293T细胞模型中整合素β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响

论文摘要

目的:建立含有Calpain切割相关的β3胞浆尾段突变体的293T细胞模型,研究β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用293T细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3(β3ΔNITY（β3胞浆段截去NITY基序）、β3Δ754（β3胞浆段截去羧基末端最后8个氨基酸TNITYRGT）、β3Δ759（β3胞浆段截去羧基末端最后3个氨基酸RGT）的稳转细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能。结果:成功建立了293T-αⅡbβ3ΔNITY、293T-αⅡbβ3Δ754、293T-αⅡbβ3Δ759、293T-αⅡbβ3细胞株,稳定表达野生型整合素β3全长的293T--αⅡbβ3细胞株较293T细胞具有良好的在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,可以作为血小板的替代模型,而293T-αⅡbβ3ΔNITY稳转细胞株的黏附和伸展能力稍低于293T-αⅡbβ3稳转细胞株,但293T-αⅡbβ3Δ754细胞、293T-αⅡbβ3Δ759细胞株的黏附和伸展能力均明显受损。结论:对整合素β3介导的细胞伸展功能,RGT基序至关重要,而NITY并非必不可少,同时所建β3胞浆尾段不同突变体的293T细胞株也为进一步的质谱分析数据库比对奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李东亚,毛建华,张威,陈欣洁,肖兵,阮铮,王韵,蒋国雄,施小凤,奚晓东

关键词: 整合素,细胞,整合素胞浆尾端,伸展,粘附,细胞功能

来源: 中国实验血液学杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 江苏大学附属医院血液科,医学基因组学国家重点实验室上海血液学研究所上海交通大学医学院附属瑞金医院

基金: 国家自然科学基金(81670127,81700130),江苏省自然科学基金(BK20150474),镇江市科技创新资金项目(SH2017006),江苏省青年医学人才基金项目

分类号: R329.2

页码: 227-232

总页数: 6

文件大小: 3354K

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