导因子,在本研究中,我们检验假说:SLC是一种多能干细胞,PDGF-BB可能是通过将其诱导成管周肌样myoid细胞,从而达到抑制SLC向Leydig细胞的分化作用。方法:体外分离并培养来源于成年大鼠的生精小管。生精小管分别在Leydig细胞分化培养基(LH+SAG+PDGFAA)和肌样myoid细胞分化培养基(雄激素+TGFB+PDGF-BB)中培养3周,然后检测各项Leydig细胞(CYP11A1,HSD3B,雄激素产生,等)和肌样细胞(ACTA2,Desmin)的标志物及产物。结果:在Leydig细胞分化培养基(LH+SAG+PDGFAA)存在的条件下,SLC主要形成Leydg细胞,睾酮合成通路蛋白表达及雄激素分泌均显着增加。相反,在肌样myoid细胞分化培养基(雄激素+TGFB+PDGF-BB)存在的条件下,SLC主要形成myoid细胞,其肌样细胞标志蛋白(ACTA2,Desmin等)表达显着增加。结论:本研究结果表明,在成年哺乳动物睾丸中,生精小管表面干细胞,虽然被命名为Leydig干细胞,但其可能是Leydig及myoid细胞的共同前体细胞。已知这些细胞能够分化成睾丸间质细胞。本研究证明,这些细胞也能够分化成睾丸的myoid肌样谱系。这些细胞在体内的最终命运,显然取决于局部诱导因子。这种多能干细胞可能在维持成年睾丸中Leydig和myoid细胞群体的稳态中起重要作用。(本文来源于《中国药理学会第十一届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨生殖药理新技术与新方法培训班论文汇编》期刊2019-09-20)

分化体外论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨Phb2/REA过表达慢病毒转染小鼠初始T细胞后,在Th17细胞分化条件下对该细胞IL-17a表达的影响。方法提取小鼠脾脏淋巴细胞,分离纯化小鼠T淋巴细胞,将其分为空白组、空载体组、慢病毒组、Th17分化组和Th17+慢病毒组。空白组采用1640培养液培养,空载体组在37℃、5%CO_2条件下用空载体慢病毒感染T淋巴细胞,14 h后换回常规培养基;慢病毒组在37℃、5%CO2条件下用含雌激素活性抑制因子(REA)过表达载体的慢病毒感染T淋巴细胞,14 h后换回常规培养基;Th17分化组在空白组培养条件下加用anti-CD3ε、anti-CD28、anti-IFN-γ、antiIL-4抗体及IL-6、TGF-β1、IL-23等细胞因子,诱导原始T细胞向Th17细胞分化。Th17+慢病毒组在空载体组条件下加用Th17细胞分化。72 h后,收集5组细胞,采用Realtime-PCR检测REA、维甲酸依赖性孤核受体γt(ROR-γt)、IL-17a的mRNA的表达,验证Th17细胞分化的效果,探讨Phb2/REA过表达慢病毒载体对Th17细胞的分化及IL-17a表达的影响。结果 Th17+慢病毒组的REA、RORγt mRNA表达较慢病毒组高,且慢病毒组、Th17+慢病毒组REA、RORγt的mRNA明显高于Th17分化组,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);空载体组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Th17分化组的IL-17A mRNA表达明显上调(P<0.01),且高于Th17+慢病毒组(P<0.01);空白组、空载体组、慢病毒组的IL-17A mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Phb2/REA过表达慢病毒转染小鼠T淋巴细胞后,可以抑制Th17细胞的分化,同时抑制炎症因子IL-17的表达。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

分化体外论文参考文献

[1].严继贵,赵正梅,盛夕曼,杨宇清.IL-10对体外培养胚胎大鼠中脑NSCs增殖分化的影响[J].长江大学学报(自然科学版).2019

[2].谭卉卉,林灿辉,李街青,陈佳玲,史建强.Phb2/REA过表达慢病毒载体对体外Th17分化条件下小鼠单核细胞IL-17a表达的影响[J].广东医科大学学报.2019

[3].熊贵娅,赵利娜,左真子,周志俊,常秀丽.体外百草枯染毒后神经干细胞的分化特点[J].环境与职业医学.2019

[4].龚婷,吴红昆,楼北雁,Peter,X.Ma.人牙髓干细胞来源的外泌体在体外促进人牙髓干细胞分化及矿化[C].2019年中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十四次全国老年口腔医学学术年会论文汇编.2019

[5].郑春青,盖雅雯,张艳丽,郑梓婷,王霁蕾.PTH模拟肽MY-1对骨髓间充质干细胞成骨分化的体外研究[C].2019年中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会第十四次全国老年口腔医学学术年会论文汇编.2019

[6].葛斌.探究催产素在体外对牙周膜干细胞增殖、迁移、成骨分化的影响[C].2019第九次全国口腔生物医学学术年会论文汇编.2019

[7].邓明,谢萍,吴飞,马永刚,周炎.人尿源性干细胞体外向神经元样细胞诱导分化及对大鼠脊髓损伤的保护作用[J].中国组织工程研究.2020

[8].刘洋,吕洋,王浩宇,李娇,任君旭.1,25-维生素-D_3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度[J].解剖学报.2019

[9].杨海杰,付启冉,雷冰冰,袁昕,尚思楠.THBS4上调转录因子Ngn1影响NG2细胞的体外神经元分化[J].中国细胞生物学学报.2019

[10].陈盼盼,赵星星,管小菊,陈芬芬,季敏鹏.生精小管表面干细胞向Leydig和肌样myoid细胞谱系分化的体外研究[C].中国药理学会第十一届全国基础与临床生殖药理学术研讨会暨生殖药理新技术与新方法培训班论文汇编.2019

论文知识图

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