犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立

论文摘要

通过分析对比GenBank公布的几株犬Ⅰ型腺病毒序列,针对犬Ⅰ型腺病毒特有的E3区,设计了1对特异性引物。对引物浓度、退火温度、扩增体系等条件优化后,建立了犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法,并对40份CAV-Ⅰ人工感染银黑狐的粪便样品进行了检测。结果表明,与普通PCR相比,建立的犬Ⅰ型腺病毒荧光定量PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性强的特点。该检测方法可用于Ⅰ型犬腺病毒的快速诊断与监测,并能够定量分析CAV-Ⅰ的感染程度。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 毒种、细胞及实验动物
  •     1.1.2 主要试剂和仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 CAV-Ⅰ的增殖
  •     1.2.2 病毒DNA的提取
  •     1.2.3 标准质粒的构建
  •     1.2.4 荧光定量PCR引物设计与合成
  •     1.2.5 荧光定量PCR反应标准曲线的绘制
  •     1.2.6 特异性、重复性和敏感性试验
  • 2 结果
  •   2.1 标准质粒的构建
  •   2.2 优化扩增反应条件
  •   2.3 绘制标准曲线
  •   2.4 特异性、重复性和敏感性试验
  •   2.5 临床样品检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 薛向红,赵辉,卜研,闫喜军,廉士珍,朱言柱,刘昊,吕娇

    关键词: 犬型腺病毒,荧光定量,检测方法

    来源: 动物医学进展 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院特产研究所,敦化市畜牧业管理局

    基金: “十三五”国家重点研发计划项目(2016YFD0501001)

    分类号: S852.655

    DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.03.005

    页码: 36-40

    总页数: 5

    文件大小: 225K

    下载量: 103

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