导读:本文包含了肌酐水解酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肌酐水解酶,培养基,发酵条件,优化
肌酐水解酶论文文献综述
石群,张庆芳,杨丽娜,任楠楠,乔慧[1]（2017）在《肌酐水解酶菌株S-09发酵条件优化及酶的分离纯化》一文中研究指出该实验以海洋来源的微小杆菌(Exiguobacterium sp.)S-09为出发菌株,对其发酵培养基和产酶条件进行优化。并将粗酶液经硫酸铵盐析、透析、超滤离心和Sephadex G-100凝胶过滤层析进行分离纯化。结果表明,其最佳发酵培养基为0.5%的肌酐作为碳源、0.3%胰蛋白胨和0.2%玉米浆作为复合氮源,诱导物肌酸含量为0.3%;其最佳发酵条件为作用pH值7.5、温度25℃、装液量50 mL/250 mL、接种量3%。Fe~(2+)和Mn~(2+)能显着促进产酶。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶电泳结果显示,纯化后的肌酐水解酶分子质量为24.3 ku。(本文来源于《中国酿造》期刊2017年04期）
石群,张庆芳,杨丽娜,王晓辉,窦少华[2]（2017）在《海洋肌酐水解酶菌株的筛选鉴定及其酶学性质研究》一文中研究指出从渤海海泥中筛选出一株肌酐水解酶高产菌株S-09,经形态学、生理生化特征并结合16S rDNA系统发育分析,鉴定菌株为微小杆菌属(Exiguobacterium sp.)。对所产肌酐水解酶进行酶学性质研究表明,该酶的最适作用温度为30℃,热稳定性较差,最适作用pH值为7.5,碱性条件下,pH值稳定性较好;Co~(2+)、Mn~(2+)对酶的激活作用较强,Ag~+、Hg~(2+)对酶有显着的抑制作用。(本文来源于《中国酿造》期刊2017年03期）
杨波,蒋芬,朱艳,杨成,向铁勇[3]（2016）在《肌酐水解酶基因工程菌的构建及功能研究》一文中研究指出目的构建肌酐水解酶的重组质粒转染至大肠杆菌中,研究其蛋白的表达及活性。方法根据Genbank上肌酐水解酶基因序列(D45424.1),进行生物合成,得到肌酐水解酶基因片段C,聚合酶链反应(PCR)扩增后,与质粒GV296连接,构建成重组质粒GV296-C,转染至大肠杆菌BL21(DE3),构建成基因工程菌GV296-C/BL21(DE3)。进行十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)分析后,测定培养液肌酐浓度变化。结果成功构建重组质粒GV296-C,电泳显示目的片段约为0.783Kb,测序结果与D45424.1基因序列一致。重组质粒GV296-C转染至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经SDS-PAGE分析酶蛋白的分子量约为29KD。结论成功构建工程菌GV296-C/BL21(DE3),诱导后高效表达肌酐水解酶,具有水解肌酐活性。(本文来源于《中南医学科学杂志》期刊2016年05期）
程新,刘芳,张彦新,蒋云生[4]（2013）在《尿酸氧化酶与肌酐水解酶融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的构建含尿酸氧化酶与肌酐水解酶融合基因的质粒并转化大肠杆菌,使其能同时分泌该两种酶分解尿酸及肌酐。方法根据GenBank数据库已知的尿酸氧化酶基因设计引物,扩增到去掉终止密码子的尿酸氧化酶基因中,并使其连接到质粒pGM36e上构建成pGM36e-U,然后根据已知肌酐水解酶基因设计引物扩增肌酐水解酶基因,把其连接到质粒pGM36e-U中尿酸氧化酶基因后构建成重组质粒pGM36e-U/C,转化大肠杆菌,筛选鉴定重组大肠杆菌,并进行SDS-PAGE分析。将工程菌于特定浓度肌酐和尿酸的培养基中培养24 h,取培养液测定肌酐和尿酸浓度。结果重组质粒得到大小约1.68 kb基因片段。为尿酸氧化酶及肌酐水解酶之合。转化大肠杆菌后尿酸氧化酶及肌酐水解酶活性得到表达。肌酐分解率提高43.50%,尿酸分解率提高42.32%。结论构建的含复合基因的重组质粒转化大肠杆菌后能表达尿酸氧化酶及肌酐水解酶活性。分解尿酸和肌酐。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2013年13期）
程新,张彦新,周桂凤,蒋云生[5]（2009）在《产肌酐水解酶基因工程菌的构建》一文中研究指出从恶臭假单胞菌基因组中PCR扩增到肌酐水解酶基因,并构建成含有肌酐水解酶基因的重组质粒PMG36e-C,重组质粒PMG36e-C电转化保加利亚乳酸成功构建了含肌酐水解酶的基因工程乳酸菌。SDS-PAGE测定基因工程菌合成的肌酐水解酶亚基分子量约为28 KD,在体外测定菌酶液活性可达0.19 u/mL,为开发具有分解肌酐的对尿毒症有治疗作用的可食用基因工程菌奠定基础。(本文来源于《生物医学工程研究》期刊2009年04期）
赵更峰,马晓航,贾小明,赵宇华,王园园[6]（2005）在《节杆菌肌酐水解酶的纯化及特性研究》一文中研究指出研究了产自于一株节杆菌的肌酐水解酶。该肌酐水解酶经热处理、硫酸铵分级沉淀、DEAE Cellulose离子交换、疏水层析后 ,酶提纯了 14 5倍 ,比活力达 2 0 9u mg。SDS PAGE测定显示该酶亚基质量为 33 7kD。对酶特性的研究表明 :酶在pH6 0～ 9 0、6 0℃以下稳定 ,对肌酐的Km值为 2 1 14mmol L。Ag+ 、Hg2 + 和邻菲罗啉能使酶完全丧失活性 ,Co2 + 、Mn2 + 对酶活性有明显促进作用。(本文来源于《生物工程学报》期刊2005年02期）
赵更峰,王兰,顿玉慧,马晓航[7]（2005）在《产肌酐水解酶菌株的分离、鉴定及产酶条件研究》一文中研究指出研究分离到几株产肌酐水解酶的菌株,对所产酶的特性分析表明,菌株 42 1 表现较高的产酶性能且所产的酶具有高的热稳定性.对菌株42 1产酶发酵条件的研究表明,菌株 42 1 以酵母膏和玉米浆为氮源时表现较高的产酶性能,葡萄糖等容易利用的碳源的存在对酶的产生没有抑制作用.诱导物肌酐、肌酸、肌氨酸、氯化胆碱和尿素可以诱导酶的产生,Mn2+、Co2+对酶的产生有促进作用.(本文来源于《河南师范大学学报(自然科学版)》期刊2005年01期）
赵更峰[8]（2003）在《一株产肌酐水解酶菌株的分离及酶特性研究》一文中研究指出肌酐是人体代谢的一种重要产物，一般通过肾脏的代谢排出体外。在临床测定中，血清中的肌酐浓度是一项判断肾功能的重要指标。目前肌酐的测定一般是用Jaffe法进行测定，该方法是基于化学反应基础上的，特异性差，血清中许多化学物质都能干扰测定结果，给疾病的正确诊断造成了困难。而酶促的催化反应比一般化学反应具有更高的专一性，因而近年来人们寄希望于研究开发出酶促肌酐的测定方法，以提高测定结果的可靠性。 本文分离筛选到一株产肌酐水解酶的菌株42-1，经鉴定为节杆菌属，研究了菌株的产酶发酵条件、酶的提取纯化方法及酶的性质。试验结果分述如下： 1．菌株的分离筛选及鉴定：经过富集培养和划线分离纯化后，得到7株产肌酐水解酶的菌，分别为菌株42-1、42-2、30-1、A_11、SAO-C、SAO-I、SAO-S。通过产酶活性及酶热稳定性测定，菌株42-1表现较高的酶活性且所产的肌酐水解酶具有较好的热稳定性，因此确定菌株42-1为最佳产肌酐水解酶菌株。菌株42-1的形态学、生理生化及16S rRNA序列比对结果表明该菌为节杆菌(Arthrobacter sp.)。 2．菌株产酶条件：菌株42-1的最适产酶培养基为：肌酸，4g；酵母膏，7.2g；玉米浆，4.8g；葡萄糖，10g；K_2HPO_43H_2O，2g：KH_2PO_4，0.5g；MgSO_47H_2O，0.1g；KCI，0.0005g；MnCl_2，0.1g；水，1000mL；pH7.5。最适产酶条件为：培养温度20℃，100mL叁角瓶装15mL培养基，于120rpm转速下培养36h。 3．酶的提取纯化：肌酐水解酶经55℃水浴保温30min去除热不稳定蛋白后，在硫酸铵饱和度为30～50％之间大部分沉淀下来，经过DEAE-Cellulose离子交换、Toyopearl HW-65C疏水层析后，酶提纯了145倍，比活力达209U／mg。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示为一条带，SDS-PAGE测定亚基分子量为33 700Da。 4．酶的性质：酶的最适pH为7.5，最适作用温度为60℃；在pH6.0～9.0、60℃以下稳定；对肌酐和肌酸的Km值分别为21.14mmol／L，40.8mmol／L；Ag~+、Hg~(2+)和邻菲罗啉能使酶完全丧失活性，Cu~(2+)、Li~+对酶活性有明显的抑制作用，Co~(2+)、Mn~(2+)对酶活性有明显促进作用，表面活性剂Tween20和Tween80对酶 活性没有影响。(本文来源于《浙江大学》期刊2003-05-01）
肌酐水解酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
从渤海海泥中筛选出一株肌酐水解酶高产菌株S-09,经形态学、生理生化特征并结合16S rDNA系统发育分析,鉴定菌株为微小杆菌属(Exiguobacterium sp.)。对所产肌酐水解酶进行酶学性质研究表明,该酶的最适作用温度为30℃,热稳定性较差,最适作用pH值为7.5,碱性条件下,pH值稳定性较好;Co~(2+)、Mn~(2+)对酶的激活作用较强,Ag~+、Hg~(2+)对酶有显着的抑制作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肌酐水解酶论文参考文献
[1].石群,张庆芳,杨丽娜,任楠楠,乔慧.肌酐水解酶菌株S-09发酵条件优化及酶的分离纯化[J].中国酿造.2017
[2].石群,张庆芳,杨丽娜,王晓辉,窦少华.海洋肌酐水解酶菌株的筛选鉴定及其酶学性质研究[J].中国酿造.2017
[3].杨波,蒋芬,朱艳,杨成,向铁勇.肌酐水解酶基因工程菌的构建及功能研究[J].中南医学科学杂志.2016
[4].程新,刘芳,张彦新,蒋云生.尿酸氧化酶与肌酐水解酶融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].中国现代医学杂志.2013
[5].程新,张彦新,周桂凤,蒋云生.产肌酐水解酶基因工程菌的构建[J].生物医学工程研究.2009
[6].赵更峰,马晓航,贾小明,赵宇华,王园园.节杆菌肌酐水解酶的纯化及特性研究[J].生物工程学报.2005
[7].赵更峰,王兰,顿玉慧,马晓航.产肌酐水解酶菌株的分离、鉴定及产酶条件研究[J].河南师范大学学报(自然科学版).2005
[8].赵更峰.一株产肌酐水解酶菌株的分离及酶特性研究[D].浙江大学.2003