卡拉胶酶论文_于源,刘哲民,陈梦,杨敏,李丽

导读:本文包含了卡拉胶酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:卡拉胶,工艺,细菌,南极,糖苷,条件,培养基。

卡拉胶酶论文文献综述

于源,刘哲民,陈梦,杨敏,李丽[1](2018)在《联合使用启动子与共表达转录因子、伴侣因子提升重组κ-卡拉胶酶在毕赤酵母中的表达》一文中研究指出本研究通过联合使用组成型启动子和共表达伴侣因子、转录因子,提升了截短κ-卡拉胶酶基因(cgkZ△Pst)在毕赤酵母中的表达水平。3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAP)启动子可使重组κ-卡拉胶酶在不添加甲醇诱导的条件下得到表达。经过22℃的96小时摇瓶培养,产酶活力为2.73 U/mL。甲醇添加量为1%(v/v)时,重组酶酶活力达7.96 U/mL,为对照组的1.4倍。共表达一系列可促进外源蛋白折迭,避免蛋白聚集和抵抗氧化应激的伴侣因子与转录因子,目的基因cgkZ△Pst的转录水平提高至对照菌株的1.3-1.9倍,重组酶cgkZ△Pst的酶活力提高到7.0-7.7 U/mL。诱导型AOX1启动子与组成型GAP启动子的联合使用明显提升了重组κ-卡拉胶酶的表达量;共表达合适的转录因子与伴侣因子同样可促进重组κ-卡拉胶酶的分泌表达。这项研究有望为其他海洋多糖水解酶的深入开发提供思路。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07)

于源,牟海津[2](2018)在《κ-卡拉胶酶在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的异源表达研究》一文中研究指出为提升来源于Zobellia sp.ZM-2菌株的κ-卡拉胶酶的酶活力与功能,本文通过毕赤酵母表达系统对κ-卡拉胶酶目的基因cgkZ进行表达。设计并表达截除C-分泌末端结构域(Pst)的截短基因cgkZ△PSt与截除酶与底物结合域(CBM)的cgkZ△CBM;在含截短卡拉胶酶基因cgkZ△Pst的重组酵母菌株基础上,通过联合使用诱导型启动子AOX1与组成型启动子GAP,使卡拉胶酶表达水平得以提升。根据重组菌株培养条件的优化的结果,选取22℃,pH6.0,诱导剂甲醇添加量1%(v/v)的条件摇瓶培养96 h。重组菌株发酵期间,截短基因cgkZ△Pst与cgkZ△CBM的转录水平显着高于原目的基因cgkZ;重组酶cgkZ、cgkZ△PSt与cgkZ△CBM的酶活力分别为4.68、5.70和3.02 U/mL,分子量分别为65,45和40 kDa左右,K_m值分别为2.07、1.85和1.04 mg/mL,重组酶酶解终产物以κ-新卡四糖与六糖为主。联合使用诱导型启动子AOX1与组成型启动子GAP,使得目的基因cgkZ△Pst在无甲醇诱导的条件下得到表达,在22℃下摇瓶培养酶活力为2.73 U/mL。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07)

潘爱红,李江,王蕾,宋益民[3](2018)在《南极交替单胞菌R11-5产卡拉胶酶的发酵条件优化》一文中研究指出【背景】极地寒冷环境中发现了大量具有潜在应用前景的冷适应酶,同时也存在种类繁多的海藻多糖降解菌,因此极端环境微生物是筛选获得新颖、高效多糖降解酶的重要新源泉。由于筛选培养基通常并非野生菌发酵产酶的最优条件,为了使野生菌的产酶效率达到最高,需要对其培养条件进行优化,从而为其深入研究及开发利用提供依据。【目的】对一株产卡拉胶酶的南极菌株进行种属鉴定,并采用响应面法对该菌的发酵产酶条件进行优化。【方法】通过16SrRNA基因对产卡拉胶酶的南极菌株进行种属鉴定,采用响应面法优化南极菌株产酶发酵条件。【结果】该南极菌属于交替单胞菌属(Alteromonas),命名为交替单胞菌R11-5。发酵条件优化结果显示,7个环境因子影响交替单胞菌R11-5的产酶量。利用Design-Expert软件中的Plackett-Burman设计实验,筛选出影响交替单胞菌R11-5产酶量的4个主要因素分别为培养温度、牛肉膏浓度、卡拉胶浓度和Ca~(2+)浓度。通过Box-Behnken设计和响应面分析得到交替单胞菌R11-5最佳产酶发酵条件为:温度15.0°C,牛肉膏浓度11.0 g/L,卡拉胶浓度3.0 g/L,Ca~(2+)浓度5.0 mmol/L。优化后发酵上清液酶产量达到87.193 U/mL,与优化前相比提高了1.8倍。【结论】响应面法提高了南极交替单胞菌R11-5卡拉胶酶的产量,为其开发应用提供了科学依据。(本文来源于《微生物学通报》期刊2018年09期)

杨敏,田琳,刘哲民,牟海津[4](2018)在《重组菌BL21-HTa-cgkZ产κ-卡拉胶酶的分离纯化》一文中研究指出研究了重组菌BL21-HTa-cgk Z产κ-卡拉胶酶的分离纯化技术。在发酵罐中制备粗酶液,将粗酶液沉淀、阴离子交换层析、超滤浓缩和葡聚糖凝胶过滤层析,得到高纯度的κ-卡拉胶酶。通过对沉淀剂、沉淀时间、沉淀pH的单因素试验确定κ-卡拉胶酶的最优沉淀条件,即:沉淀剂40%的乙醇,沉淀时间4 h,沉淀pH 6.0。通过各级分离纯化,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳分子质量为62 ku的条带,经LC-MS/MS鉴定,确定该条带为含有κ-卡拉胶酶的条带。测定纯化后的κ-卡拉胶酶酶活,结果显示,κ-卡拉胶酶的比活力为94.23 U/mg,纯化倍数12.33倍。重组菌BL21-HTa-cgk Z发酵产生的κ-卡拉胶酶,经各级分离纯化,得到高纯度的κ-卡拉胶酶,为卡拉胶酶的食品工业化应用奠定了基础。(本文来源于《中国食品学报》期刊2018年05期)

李俊燕,张付云,李妍,付松岩,石楠[5](2018)在《卡拉胶酶产生菌的筛选及发酵条件优化》一文中研究指出为获得卡拉胶酶高产菌株,用卡拉胶作为唯一碳源,对从海水中分离的13株菌进行筛选,进而采用分子生物学方法将3号菌株鉴定为γ变形杆菌纲的Gilvimarinus属,并应用单因素试验和正交试验对3号菌株降解活性培养条件进行优化,结果显示较优培养条件为:蛋白胨0.20%,卡拉胶0.20%,琼脂0.001%,氯化钠2%,磷酸氢二钾10%,硫酸镁0.5%,磷酸铁0.1%,氯化钙1%,25℃培养2d。(本文来源于《河北渔业》期刊2018年01期)

曾洁,李永幸,洪清林,郭东旭,姜泽东[6](2017)在《卡拉胶酶固体酶制剂的喷雾干燥制备工艺优化》一文中研究指出为研究卡拉胶酶固体酶制剂的喷雾干燥制备工艺条件,以卡拉胶酶酶活回收率为评价指标,在单因素实验的基础上,结合响应面分析法对卡拉胶酶固体酶制剂的喷雾干燥制备工艺进行优化,得到最佳喷雾干燥条件:麦芽糊精浓度27%,进风温度131℃,热风流量4.5 m~3/min,进料速度456 m L/h,喷雾压力0.2 MPa。在此条件下,酶活回收率达到56.9%±2.1%,与理论最优值56.1%接近。(本文来源于《食品工业科技》期刊2017年24期)

常耀光,申晶晶[7](2017)在《一种新型κ-卡拉胶酶的基因发掘、克隆表达及性质研究》一文中研究指出κ-卡拉胶是一种重要的海洋多糖,在食品添加剂、功能食品、医药等领域具有广泛的应用。κ-卡拉胶酶是研究及改造κ-卡拉胶不可缺少的工具酶。本研究利用生物信息学分析技术从海洋细菌Wenyingzhuangia aestuarii OF219的基因组中挖掘出一条潜在的κ-卡拉胶酶编码基因cgk16A,并对该基因进行分子克隆和异源表达,进而系统地研究了重组蛋白的酶学性质。此酶与已知GH16家族的κ-卡拉胶酶相比,序列相似度最高为40%,且具有最低的最适反应温度(25°C),有利于该酶在实际生产中的应用。Cgk16A以随机内切的作用方式降解κ-卡拉胶,最小作用底物为六糖,降解终产物为四糖及少量二糖。酶促动力学分析结果表明Cgk16A具有较高的底物亲和力(Km=0.17μM),可实现不同分子量κ-卡拉胶寡糖的高效制备。本研究结果为κ-卡拉胶的酶解获取取得到了一种新型的工具酶,有利于κ-卡拉胶及其寡糖的进一步研究与应用。(本文来源于《2017年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2017-11-08)

陈旭,姚忠,袁玮康,孙芸,朱本伟[8](2017)在《海洋细菌Pedobacter sp.NJ-02产κ-卡拉胶酶的发酵条件优化》一文中研究指出通过筛选分离获得一株产κ-卡拉胶酶活力较高的菌株NJ-02,通过生理生化实验,16S r RNA基因序列测定和系统发育树分析,鉴定其为农杆菌属Pedobacter sp.。通过设计单因素和响应面实验,确定该菌株的最佳产酶发酵条件。通过单因素实验得其最佳发酵产酶条件为:碳源为κ-卡拉胶(2.00 g/L)、氮源为酵母浸提物(4.00 g/L)、p H 7.00、接种量5%、培养温度30℃、摇床转速150 r/min。通过液体培养基单因素研究,确定了叁个影响产κ-卡拉胶酶的关键因素,分别是碳源、氮源和初始p H。根据Box-Behnken中心组合方法采用叁因素叁水平响应值设计实验优化,得到最佳的培养基配方为:卡拉胶浓度2.15 g/L、酵母浸提物4.32 g/L、p H 7.10。结论:优化后酶活最高可达19.01 U/m L,较优化前提高了1.20倍,NJ-02最佳发酵条件的建立,为获得大量的κ-卡拉胶酶进行更深入的研究提供了实验基础和理论依据。(本文来源于《现代食品科技》期刊2017年12期)

朱云鹏,李永幸,洪清林,倪辉,郭东旭[9](2017)在《卡拉胶酶的发酵培养基及培养条件优化》一文中研究指出以生物量与卡拉胶酶活为指标,研究发酵培养基组成和培养条件对菌株ASY5产卡拉胶酶的影响,优化菌株Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5产卡拉胶酶的培养基和培养条件,以提高卡拉胶酶的产量。结果表明,最优培养基和培养条件为:卡拉胶5 g/L,胰蛋白胨5 g/L,Na Cl 20 g/L,Ca Cl_20.2 g/L,Na H_2PO_4·2H_2O 1.3 g/L,Na_2HPO_4·12H_2O3.8 g/L,温度18℃,初始p H为6.5,接种量2%,装液量70 m L。在优化工艺条件下,菌株ASY5的生物量和卡拉胶酶活比初始条件分别提高了80.4%和52.2%,菌株ASY5发酵产卡拉胶酶的能力大幅度提高。(本文来源于《食品工业科技》期刊2017年23期)

赫慧敏,李永幸,洪清林,倪辉,郭东旭[10](2017)在《卡拉胶酶发酵的工艺优化及中试放大》一文中研究指出在5 L发酵罐上,以考察搅拌转速、补料及p H值对菌株Pseudoalteromonas carrageenovora ASY5产卡拉胶酶的影响进行优化,建立卡拉胶酶的高产发酵工艺。结果表明:提高搅拌转速能促进产酶并缩短发酵时间,其中搅拌转速为280 r/min时较佳;发酵过程中补料或控制恒定p H值对酶活力没有促进作用。在5 L罐发酵试验基础上进行中试放大实验,在20,75,200 L罐中的卡拉胶酶活力最大值分别为33.9,34.7,36.1 U/m L。(本文来源于《集美大学学报(自然科学版)》期刊2017年04期)

卡拉胶酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为提升来源于Zobellia sp.ZM-2菌株的κ-卡拉胶酶的酶活力与功能,本文通过毕赤酵母表达系统对κ-卡拉胶酶目的基因cgkZ进行表达。设计并表达截除C-分泌末端结构域(Pst)的截短基因cgkZ△PSt与截除酶与底物结合域(CBM)的cgkZ△CBM;在含截短卡拉胶酶基因cgkZ△Pst的重组酵母菌株基础上,通过联合使用诱导型启动子AOX1与组成型启动子GAP,使卡拉胶酶表达水平得以提升。根据重组菌株培养条件的优化的结果,选取22℃,pH6.0,诱导剂甲醇添加量1%(v/v)的条件摇瓶培养96 h。重组菌株发酵期间,截短基因cgkZ△Pst与cgkZ△CBM的转录水平显着高于原目的基因cgkZ;重组酶cgkZ、cgkZ△PSt与cgkZ△CBM的酶活力分别为4.68、5.70和3.02 U/mL,分子量分别为65,45和40 kDa左右,K_m值分别为2.07、1.85和1.04 mg/mL,重组酶酶解终产物以κ-新卡四糖与六糖为主。联合使用诱导型启动子AOX1与组成型启动子GAP,使得目的基因cgkZ△Pst在无甲醇诱导的条件下得到表达,在22℃下摇瓶培养酶活力为2.73 U/mL。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

卡拉胶酶论文参考文献

[1].于源,刘哲民,陈梦,杨敏,李丽.联合使用启动子与共表达转录因子、伴侣因子提升重组κ-卡拉胶酶在毕赤酵母中的表达[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018

[2].于源,牟海津.κ-卡拉胶酶在毕赤酵母(Pichiapastoris)中的异源表达研究[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018

[3].潘爱红,李江,王蕾,宋益民.南极交替单胞菌R11-5产卡拉胶酶的发酵条件优化[J].微生物学通报.2018

[4].杨敏,田琳,刘哲民,牟海津.重组菌BL21-HTa-cgkZ产κ-卡拉胶酶的分离纯化[J].中国食品学报.2018

[5].李俊燕,张付云,李妍,付松岩,石楠.卡拉胶酶产生菌的筛选及发酵条件优化[J].河北渔业.2018

[6].曾洁,李永幸,洪清林,郭东旭,姜泽东.卡拉胶酶固体酶制剂的喷雾干燥制备工艺优化[J].食品工业科技.2017

[7].常耀光,申晶晶.一种新型κ-卡拉胶酶的基因发掘、克隆表达及性质研究[C].2017年中国水产学会学术年会论文摘要集.2017

[8].陈旭,姚忠,袁玮康,孙芸,朱本伟.海洋细菌Pedobactersp.NJ-02产κ-卡拉胶酶的发酵条件优化[J].现代食品科技.2017

[9].朱云鹏,李永幸,洪清林,倪辉,郭东旭.卡拉胶酶的发酵培养基及培养条件优化[J].食品工业科技.2017

[10].赫慧敏,李永幸,洪清林,倪辉,郭东旭.卡拉胶酶发酵的工艺优化及中试放大[J].集美大学学报(自然科学版).2017

论文知识图

海洋细菌P.porphyraeLL1菌株基因组DN...菌株菌落形态(A),菌体形态(B)不同酶量底物配比的水解率菌株16SrDNA序列系统进化树,Boot...染色体步移电泳结果结构转录调节因子进化树

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