导读:本文包含了免疫保护力论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:免疫,突变,疫苗,蛋白,毒素,毒力,布鲁氏菌。
免疫保护力论文文献综述
彭小薇,吴方达,刘郁夫,董浩,孙永健[1]（2019）在《牛种布鲁氏菌clpP基因缺失株的毒力和免疫保护力评价》一文中研究指出为研究布鲁氏菌clpP基因与细菌毒力的关系,采用同源重组的方法,构建牛种布鲁氏菌clpP基因缺失株,用巨噬细胞RAW264.7感染模型和小鼠感染模型评价clpP基因缺失株的毒力,同时测定该缺失株免疫小鼠后产生的免疫保护力。研究发现:牛种布鲁氏菌clpP基因缺失后,在细胞感染模型和小鼠感染模型中的毒力显着降低;clpP基因缺失株感染小鼠后,不引起脾脏肿胀,并且在脾脏内的持续期短于A19疫苗株,说明该基因缺失株具有更高的安全性;使用clpP基因缺失株免疫小鼠后,该基因缺失株无法抵御牛种布鲁氏菌2308株和羊种布鲁氏菌M28株的感染。本研究为揭示布鲁氏菌致病机制和新型布病疫苗研发提供了参考。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年11期）
徐晶,万加武,王骞若,张艳妮,郭韫丽[2]（2019）在《乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1截短突变体的原核表达及其免疫保护力分析》一文中研究指出乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1具备免疫原性,且可诱导免疫保护力。但是,全长NS1蛋白在大肠杆菌中表达量不高。为了获得在大肠杆菌中稳定高效表达的NS1抗原,本研究构建删除NS1蛋白C端两个强疏水区的截短突变体NS1_(△63)的重组表达载体pET28a-NS1_(△63),转化大肠杆菌,IPTG诱导。SDS-PAGE和Western blotting分析表明NS1_(△63)在大肠杆菌中能够高效且稳定表达。Ni柱纯化NS1_(△63),免疫BALB/c小鼠2次,3周后,ELISA检测NS1抗血清效价达到1:12150。免疫小鼠的保护力试验表明NS1_(△63)有保护活性。因此,本研究制备的NS1_(△63)蛋白有较好的临床应用前景。(本文来源于《华东六省一市生物化学与分子生物学会联盟2019年学术与教学交流会摘要集》期刊2019-07-12）
范琳琳[3]（2019）在《十二指肠贾第虫γ和δ贾第素DNA疫苗免疫保护力评价》一文中研究指出十二指肠贾第虫(Giardia duodenalis,简称贾第虫)是一种常见的厌氧原生动物病原体,广泛引起多种哺乳动物产生胃肠道疾病。贾第虫能够导致腹泻、胀气、消瘦、大便油腻恶臭等症状,并且可能引发慢性疾病和肠道外并发症。随着现代生物技术的不断的创新发展,贾第虫的基因疫苗(DNA疫苗)作为一种可能应用于防治贾第虫病的重要方式,其相关研究也受到了越来越多人的关注。DNA疫苗目前在动物模型上能够成功地预防和治疗各种疾病,具有稳定,方便和安全的特点,并且能够引发机体产生细胞和体液免疫应答反应,能够完善婴儿的抗体应答。pcDNA3.1质粒是一种哺乳动物细胞表达载体,在真核表达载体构建中已被广泛应用,适用于DNA疫苗的开发。CpG序列可诱导强烈的Th1样应答,可作为疫苗的佐剂,抵抗各种目标,包括感染性物质,肿瘤抗原,过敏原等。贾第素(giardin)是组成贾第虫细胞骨架蛋白的重要元素,目前确定的贾第素为α、β、γ和δ-giardin。有关研究表明α和β-giardin分子均具有较高的免疫原性,γ-giardin为38 kDa的蛋白质,也许是微丝带的成分之一。δ-giardin在分子水平上的研究取得了进展,但目前关于它的具体定位还是未知的。α1-giardin是研制贾第虫病疫苗的有效蛋白,这为我们的对贾第素家族的另外两种重要成员γ和δ-giardin的DNA疫苗研究提供了依据。本研究旨在构建贾第虫γ和δ-giardin基因的DNA疫苗,评价其抗贾第虫的免疫保护力。因此,本研究通过RT-PCR扩增得到了截短的γ和δ-giardin基因,将得到的γ和δ-giardin基因连接到真核表达载体pcDNA3.1,并且成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin,进而将他们转染到Vero细胞内并利用间接免疫荧光和Western Blot技术对重组质粒体外表达进行鉴定,然后将真核表达重组质粒肌肉注射入BALB/c小鼠体内进行叁次接种免疫,将接种pcDNA3.1空载体的小鼠作为对照组。分别于叁次免疫之后采集小鼠血清,利用ELISA技术检测血清中的IgG及其亚型IgG1、IgG2a的抗体水平。第叁次免疫之后,利用CCK-8进行脾淋巴细胞增殖实验,并用ELISA技术检测经贾第虫可溶性抗原刺激脾淋巴细胞而产生的细胞因子IFN-γ和IL-4,利用流式细胞术检测脾淋巴细胞中的CD3~+CD4~+CD8~-和CD3~+CD8~+CD4~-T细胞百分比含量。利用贾第虫包囊接种小鼠,对接种后16 d的粪便进行包囊计数。结果显示,pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin成功转染至Vero细胞中并成功表达。接种了叁种真核表达质粒的小鼠产生了特异性的体液和细胞反应,与对照组相比IgG和IgG2a抗体水平显着提高。pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin免疫组的SI值与对照组相比有显着的提升,分别为1.09±0.022,1.07±0.021,1.05±0.023。CD3+CD4+CD8-和CD3+CD8+CD4-T细胞百分比显着提高,CD4~+T细胞百分比分别为23.65±0.78,23.20±0.99,21.25±0.64;CD8~+T细胞百分比分别为10.90±0.99,11.80±1.27,9.90±0.57。接种了pcDNA3.1-γ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin的细胞因子IL-4和IFN-γ显著提高,接种pcDNA3.1-δ-giardin免疫组的IFN-γ水平显著提高。攻虫实验结果显示,接种pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin基因疫苗的小鼠的减虫率分别为39.1%、26.1%和18.3%。本实验成功构建了真核重组表达载体pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin,并评价其引起小鼠产生的免疫保护效果。上述结果表明pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin能够诱导小鼠产生一定水平的体液免疫应答和细胞免疫应答,并在机体对抗贾第虫感染时产生一定的免疫保护力。该研究结果为进一步研发贾第虫DNA疫苗提供了理论基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01）
范琳琳,朱伟宁,石东东,杨萱桐,李晓云[4]（2019）在《十二指肠贾第虫γ贾第素和δ贾第素基因疫苗的构建及其免疫保护力的评价》一文中研究指出为了评估贾第虫γ贾第素(γ-giardin)和δ贾第素(δ-giardin)的免疫原性及免疫保护力,构建了截短型真核表达质粒pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin,并将这3种质粒肌肉注射到BALB/c小鼠体内,通过血清抗体测定、脾淋巴细胞增殖试验、淋巴细胞检测、细胞因子测定和攻虫试验评价疫苗的免疫保护力。结果显示,接种了这3种真核表达质粒的小鼠产生了特异性的体液和细胞反应,与对照组相比,Ig G和Ig G2a抗体水平显着提高,并且CD3~+CD4~+CD8~-和CD3~+CD8~+CD4~-T细胞百分比显着提高, pcDNA3.1-γ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin免疫组的细胞因子IL-4和IFN-γ水平显著提高, pcDNA3.1-δ-giardin免疫组的IFN-γ水平显著提高。攻虫试验结果显示,接种pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin基因疫苗的小鼠的减虫率分别为39.1%、26.1%和18.3%,单一DNA(γ-giardin或δ-giardin)质粒和多基因DNA(γ-δ-giardin)质粒均可以诱导小鼠产生一定的免疫保护力。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年08期）
杜吉革,薛麒,朱真,李启红,印春生[5]（2019）在《产气荚膜梭菌α毒素突变体的表达及免疫保护力评价》一文中研究指出对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56和130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变,经人工合成获得基因片段Gcpam4。将Gcpam4克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rCPAm4。利用Western blot方法检测rCPAm4与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清的反应性,并采用小鼠检测纯化蛋白的毒力。随后,将rCPAm4与Montanide ISA 201佐剂以1∶1的比例混合乳化制备疫苗,免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测兔血清的中和抗体效价。二免后21d,对家兔通过耳缘静脉注射1个家兔MLD剂量的A型产气荚膜梭菌毒素,以检测rCPAm4对家兔的免疫保护效果。结果表明,rCPAm4主要以包涵体的形式表达,且能与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清反应;小鼠安全性试验显示,5.5mg/kg剂量的rCPAm4对小鼠仍无致死性;免疫rCPAm4后,每毫升的一免抗血清可中和10～20个小鼠MLD、二免抗血清可中和30～50个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔100%死亡,免疫组家兔得到了100%的保护。以上结果表明,rCPAm4具有良好的安全性和免疫原性,从而为A型产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年02期）
周远成,张冰,李碧[6]（2019）在《猪伪狂犬病活疫苗(SA215株,扑伪优)对新流行伪狂犬病病毒具有良好的免疫保护力》一文中研究指出2011年至今,全国范围内的猪伪狂犬病暴发后,国内学者分离到大量新毒株,如HeN1及TJ株。基因组分析结果表明,新毒株与以往分离的PRV毒株相比存在转换、插入和缺失变异的特点。实验结果证实SA215对伪狂犬病经典毒株和新流行毒株均具有优异的免疫保护能力,能有效保护猪只免受猪伪狂犬病野毒的感染。(本文来源于《今日养猪业》期刊2019年01期）
郭筱璐,杨怡,陈学秋,杜爱芳[7]（2018）在《捻转血矛线虫Hc-DHS-28重组蛋白对绵羊的免疫保护力研究》一文中研究指出为了筛选新型疫苗候选因子,本研究通过RACE方法扩增获得捻转血矛线虫发育相关基因Hc-dhs-28,通过pET-30 a/E.coli BL 21原核表达系统对其进行原核表达,并以该重组蛋白对绵羊进行免疫保护性试验。结果表明,该基因全长cDNA序列为1317 bp,预测其具有短链脱氢酶活性,Western Blot鉴定证明成功获得纯化的重组蛋白。将24只羊随机分成4组,每组6只,分栏饲养并记录栏号与耳标。所有实验羊用伊维菌素驱虫,两周后进行粪便镜检,确定其中不含有任何线虫虫卵后才可开始实验。以完全弗氏佐剂1mL 1:1混合纯化鉴定后的重组蛋白(0.5 mg/只),于羊后肢皮下进行注射免疫,非免疫组在同样位置注射等量PBS缓冲液。首免后两周以同样剂量重组蛋白(不完全弗氏佐剂1:1乳化)进行二次免疫。二免后两周,攻虫组每只羊经口感染5000条捻转血矛线虫L3期感染性幼虫。试验结果显示首次免疫该蛋白一周后即可见抗体水平显着升高,在二免后两周达到最高值,攻虫后抗体水平也一直处于较高水平,说明该蛋白具有良好的免疫原性;攻虫组较不攻虫组体重明显下降,但免疫攻虫组体重显着大于不免疫攻虫组,免疫后对宿主体重损失的保护效果明显;免疫攻虫组排卵高峰较不免疫攻虫组显着提前,排卵总量及幼虫孵化率没有显着差异;免疫攻虫组虫荷较不免疫攻虫组雌虫减少38.21%,雄虫减少14.94%,同时雌虫体长显着缩短。以上结果显示,Hc-dhs-28重组蛋白具有较好的免疫原性并且免疫绵羊后能够显着减弱宿主感染捻转血矛线虫后的体重损失,并能显着降低宿主体内的虫荷量,使排卵高峰期显着提前,缩短雌虫的体长,这些均表明该蛋白免疫后对宿主具有较好的免疫保护效力,是一种潜在的疫苗候选因子。(本文来源于《浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会论文汇编》期刊2018-11-16）
杜吉革,朱真,薛麒,赵俊杰,彭小兵[8]（2018）在《重组产气荚膜梭菌α毒素突变体的表达与免疫保护力评价》一文中研究指出为获得产气荚膜梭菌α毒素(CPA)的重组突变体,并评价其毒力和免疫原性,对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56位和第130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变。此外,在该基因5'端添加Th细胞表位(T)和鞭毛蛋白(flagellin)N末端编码序列,经人工合成获得基因片段GTFNCPAm4。将GTFNCPAm4克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rTF_NCPA_(m4)。利用Western blot方法检测rTF_NCPA_(m4)与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清的反应性,并检测该蛋白的卵磷脂酶和溶血活性以及对小鼠的毒力。随后,将重组蛋白与Montanide ISA 201佐剂以1∶1(V/V)的比例混合乳化,免疫家兔,检测兔血清的中和抗体效价。二免后21 d,对家兔通过耳缘静脉注射1个MLD剂量的A型产气荚膜梭菌毒素,以检测rTF_NCPA_(m4)对家兔的免疫保护效果。结果表明,rTF_NCPA_(m4)主要以包涵体的形式表达,且能与A型产气荚膜梭菌毒素产生血清反应;体外实验显示,rTF_NCPA_(m4)无卵磷脂酶和溶血活性;小鼠安全性实验显示,5.5 mg/kg剂量的rTF_NCPA_(m4)对小鼠无致死性;免疫重组蛋白后,每毫升的一免抗血清可中和10个MLD、二免抗血清可中和40个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔得到了100%(4/4)的保护。以上数据说明,表达的CPA重组突变体蛋白具有良好的安全性和免疫原性,为A型产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的实验数据。(本文来源于《中国兽药杂志》期刊2018年09期）
杨婷婷,黄复深,张雨龙,张宇航,李宏[9]（2018）在《重组猪胸膜肺炎放线杆菌NLPI蛋白诱导小鼠抗攻击感染的免疫保护力研究》一文中研究指出猪传染性胸膜肺炎(porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是猪(Sus scrofa)的一种呼吸道疾病,影响世界养猪业,其病原菌为猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP),现有疫苗由于保护效果不甚理想,因此有必要寻找新的疫苗候选分子。本研究检测了猪APP重组NLPI蛋白(recombinant NLPI,rNLPI)的免疫保护作用。根据Gen Bank中已报道的APP nlpi基因序列设计引物对,然后以APP的基因组为模板PCR扩增nlpi基因,测序后进行生物信息学分析,发现该基因(Gen Bank No.:MH027649)由900 bp组成,编码1个含299个氨基酸的蛋白质,为一外膜脂蛋白,此外膜蛋白在多种APP血清型之间具有很高同源性。将nlpi基因亚克隆至p ET32a(+)载体,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达APP rNLPI,并经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDSPAGE)和蛋白质印迹(Western blot,WB)确认。结果表明,在34 k D处有特异性条带,可被相应的阳性血清识别。动物保护实验采用BALB/c小鼠(Mus musculus)进行,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)用于测定免疫球蛋G(immunoglobulin G,IgG)抗体滴度。结果表明,弗氏不完全佐剂+50μg rNLPI、弗氏不完全佐剂+30μg rNLPI、弗氏不完全佐剂+10μg rNLPI、30μg rNLPI免疫后,可诱导小鼠分别产生40%、20%、10%和20%的存活率;佐剂组和生理盐水对照组存活率为0。幸存小鼠慢慢恢复健康,并正常采食。可见,rNLPI皮下免疫可诱导小鼠产生免疫应答和较高的抗攻击感染的免疫保护力。该研究结果为进一步筛选猪传染性胸膜肺炎分子疫苗积累了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2018年08期）
杜吉革,彭小兵,张秀坤,朱真,薛麒[10]（2018）在《产气荚膜梭菌ε毒素突变体的表达及免疫保护力评价》一文中研究指出为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETXH106P。将GETXH106P克隆至原核表达载体p ET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白r ETXH106P。利用Western blot方法检测r ETXH106P与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将r ETXH106P与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果表明,r ETXH106P为可溶性表达,通过灰度扫描,其可溶性表达量比例可达30%;该重组蛋白能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;细胞毒性试验结果显示,100μg/m L的重组蛋白仍无细胞毒性;小鼠安全性实验结果显示,6.25×106ng/kg剂量的重组蛋白对小鼠仍无致死性;每毫升的一免抗血清可中和450~700个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和3000~4000个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1 MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。以上结果表明,产气荚膜梭菌r ETXH106P重组蛋白毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。(本文来源于《中国兽药杂志》期刊2018年06期）
免疫保护力论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1具备免疫原性,且可诱导免疫保护力。但是,全长NS1蛋白在大肠杆菌中表达量不高。为了获得在大肠杆菌中稳定高效表达的NS1抗原,本研究构建删除NS1蛋白C端两个强疏水区的截短突变体NS1_(△63)的重组表达载体pET28a-NS1_(△63),转化大肠杆菌,IPTG诱导。SDS-PAGE和Western blotting分析表明NS1_(△63)在大肠杆菌中能够高效且稳定表达。Ni柱纯化NS1_(△63),免疫BALB/c小鼠2次,3周后,ELISA检测NS1抗血清效价达到1:12150。免疫小鼠的保护力试验表明NS1_(△63)有保护活性。因此,本研究制备的NS1_(△63)蛋白有较好的临床应用前景。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫保护力论文参考文献
[1].彭小薇,吴方达,刘郁夫,董浩,孙永健.牛种布鲁氏菌clpP基因缺失株的毒力和免疫保护力评价[J].中国动物检疫.2019
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论文知识图
