导读:本文包含了瞬时表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:从江,受体,干扰素,羟色胺,生菜,通道,电位。
瞬时表达论文文献综述
李惠华,曾碧玉,王伟,常强,苏明华[1]（2019）在《枇杷悬浮细胞AS基因的瞬时表达载体构建与亚细胞定位》一文中研究指出枇杷(Eriobotrya japonica)细胞悬浮培养可以产生丰富的五环叁萜类化合物。香树素合成酶(amyrine synthase, AS)是叁萜合成途径中的关键酶,决定主要代谢和次生代谢的分支点。枇杷AS基因的功能未见报道。本研究以AS基因过表达质粒(p DONR207-AS)为模板,经PCR扩增获得AS基因的正向开放阅读框,经酶切及与载体的连接,成功构建表达载体p BWA(V)HS-AS-GFP-Tnos。以枇杷悬浮细胞(AS分离的同源系统)为受体材料,在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101的介导下进行瞬时表达,通过共转化的GFP在激光共聚焦显微镜下成像,分析AS蛋白的亚细胞定位;采用气相色谱-质谱联合分析AS催化产物。研究结果显示,AS在枇杷悬浮细胞中定位于内质网;枇杷悬浮细胞中AS的催化产物含α-香树素和β-香树素,AS属于多功能酶。本研究可为明确五环叁萜类化合物合成途径以及枇杷悬浮细胞的转基因应用提供参考依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年11期）
胡积祥,曹雅倩,朱秀梅,余超,田芳[2]（2019）在《基于瞬时表达系统的水稻miRNA靶基因快速验证系统的建立》一文中研究指出旨在建立一种准确且快速的基于瞬时表达系统的水稻mi RNA靶基因验证系统,为研究水稻miRNAs的生物学功能奠定基础。已有研究证实osa-miR169o剪切靶基因OsNF-YA4(LOC_Os03g48970.1)的mRNA,以此为参照,在烟草和水稻原生质体瞬时表达系统中将miR169o前体基因分别与LUC表达载体、LUC-48970和LUC-48970m3融合表达载体瞬时共表达,通过CCD活体成像和Luminometor分析了共表达后LUC活性的动态变化。利用茎环qRT-PCR对miR169o的表达水平进行分析,获得靶基因验证的适合体系。在水稻原生质体体系中,LUC活性和miR169o表达水平在原生质体转化后逐渐增高;24 h时LUC活性最高,相应miR169o表达水平上升10倍左右。综合分析,在原生质体转化后24 h-36 h为适宜检测时间段。在烟草瞬时表达体系中,农杆菌注射72 h后LUC活性最强,而miR169o的表达在48 h后即可上调20倍。因此,农杆菌注射后48 h-72 h为适宜检测时间段。本系统为水稻miRNA靶基因的验证提供了一种简便、快速,且更接近于体内真实情况的实验方法。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年10期）
王建丽,马爱群,王贺,王亭忠[3]（2019）在《比索洛尔对心衰大鼠心室肌瞬时外向钾通道蛋白表达的影响》一文中研究指出目的观察比索洛尔对容量超负荷心衰大鼠左室心肌瞬时外向钾通道(Ito)蛋白表达的影响。方法成年雄性SD大鼠(180-200 g)随机分为假手术组(n=16)、心衰组(n=20)和比索洛尔干预组(n=20),采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制作容量超负荷心衰模型。术后8周,比索洛尔干预组给予比索洛尔(1 mg/kg,1次/d)灌胃,干预4周后,检测血流动力学及血清脑钠肽(BNP)以评价心功能,采用免疫荧光染色和Western blot测定各组大鼠左室心肌Ito通道的亚型Kv1. 4、Kv4. 2、Kv4. 3的蛋白表达量。结果心衰组与假手术组大鼠比较,血流动力学状况明显下降,BNP明显升高(P <0. 01)。假手术组Kv1. 4、Kv4. 2、Kv4. 3在细胞膜及细胞浆中均表达,以Kv4. 3表达为主,心衰组Kv1. 4、Kv4. 3的蛋白表达量较假手术组明显下降(P <0. 01);比索洛尔干预可明显改善心功能及血流动力学状况,增加Kv1. 4、Kv4. 3的蛋白表达量(P <0. 01或P <0. 05)。结论比索洛尔干预可改善慢性心衰大鼠的心功能,增加Ito通道的亚型Kv1. 4、Kv4. 3的蛋白表达量。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2019年10期）
韩俊丽,田红燕,刘亚,范粉灵[4]（2019）在《5-羟色胺对肺动脉平滑肌细胞瞬时受体电位通道/活化T细胞核因子蛋白表达的影响》一文中研究指出目的观察5-羟色胺(5-HT)对肺动脉平滑肌细胞瞬时2受体电位通道(TRPC)/活化T细胞核因子(NFAT)蛋白表达的影响。方法取肺动脉平滑肌细胞,分别采用不同浓度(0μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、33μmol/L、100μmol/L)5-HT、不同浓度(0μmol/L、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、3.3μmol/L、10μmol/L)的5-HT_(2A)受体拮抗剂酮色林+10μmol/L 5-HT和不同浓度(0μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、33μmol/L、100μmol/L)的TRPC抑制剂SKF96365+10μmol/L 5-HT进行处理。24 h后,检测各组细胞中TRPC1、TRPC6和NFATc3的蛋白表达水平。结果与0μmol/L 5-HT相比,10μmol/L、33μmol/L、100μmol/L 5-HT干预后细胞中TRPC1、TRPC6、NFATc3蛋白表达水平均升高(均P<0.05)。与0μmol/L酮色林+10μmol/L 5-HT比较,1μmol/L、3.3μmol/L、10μmol/L酮色林+10μmol/L 5-HT干预后细胞中TRPC6及NFATc3蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。与0μmol/L SKF96365+10μmol/L 5-HT比较,10μmol/L、33μmol/L、100μmol/L SKF96365+10μmol/L 5-HT干预后TRPC6、NFATc3蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。结论 10～100μmol/L的5-HT均可上调肺动脉平滑肌细胞TRPC1、TRPC6和NFATc3蛋白的表达水平,且应用一定浓度的5-HT_(2A)受体拮抗剂酮色林或TRPC抑制剂SKF96365均可抑制5-HT对其中TRPC6和NFATc3蛋白的表达。(本文来源于《广西医学》期刊2019年18期）
刘立盘,钟永达,杨爱红,李彦强,余发新[5]（2019）在《杂交鹅掌楸LhARF2基因启动子的克隆及瞬时表达分析》一文中研究指出生长素响应因子(Auxin response factor, ARF)参与调控植物生长发育的多个途径。本研究利用Tail-PCR技术从杂交鹅掌楸中克隆LhARF2基因5′端上游2 637 bp序列,即pLhARF2启动子,并利用生物信息学软件PlantCARE分析其包含的调控元件,发现其含有启动子必需元件TATA-box和CAAT-box,以及压力响应、激素响应、光信号转导和代谢循环过程元件。构建pLhARF2-pCAMBIA1300:GUS植物表达载体并瞬时浸染本氏烟草叶片,利用GUS组织化学染色法鉴定烟草叶片中瞬时表达活性,发现在烟草叶片中有蓝色斑块,但颜色较浅。实验结果推测杂交鹅掌楸pLhARF2启动子可以调控GUS基因活性,为下一步研究启动子遗传转化的组织表达活性奠定了基础。(本文来源于《江西科学》期刊2019年04期）
许静,单亚楠,何豆,陈淞渝,庄炜[6]（2019）在《甘蓝型油菜SNARE蛋白SYP122叶片瞬时表达体系的建立》一文中研究指出通过生物信息学鉴定了油菜中的突触融合蛋白BnSYP122,其由一个N端syntaxin结构域、一个典型的SNARE基序及一个C端跨膜结构域组成,并且N端结构域包含被称为Ha、Hb、Hc基序的3个α-螺旋束.进一步利用Gateway技术成功将目的蛋白构建于植物表达载体pEarleyGate 104上,与带有绿色荧光蛋白的pEGAD分别转化农杆菌GV3101菌株,采用农杆菌介导的真空渗透法在油菜叶片中进行瞬时表达.经激光共聚焦显微镜观察和Western blot检测表明,农杆菌介导的真空渗透法能够在油菜叶片中成功表达目的蛋白,同时验证了BnSYP122定位在细胞膜上.(本文来源于《福建农林大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
田浪,温贵兰,张升波,杨佰启,李昌红[7]（2019）在《从江香猪源干扰素α2、β在生菜中的瞬时表达及其对PRRSV复制抑制作用的研究》一文中研究指出为在生菜中瞬时表达从江香猪源IFN-α2、IFN-α2β和IFN-β,检测其抗猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)的活性,本实验采用从江香猪源干扰素特异引物分别从p UCm-CJpoIFN-α2、p UCm-CJpoIFN-α2β、p UCm-CJpoIFN-β质粒中扩增IFN-α2、IFN-α2β、IFN-β基因序列,分别克隆至植物表达载体p BI121中,构建含不同干扰素的重组质粒。将各质粒分别转化根癌农杆菌LBA4404,采用真空渗透法将携带重组质粒的根癌农杆菌感染生菜,经用GUS染色和ELISA方法检测从江香猪源干扰素在生菜叶片中的表达;用q PCR方法和细胞病变抑制试验检测生菜中表达的从江香猪源干扰素蛋白抗PRRSV的活性。结果显示:本实验构建了含从江香猪源IFN-α2、IFN-α2β、IFN-β的植物表达载体PBI121-IFN-α2、PBI121-IFN-α2β、PBI121-IFN-β;GUS染色和ELISA检测结果显示从江香猪源IFN-α2、IFN-α2β、IFN-β在生菜中实现了瞬时表达;q PCR检测结果显示生菜中瞬时表达的从江香猪源干扰素蛋白在Marc145细胞中对PRRSV的复制有明显抑制作用;生菜中表达的从江香猪源IFN-α2、IFN-β、IFN-α2β分别经4~7、4~9、4~7稀释在Marc145细胞中仍然能够抑制100 TCID_(50)PRRSV的致细胞病变作用。本实验实现从江香猪源IFN-α2、IFN-α2β、IFN-β在生菜中的瞬时表达且表达蛋白具有较强抑制PRRSV的复制作用,本研究为从江香猪源干扰素抗PRRSV新复合型药物蛋白的开发利用提供参考依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年07期）
白丽娟,刘薇,王志莉,王文婷,吴存祥[8]（2019）在《大豆GmbZIP33基因启动子的克隆及瞬时表达分析》一文中研究指出启动子作为基因调控的重要元件,决定着下游基因表达的时空和强度特性。为研究大豆GmbZIP33基因启动子功能,在前期克隆获得GmbZIP33基因(Glyma.03G219300.1)序列的基础上,通过N-PCR(nested PCR)技术克隆了GmbZIP33 CDS上游启动子区序列(2 316 bp)。利用PlantCARE在线分析软件进行顺式作用元件的预测,发现该序列上除含有TATA-box和CAAT-box等核心调控元件外,同时包括与抗逆、光响应、激素响应、蔗糖应答元件和多个与组织特异性表达相关的元件。为研究GmbZIP33启动子的表达调控特性,构建了该启动子调控报告基因GUS表达的载体,并利用农杆菌介导的花序浸染法将其转入拟南芥中,发现该启动子驱动下的GUS基因在不同组织(莲座叶、花、荚果和根)的维管束中均特异性表达;对转基因拟南芥进行实时荧光定量PCR检测发现,GUS基因在花中表达量最高,荚果中次之,表明GmbZIP33基因可能受到多种因素和蔗糖的调节并参与花荚发育的调控。(本文来源于《大豆科学》期刊2019年04期）
田浪,温贵兰,张升波,杨佰启,李昌红[9]（2019）在《从江香猪源干扰素γ植物表达载体构建及在生菜中瞬时表达》一文中研究指出为构建从江香猪源干扰素γ(IFNγ)植物表达载体,通过农杆菌真空渗透法在新鲜生菜中实现瞬时表达。参考GenBank登录的猪IFNγ基因序列设计1对特异性IFNγ引物,采用RT-PCR方法从贵州从江香猪源肝脏组织扩增IFNγ基因序列,将其克隆至植物表达载体PBI121,转化根癌农杆菌LBA4404,筛选阳性菌株提取质粒,对重组质粒进行PCR扩增、双酶切及测序鉴定;携带重组质粒根癌农杆菌真空渗透法感染生菜,GUS染色检测感染的生菜叶片,ELISA检测感染生菜叶片中从江香猪源IFNγ蛋白,分析重组质粒在生菜中表达效果;采用细胞病变抑制实验检测生菜中从江香猪源IFNγ蛋白抗病毒活性。结果表明:本研究成功地从贵州从江香猪源肝脏组织扩增获得IFNγ基因序列并构建了从江香猪源IFNγ植物表达载体PBI121-IFNγ;GUS染色感染的生菜叶片可见蓝色物质;ELISA检测感染生菜叶片中从江香猪源IFNγ蛋白含量为169.397、170.657、170.37pg/mL;生菜中表达从江香猪源IFNγ经4-6稀释在Marc145细胞上仍能够抑制100 TCID50的PRRSV的致细胞病变作用。本实验成功构建从江香猪源IFNγ植物表达载体PBI121-IFNγ,生菜中瞬时表达蛋白具有免疫反应性和抗病毒活性,为从江香猪源IFNγ药用植物蛋白的研究开发提供参考依据。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2019年07期）
肖俊,傅晓冬[10]（2019）在《重度子痫前期孕妇脐动脉血管平滑肌中经典瞬时受体电位通道6的表达》一文中研究指出目的探索人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical arterial smooth muscle cells,HUASMCs)中瞬时受体电位通道6 (transient receptor potential canonical 6,TRPC6)与重度子痫前期的关系,为发现新型治疗方法提供基础理论依据。方法选取西南医科大学附属医院2018年4-11月产科住院病人经阴道分娩或剖宫产分娩的10例重度子痫前期孕妇为病例组,并匹配同期产科住院的10例健康产妇作为对照组;取分娩后的任意段脐动脉血管,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR experiment,QPCR)与蛋白免疫印迹技术(Western blotting)测量TRPC6的表达。结果 QPCR结果显示,正常孕妇组HUASMCs的TRPC6相对表达量为9.583±0.913,重度子痫前期孕妇组HUASMCs的TRPC6相对表达量为8.447±0.982,两组差异有统计学意义(P=0.003)。Western blotting结果也显示正常孕妇组HUASMCs的TRPC6表达显着低于重度子痫前期孕妇组(P <0.001)。结论重度子痫前期孕妇组HUASMCs中TRPC6的mRNA及蛋白表达水平均高于正常孕妇组,提示重度子痫前期的发病可能与TRPC6的表达上调相关。(本文来源于《解放军医学院学报》期刊2019年07期）
瞬时表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
旨在建立一种准确且快速的基于瞬时表达系统的水稻mi RNA靶基因验证系统,为研究水稻miRNAs的生物学功能奠定基础。已有研究证实osa-miR169o剪切靶基因OsNF-YA4(LOC_Os03g48970.1)的mRNA,以此为参照,在烟草和水稻原生质体瞬时表达系统中将miR169o前体基因分别与LUC表达载体、LUC-48970和LUC-48970m3融合表达载体瞬时共表达,通过CCD活体成像和Luminometor分析了共表达后LUC活性的动态变化。利用茎环qRT-PCR对miR169o的表达水平进行分析,获得靶基因验证的适合体系。在水稻原生质体体系中,LUC活性和miR169o表达水平在原生质体转化后逐渐增高;24 h时LUC活性最高,相应miR169o表达水平上升10倍左右。综合分析,在原生质体转化后24 h-36 h为适宜检测时间段。在烟草瞬时表达体系中,农杆菌注射72 h后LUC活性最强,而miR169o的表达在48 h后即可上调20倍。因此,农杆菌注射后48 h-72 h为适宜检测时间段。本系统为水稻miRNA靶基因的验证提供了一种简便、快速,且更接近于体内真实情况的实验方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
瞬时表达论文参考文献
[1].李惠华,曾碧玉,王伟,常强,苏明华.枇杷悬浮细胞AS基因的瞬时表达载体构建与亚细胞定位[J].农业生物技术学报.2019
[2].胡积祥,曹雅倩,朱秀梅,余超,田芳.基于瞬时表达系统的水稻miRNA靶基因快速验证系统的建立[J].生物技术通报.2019
[3].王建丽,马爱群,王贺,王亭忠.比索洛尔对心衰大鼠心室肌瞬时外向钾通道蛋白表达的影响[J].山西医科大学学报.2019
[4].韩俊丽,田红燕,刘亚,范粉灵.5-羟色胺对肺动脉平滑肌细胞瞬时受体电位通道/活化T细胞核因子蛋白表达的影响[J].广西医学.2019
[5].刘立盘,钟永达,杨爱红,李彦强,余发新.杂交鹅掌楸LhARF2基因启动子的克隆及瞬时表达分析[J].江西科学.2019
[6].许静,单亚楠,何豆,陈淞渝,庄炜.甘蓝型油菜SNARE蛋白SYP122叶片瞬时表达体系的建立[J].福建农林大学学报(自然科学版).2019
[7].田浪,温贵兰,张升波,杨佰启,李昌红.从江香猪源干扰素α2、β在生菜中的瞬时表达及其对PRRSV复制抑制作用的研究[J].中国预防兽医学报.2019
[8].白丽娟,刘薇,王志莉,王文婷,吴存祥.大豆GmbZIP33基因启动子的克隆及瞬时表达分析[J].大豆科学.2019
[9].田浪,温贵兰,张升波,杨佰启,李昌红.从江香猪源干扰素γ植物表达载体构建及在生菜中瞬时表达[J].中国畜牧杂志.2019
[10].肖俊,傅晓冬.重度子痫前期孕妇脐动脉血管平滑肌中经典瞬时受体电位通道6的表达[J].解放军医学院学报.2019
论文知识图
