猪塞尼卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

猪塞尼卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

论文摘要

本研究根据猪塞尼卡病毒(SVA)VP1基因保守序列设计引物,通过优化反应条件,建立了实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对其进行特异性、敏感性和重复性的评价。结果显示,该检测方法特异性好,灵敏度达10 copies/uL,变异系数均小于2.0%,操作简单,耗时短。利用建立的检测方法对124份临床样本进行检测,结果,阳性率为3.2%。上述结果表明,本研究建立的荧光定量RT-PCR方法可用于猪原发性水泡病临床样品的快速检测和流行病学调查,具有良好的应用前景。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要试剂与耗材
  •   1.2 引物的设计与合成
  •   1.3 病毒核酸的提取和质粒标准品的制备
  •   1.4 体系和条件的优化
  •   1.5 标准曲线的建立
  •   1.6 荧光定量RT-PCR方法特异性和敏感性试验
  •   1.7 重复性试验
  •   1.8 对临床样品的检测及测序确认
  • 2 结果
  •   2.1 目的片段PCR及阳性标准品的鉴定
  •   2.2 荧光定量RT-PCR反应条件及标准曲线
  •   2.3 荧光定量RT-PCR方法的特异性和敏感性
  •   2.4 荧光定量RT-PCR方法的重复性
  •   2.5 临床样品的检测及其可靠性分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘健新,查云峰,鲁荣,任旭皎,黎振标,李慧子,张彭涛,宁章勇

    关键词: 塞尼卡病毒,荧光定量,检测

    来源: 中国兽医科学 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 华南农业大学兽医学院,广东省动物疫病预防控制中心

    基金: 广东省科技计划项目(2016A020210079)

    分类号: S852.651

    DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0041

    页码: 274-279

    总页数: 6

    文件大小: 1138K

    下载量: 316

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