导读:本文包含了逆向转运蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,液泡,基因,蓖麻,西伯利亚,信息学,生物。
逆向转运蛋白论文文献综述
张丽雪,王晓宇,李平,李惠根,丛娇娇[1](2019)在《蓖麻Na~+/H~+逆向转运蛋白基因NhaD克隆与表达载体构建》一文中研究指出为发掘耐盐相关基因,以蓖麻叶片为材料,设计特异性引物,克隆蓖麻Na~+/H~+逆向转运蛋白基因(NhaD),并对该序列进行生物信息学分析。结果表明,NhaD全长1 743 bp,可编码580个氨基酸。将其命名为Rc NhaD。其编码蛋白的分子量为61.821 kD,等电点(pI)值6.74。利用DNAMAN软件对该序列与其它植物氨基酸序列进行同源性比对,结果显示与木薯等植物的同源性在85%以上,该蛋白含有ArsB蛋白的功能域,属于ArsB/NhaD转运蛋白家族成员。对其二级结构分析显示该蛋白为疏水性蛋白,该蛋白具有11个跨膜区域,是典型的跨膜蛋白。根据Rc NhaD全长设计带有KpnⅠ与XbaⅠ酶切位点的引物扩增出序列全长,用KpnⅠ与XbaⅠ进行双酶切后与表达载体pCG-1301连接,成功构建了Rc NhaD的表达载体。本研究为进一步研究该基因功能提供指导。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年07期)
王艳红,刘艳双,石德喜,朱保国,吕保磊[2](2018)在《新型YdjM超家族成员的钠/氢逆向转运蛋白功能鉴定》一文中研究指出在原核生物中,钠/氢逆向转运蛋白具有催化细胞内的Na~+、Li~+或K~+等碱基阳离子的排出,换取外部质子,以降低有毒碱性金属阳离子的细胞质浓度和维持细胞内pH稳态起到了至关重要的作用。为了进一步挖掘中度嗜盐菌Halobacillus Y5中具有盐碱耐受性的钠/氢逆向转运蛋白基因并对其功能进行鉴定,我们首先提取该菌的基因组DNA,然后采用Sau3AI随机酶切及功能互补的方法获得了一个新型的钠/氢逆向转运蛋白基因Ha_ydjM。生物信息学分析表明,该基因属于YdjM超家族成员,是一个未知功能的膜蛋白,系统发育分析证实,其与来自Halobacillus sp. Marseille-P 3789的YdjM(蛋白登录号WP_101846656. 1)家族成员聚在一起但形成独立分支。研究发现,该基因能够恢复大肠杆菌突变株KNabc对0. 2mol/L NaCl和5mmol/L Li Cl的耐受特性,并且耐受碱性pH 8. 0。功能分析显示,该蛋白呈现pH依赖的钠/氢逆向转运蛋白活性,转运动力学分析表明,Na~+、K~+、Li~+在KNabc中K_m值分别是0. 43±0. 05mmol/L、0. 49±0. 06mmol/L、0. 64±0. 06mmol/L,即对Na~+、K~+、Li~+的亲和力分别是Na~+> K~+> Li~+。综上所述,Ha_ydjM代表了一种新型的钠/氢逆向转运蛋白,这丰富了YdjM超家族成员,并为其他未知膜蛋白功能分析提供依据。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年12期)
陈江飞,余津铭,杨建坤,余有本,肖斌[3](2018)在《茶树Na~+/H~+逆向转运蛋白基因CsNHX1、CsNHX2的克隆及表达分析》一文中研究指出Na~+/H~+逆向转运蛋白(Na~+/H~+antiporter,NHX)在植物生长发育与逆境响应过程中扮演着重要角色。本研究以龙井长叶茶树品种为材料,克隆获得了茶树CsNHX1和CsNHX2基因cDNA全长序列,GeneBank登录号分别为:MG722977和MG515211。生物信息学分析结果显示,CsNHX1和CsNHX2的cDNA全长分别为1 691 bp和1 757 bp,均包含1个1 626 bp的开放阅读框,编码541个氨基酸,预测分子量为59.5 kD和59.7 kD,理论等电点为7.07和8.79;蛋白序列分析结果显示,CsNHX1和CsNHX2属于典型的跨膜蛋白,均含有保守的Na~+/H~+Exchanger结构域;进化树分析显示,CsNHX1和CsNHX2均为IC类中定位于液泡膜上的Class I成员。qRT-PCR结果显示,干旱、低温和盐胁迫能够显着诱导CsNHX1和CsNHX2上调表达;外源ABA处理下,CsNHX1和CsNHX2表达水平整体变化趋势不显着;高温胁迫处理下,茶树CsNHX1表达水平显着降低,而CsNHX2表达水平逐渐增加,表明茶树CsNHX1和CsNHX2参与了茶树对多种环境胁迫的响应过程,但对于不同逆境胁迫的应答模式存在一定差异。(本文来源于《茶叶科学》期刊2018年06期)
耿新,楼静,鄂一岚,铁英,马颖聪[4](2018)在《西伯利亚白刺质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因NsSOS1的分离及表达分析》一文中研究指出采用同源克隆技术分离了西伯利亚白刺(Nitraria sibirica)质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因NsSOS1,并对其在不同胁迫条件下的表达特性进行了分析。NsSOS1包含3 516bp开放阅读框(ORF),编码1 171个氨基酸,蛋白分子量为128.34kD。生物信息学分析显示,NsSOS1包含12个跨膜结构域,具有植物SOS1蛋白的保守结构域。系统发育分析表明,NsSOS1与其他植物质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白处于同一个次级分化群,与锦葵科海滨锦葵KvSOS1亲缘关系较近。实时荧光定量RT-PCR分析显示,NsSOS1基因在西伯利亚白刺的根和叶中表达量较高;其表达受到非生物胁迫(NaCl、低温、干旱)和外源激素(MeJA和GA)的诱导,表明NsSOS1基因在西伯利亚白刺抵御逆境胁迫过程中发挥重要作用。(本文来源于《西北植物学报》期刊2018年08期)
伍国强,焦琦,刘海龙,蔺丽媛[5](2018)在《甜菜液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白BvNHX基因RNAi载体构建及遗传转化》一文中研究指出液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白介导的Na+区域化在植物适应盐胁迫中起着重要作用。本研究以甜菜(Beta vulgaris L.)叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因BvNHX的靶片段,以中间载体pHANNIBAL和表达载体pART27为基础,采用酶切和连接的方法,构建CaMV 35S启动子驱动的含BvNHX基因片段反向重复序列的RNAi植物表达载体pARB,通过冻融法将其导入根癌农杆菌GV3101,并转入甜菜幼苗获得BvNHX-RNAi转化株系。半定量RT-PCR分析结果表明该干扰载体能特异性地导致转化植株BvNHX基因表达的沉默。这将为解析BvNHX在甜菜体内Na+区域化中的功能及其在甜菜适应盐渍生境中的作用机制提供帮助。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年18期)
黄艳华[6](2018)在《褪黑素和液泡膜Na~+(K~+)/H~+逆向转运蛋白调控柳枝稷耐盐机制研究》一文中研究指出柳枝稷是目前最具发展潜力的能源植物之一,通过遗传改良提高其耐盐性,有助于实现其在边际土地上的规模化种植,促进我国生物质能源产业的发展。褪黑素和液泡膜Na+(K+)/H+逆向转运蛋白(NHX)在植物耐盐育种中发挥着重要作用。本研究对褪黑素和NHX调控柳枝稷的耐盐机制进行了探讨,研究结果如下:(1)将羊褪黑素合成关键酶基因(oAANAT、oHIOMT)导入柳枝稷,获得了内源褪黑素含量显着增加的转基因植株。表型分析发现,转基因植株的株高显着高于野生型(WT),且提前抽穗,表明褪黑素可以促进植物生长发育;盐胁迫下,转基因植株的表型、生物量以及抗逆生理指标均明显优于WT,并且能够维持较高的K+含量和较低的Na+含量,表明褪黑素提高了植物耐盐性,且与Na+和K+的动态平衡有关。另外,转基因植株的气孔开张度和叶绿素含量也显着高于WT,表明褪黑素促进了柳枝稷在盐胁迫下的光合作用。(2)对转oAANAT和oHIOMT基因柳枝稷进行了转录组和蛋白组分析发现:oAANAT基因过表达主要影响植物光合作用通路,oHIOMT基因过表达主要影响了次生代谢物的合成与代谢;转基因植株中,APL3,SL1,FT1等开花相关基因显着上调,且FT1基因的表达受CO等光周期基因的调控,表明褪黑素通过调节光周期途径调控花器官的形成和促进开花;GO分析发现差异表达基因(DEGs)主要参与Na+跨膜转运蛋白活性和钾通道活性等分子生物学过程,且主要富集在液泡膜,对液泡膜上PvNHX1基因的表达水平进行分析发现,转基因植株的基因表达量显着高于对照。因此,褪黑素提高植物耐盐性与其诱导了NHX1基因的表达有关。(3)为研究NHX1对Na+和K+的调控机制,从柳枝稷中克隆到了PvNHX1基因。亚细胞定位发现该基因编码的蛋白位于液泡膜;PvNHX1基因在柳枝稷不同发育时期、不同组织中均可表达,且受到盐胁迫的显着诱导;PvNHX1基因过表达显着促进了植物的生长和发育,并提高了植物的耐盐性;此外,转基因植株中同样表现出较高水平的K+和较低水平的Na+。表明,柳枝稷的PvNHX1蛋白主要作为K+/H+逆向转运蛋白发挥作用。(4)对PvNHX1过表达植株进行了转录组分析发现:与K+运输相关的HKT、KCO2、HAK27和HAK5等基因的表达量均显着上调,表明PvNHX1过表达增加了柳枝稷对K+吸收和转运的亲和性,并通过K+区隔化来增加植物耐盐性;PvNHK1基因通过诱导光合和细胞增殖相关基因的表达来促进植物的生长,并通过上调花粉发育相关基因的表达促进柳枝稷花粉的发育;此外,PvNHX1基因过表达还显着上调了与抗病相关的基因,并通过Ca2+信号传导、磷脂酰肌醇信号传导等多种途径来提高植物对病害的抗性。本研究首次揭示了oAANAT oHIOMT和PvNHX1和在柳枝稷中的功能及分子机制,研究结果进一步完善了褪黑素和NHX蛋白的耐盐机制,也为耐盐新品种的选育提供了丰富的基因资源和参考依据。(本文来源于《中国农业大学》期刊2018-05-01)
李晓薇,郭嘉,王鑫,王法微,李海燕[7](2017)在《羊草液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因LcNHX1的克隆及功能分析》一文中研究指出植物Na~+/H~+逆向转运蛋白具有调节pH值和维持细胞内Na~+平衡、减少盐胁迫对植物伤害的功能。本研究从羊草中克隆Na~+/H~+逆向转运蛋白基因LcNHX1,并对它的功能进行了初步分析。该基因全长2022bp,其中ORF区1614bp,编码537个氨基酸。LcNHX1蛋白具有10个跨膜区,且具有NHX蛋白的多个典型结构特征。半定量RT-PCR结果表明,盐(NaCl 400mM)、碱(NaHCO_3150mM)、盐碱(NaCl 200mM+NaHCO_3100mM)、干旱(10%PEG8000)、低温(4℃)和ABA(100μM)均能够不同程度的诱导LcNHX1基因的表达。利用Δnhx1盐敏感酵母突变体进行功能互补试验,结果发现在60mM、100mM NaCl胁迫条件下,转基因酵母Δnhx1+LcNHX1不仅回补了酵母突变株Δnhx1的盐敏感特性,并且具有更高的耐盐能力。通过比较转LcNHX1基因株系与野生型拟南芥幼苗在含有50mM NaCl和8mM NaHCO_3的MS培养基中的生长情况,发现转基因拟南芥株系具有更好的抗盐碱能力。(本文来源于《中国草地学报》期刊2017年05期)
李平,王晓宇,徐惠,王学娟,张继星[8](2018)在《蓖麻质膜型Na~+/H~+逆向转运蛋白基因(RcSOS1)克隆及表达载体构建》一文中研究指出根据其他物种中保守的SOS1基因序列,设计简并引物,利用RT-PCR和RACE的方法克隆得到RcSOS1(NCBI注册号:KX943304.1)基因序列,开放阅读框包含3 432个核苷酸,推导编码的蛋白质有1 143个氨基酸残基组成,与麻疯树SOS1基因的同源性最高,达到了80.4%,编码一种Na~+/H~+逆向转运蛋白。疏水性分析显示RcSOS1基因编码蛋白N-末端具有12个跨膜结构域,C-末端具有一个很长且面向质膜内腔的亲水尾部。RcSOS1蛋白二级结构以α-螺旋,无规则卷曲为主,其次为延伸链和β-转角,所占比例最少。叁级结构分析表明,RcSOS1蛋白是位于质膜上的Na~+/H~+逆向转运蛋白。根据RcSOS1全长序列设计带有Bam HⅠ和SalⅠ位点的全长扩增引物扩增基因全长,用Bam HⅠ和SalⅠ双酶切后与表达载体p CG-1301连接,成功构建了RcSOS1基因的正义表达载体,为深入研究RcSOS1基因的功能及耐盐的调控作用提供了帮助。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年10期)
李淑艳,蒋润枝[9](2017)在《莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因-LrNHX的克隆及表达分析》一文中研究指出[目的]寻求解决莲藕栽培种普遍对盐敏感的途径,从耐盐野生种中克隆了一个候选耐盐基因-LrNHX的全长c DNA序列,并对其表达进行分析,为今后利用基因工程技术改良莲藕耐盐性奠定基础。[方法]根据NCBI数据库中的莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因序列设计引物,利用PCR技术在莲藕叶片中克隆LrNHX,再利用半定量RT-PCR研究了250 mmol/L Na Cl处理0 h、6h、12 h、18 h、24 h和30 h时莲藕叶片中LrNHX的表达情况。[结果]LrNHX cDNA全长1 861 bp,编码526个氨基酸。Blast比对后发现该基因和与胡杨(ACX46912.1)、毛白杨(AAX37333.1、番茄(CAC83608.1)、拟南芥(NP 178079.2)的同源性分别达88%、87%、83%、82%。半定量RT-PCR结果表明,该基因在250 mmol/L Na Cl处理12 h后表达显着增高,说明LrNHX受盐诱导。[结论]LrNHX参与了莲藕耐盐信号的转导。(本文来源于《生物技术》期刊2017年04期)
刘岩,计东风,沈国新,魏佳,林天宝[10](2017)在《桑树Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的克隆及功能分析》一文中研究指出盐害是威胁作物生长的重要因素之一,培育和种植耐盐作物品系是进行盐地开发利用的有效途径。该研究通过RACE方法,从特优1#桑品种克隆获得了Na~+/H~+逆向转运蛋白基因(MaNHX)的全长cDNA(2 016 bp),编码蛋白预测分子量59.28 ku,等电点6.67,含保守位点(~(82)LFFIYLLPPI~(91))。用根癌农杆菌介导法,将MaNHX基因导入拟南芥中,结果表明,在拟南芥中异源表达MaNHX能明显提高拟南芥对盐胁迫的耐受性。转基因植株NaCl胁迫下叶绿素含量更高、抗氧化活性增强,MDA含量下降。结果证实,异源表达MaNHX转基因拟南芥可以通过维持细胞膜稳定性、减少膜损伤和透性伤害等机制应对盐胁迫。该研究可为桑树的抗盐品种培育提供候选参考基因。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2017年06期)
逆向转运蛋白论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
在原核生物中,钠/氢逆向转运蛋白具有催化细胞内的Na~+、Li~+或K~+等碱基阳离子的排出,换取外部质子,以降低有毒碱性金属阳离子的细胞质浓度和维持细胞内pH稳态起到了至关重要的作用。为了进一步挖掘中度嗜盐菌Halobacillus Y5中具有盐碱耐受性的钠/氢逆向转运蛋白基因并对其功能进行鉴定,我们首先提取该菌的基因组DNA,然后采用Sau3AI随机酶切及功能互补的方法获得了一个新型的钠/氢逆向转运蛋白基因Ha_ydjM。生物信息学分析表明,该基因属于YdjM超家族成员,是一个未知功能的膜蛋白,系统发育分析证实,其与来自Halobacillus sp. Marseille-P 3789的YdjM(蛋白登录号WP_101846656. 1)家族成员聚在一起但形成独立分支。研究发现,该基因能够恢复大肠杆菌突变株KNabc对0. 2mol/L NaCl和5mmol/L Li Cl的耐受特性,并且耐受碱性pH 8. 0。功能分析显示,该蛋白呈现pH依赖的钠/氢逆向转运蛋白活性,转运动力学分析表明,Na~+、K~+、Li~+在KNabc中K_m值分别是0. 43±0. 05mmol/L、0. 49±0. 06mmol/L、0. 64±0. 06mmol/L,即对Na~+、K~+、Li~+的亲和力分别是Na~+> K~+> Li~+。综上所述,Ha_ydjM代表了一种新型的钠/氢逆向转运蛋白,这丰富了YdjM超家族成员,并为其他未知膜蛋白功能分析提供依据。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
逆向转运蛋白论文参考文献
[1].张丽雪,王晓宇,李平,李惠根,丛娇娇.蓖麻Na~+/H~+逆向转运蛋白基因NhaD克隆与表达载体构建[J].基因组学与应用生物学.2019
[2].王艳红,刘艳双,石德喜,朱保国,吕保磊.新型YdjM超家族成员的钠/氢逆向转运蛋白功能鉴定[J].中国生物工程杂志.2018
[3].陈江飞,余津铭,杨建坤,余有本,肖斌.茶树Na~+/H~+逆向转运蛋白基因CsNHX1、CsNHX2的克隆及表达分析[J].茶叶科学.2018
[4].耿新,楼静,鄂一岚,铁英,马颖聪.西伯利亚白刺质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因NsSOS1的分离及表达分析[J].西北植物学报.2018
[5].伍国强,焦琦,刘海龙,蔺丽媛.甜菜液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白BvNHX基因RNAi载体构建及遗传转化[J].分子植物育种.2018
[6].黄艳华.褪黑素和液泡膜Na~+(K~+)/H~+逆向转运蛋白调控柳枝稷耐盐机制研究[D].中国农业大学.2018
[7].李晓薇,郭嘉,王鑫,王法微,李海燕.羊草液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因LcNHX1的克隆及功能分析[J].中国草地学报.2017
[8].李平,王晓宇,徐惠,王学娟,张继星.蓖麻质膜型Na~+/H~+逆向转运蛋白基因(RcSOS1)克隆及表达载体构建[J].分子植物育种.2018
[9].李淑艳,蒋润枝.莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因-LrNHX的克隆及表达分析[J].生物技术.2017
[10].刘岩,计东风,沈国新,魏佳,林天宝.桑树Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的克隆及功能分析[J].浙江农业学报.2017