DSCM支架结合兔滑膜干细胞体外构建组织工程髓核

DSCM支架结合兔滑膜干细胞体外构建组织工程髓核

论文摘要

目的评估体外构建组织工程髓核的可行性。方法从成年新西兰大白兔体内提纯兔滑膜干细胞(synovium-derived stem cells,SDSCs),接种到预制备的脱细胞细胞外基质(decellularized stem cell matrix,DSCM)支架中。实验分为3组:分别为空白组(空白DSCM支架)、实验组(SDSCsDSCM复合体)和对照组(正常兔髓核组织)。肉眼以及光镜下观察材料和细胞的形态特征,扫描电镜(SEM)观察各组内部结构和细胞粘附情况,HE染色观察各组细胞分布情况,荧光免疫组织化学染色观察细胞外Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)蛋白表达情况,实时定量PCR(qRT-PCR)测定两组CollagenⅡ、Aggrecan相关基因的变化,压缩载荷检测各组抗压缩性能。结果肉眼下,组织工程髓核形态接近正常髓核;SEM显示细胞在支架内部粘附、生长良好;HE染色表明,随时间的延长,实验组材料内部细胞的分布逐渐均匀;免疫组化显示CollagenⅡ、Aggrecan分泌量随时间递增;qRT-PCR测定结果提示:实验组CollagenⅡ、Aggrecan mRNA表达量随时间递增,但均低于正常对照组(P <0. 05);支架的压缩载荷检测结果显示:在相同位移下,SDSCs-DSCM与正常髓核的压缩载荷差异无统计学意义。结论采用DSCM支架复合SDSCs可在体外成功构建组织工程髓核。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料和实验分组
  •   1.2 实验动物和主要试剂
  •   1.3 SDSCs的体外分离与培养
  •   1.4 SDSCs表面抗原的流式鉴定
  •   1.5 材料预处理
  •   1.6 实验组大体观察、电镜观察
  •   1.7 HE染色及免疫组化
  •   1.8 实时定量PCR (qRT-PCR) 检测
  •   1.9 压缩载荷检测
  •   1.1 0 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 SDSCs的形态观察及流式鉴定
  •   2.2 DSCM大体观、电镜观察
  •   2.3 HE染色及免疫组化观察
  •   2.4 qRT-PCR检测结果
  •   2.5 压缩载荷测定结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱水涛,闵竞,王群波,郑华,郭华

    关键词: 细胞外基质,滑膜干细胞,组织工程髓核

    来源: 第三军医大学学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,外科学,生物医学工程

    单位: 重庆医科大学附属永川医院骨科

    基金: 重庆市永川区科委资助项目(YCSTC2016nc5007)~~

    分类号: R318;R687.3

    DOI: 10.16016/j.1000-5404.201808118

    页码: 71-76

    总页数: 6

    文件大小: 3408K

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