吕新全[1]2003年在《食管鳞状细胞癌和不典型增生组织中hMLH1基因微卫星改变及蛋白表达的研究》文中指出近年的研究结果表明，在与肿瘤发生有关的基因中，除癌基因、抑癌基因和凋亡基因、抗凋亡基因外，还存在着另一类基因，即错配修复(mismatch repair，MMR)基因。由于错配修复基因缺陷而导致的基因组不稳定，被认为是导致肿瘤发生的一条新途径。而基因组不稳定的标志是微卫星不稳定(mircrosatellite instability，MSI)和杂合性缺失(loss of heterozygosity，LOH)。在构成错配修复系统的六种基因中，hMLH1处于核心的地位。在食管鳞状细胞癌发生发展中，是否有错配修复缺陷途径的参与，是否存在基因组不稳定状态，MSI和LOH各自发挥了什么作用，都是需要阐明的问题。本试验以hMLH1基因为对象，通过对其微卫星改变及蛋白表达的检测和分析，进行了相关的探讨。 材料与方法： 以40例食管鳞状细胞癌、相应40例正常组织及26例不典型增生组织为实验材料，采用聚合酶链反应(PCR)-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染技术，对hMLH1基因所在区域的3个微卫星位点(D3S1561，D3S1298，D3S1448)进行检测，分析了它们的MSI及LOH状况；采用免疫组织化学(immunohistochemical，IHC)染色方法，检测了3种组织中hMLH1蛋白的表达情况。对所得数据以x~2检验、Fisher精确概率法和t检验进行统计学处理。 结果： 1．MSI情况：郑州大学2003年研究生毕业论文食管鳞状细胞癌和不典型增生组织中hMLHI基因微卫星改变及蛋白表达的研究 在不典型增生组织中，D3S1561，D3S1298，D3S1448的MSI阳性率分别为38%一，30%，19%，阳性率无差异性(p>0.05)，总阳性率为:65%;在肿瘤组织中，Msl阳性率依次为17.5%，10%，10%，阳性率亦无差异性(p>0.05)，总阳性率为:30%(与不典型增生组织的Msl总阳性率相比，P<0.05)。肿瘤的MSI与不典型增生组织的MSI有关 (P<0 .05)。 2.LOH，清况: 在不典型增生组织中，D3S1561，D351298，D3S1448的LOH阳性率分别为。%，0%，7.6%，阳性率无差异性(p>。.05)，总阳性率为:7.6%;在肿瘤组织中，LOH阳性率依次为2.6%，0%，7.9%，阳性率无差异性(p>0.05)，总阳性率为:7.5%(与不典型增生组织的Msl总阳性率相比，P>0.05)。肿瘤的LOH与不典型增生组织的LOH有关 (P<0 .05)。 3.IHC结果 在正常组织、不典型增生组织、肿瘤组织中的阳性率分别为90%，57.6%，45%，不典型增生组织及肿瘤组织均低于正常组织(P<0.05)。在不典型增生组织中和肿瘤组织中出现较高比例的胞浆着色，分别为38.5%、50%(P>0.05)，高于正常组织中的7.5%(p<0.05)。 4.MSI与IHC结果间的关系 在不典型增生组织中，MSI与hMLHI蛋白核表达减少有关(p<0.05)，但在肿瘤组织中，未观察到这种关系(p>0.05)。 5.LOH与IHC结果间的关系 在不典型增生组织中和肿瘤组织中，LOH均和hMLHI蛋白表达无关(p>0.05)。 6.MSI与临床病理参数间的关系 肿瘤组织MSI状态与患者年龄、性别、浸润深度、肿瘤分级及淋巴结转移无关(p>0.05)。 7.LOH与临床病理参数间的关系 肿瘤组织LOH状态与患者年龄、性别、肿瘤分级及淋巴结转移无郑州大学2。。3年研究生毕业论文食管鳞状细胞癌和不典型增生组织中h砒111基因微卫星改变及蛋白表达的研究关(p>0.05)，但和肿瘤的浸润深度有关，LOH发生在浸润较深的肿瘤中(p<o.DS)。 8.IHC结果与临床病理参数间的关系 肿瘤组织中hMLHI蛋白表达阳性者年龄较阴性者大(p<0.05)，与性别、浸润深度、肿瘤分级及淋巴结转移无关(p>0.05)。 结论: 1.错配修复缺陷参与了食管鳞状·细胞癌的发生过程，且是早期的分子事件; 2.在不典型增生组织中的MSI阳性率高于肿瘤组织中，说明可能存在某种未知机制，可促使MSI率过高的克隆被清除，而MSI率中等的克隆获得选择优势，继而癌变; 3.在食管鳞状细胞癌发生发展过程中，hMLHI基因的LOH并非一个常见和重要的事件; 4.在食管不典型增生组织和鳞状细胞癌中hMLHI蛋白表达下降，且首次发现在不典型增生组织中这种下降与hMLHI基因的MSI有关，显示MSI可能影响到该基因的表达; 5.在肿瘤及不典型增生组织中可能存在的转位异常使hMLHI蛋白胞浆表达增多; 6.hMLHI蛋白可能抑制和延缓食管鳞状细胞癌的发生和浸润。
贾瑞[2]2007年在《hMLH1基因蛋白在食管鳞状细胞癌组织、不典型增生组织、正常食管鳞状上皮组织中表达的研究》文中研究指明目的：我国是食管癌的高发国家，也是世界上食管癌高死亡率的国家之一。环境和遗传等多因素引起了食管癌的发生，其涉及的分子生物学机制目前认为是癌基因激活或抑癌基因失活等相关基因的变化。hMLH1基因是错配修复基因系统中的重要成员，而错配修复基因是四种DNA损伤修复基因中的一种。本研究探讨了同一食管癌病例，其鳞状细胞癌组织、不典型增生组织、正常食管鳞状上皮组织中hMLH1基因的蛋白表达情况，深入研究它与食管鳞状细胞癌发生发展的关系；为食管癌的早期诊断，预防和基因治疗提供理论依据。方法：随机选择济南市中心医院2001年6月至2005年12月食管鳞状细胞癌病例手术标本的石蜡包埋组织92块。所有患者术前均未经放、化疗。对每一例病人的临床资料进行详细记录，包括性别、年龄和术后病理特征。找出的92例食管鳞状细胞癌患者，要求在病理切片中鳞状细胞癌组织、不典型增生组织和正常鳞状上皮组织均存在，取已知阳性组织作阳性对照，以磷酸盐缓冲液(PBS)替代一抗作阴性对照，采用免疫组织化学的方法，检测hMLH1基因蛋白在3种不同组织中的表达，并分析其不同表达与性别，年龄，分化程度，浸润深度，肿瘤分期，淋巴结转移等临床病理参数之间的关系。结果：(1)hMLH1基因蛋白主要表达在上皮基底层细胞的细胞核，且按正常食管鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织的发生发展顺序，其在细胞核中表达的阳性率逐渐下降；在鳞状细胞癌组织，不典型增生组织，正常食管鳞状上皮组织细胞核中的阳性表达率分别为36.96％，56.52％，84.78％，鳞状细胞癌组织和不典型增生组织均低于正常食管鳞状上皮组织(p＜0.010)。(2)作为一种伴随现象，hMLH1基因蛋白在细胞质中的染色提示了蛋白质的合成部位，且按正常食管鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织的顺序，胞浆中表达的阳性率逐渐上升。(3)鳞状细胞癌组织中hMLH1基因蛋白表达阴性者，年龄较阳性者大(p＜0.050)。(4)hMLH_1基因的蛋白表达率与肿瘤分期，淋巴结转移等有明显相关性(p＜0.050)。(5)hMLH_1基因的蛋白表达率与性别，分化程度，浸润深度等病理参数无明显相关性(p＞0.050)。结论：错配修复基因的缺失，在早期就参与了食管鳞状细胞癌的发生过程；hMLH1基因蛋白可能抑制或延缓食管鳞状细胞癌的发生和发展。
参考文献：
[1]. 食管鳞状细胞癌和不典型增生组织中hMLH1基因微卫星改变及蛋白表达的研究[D]. 吕新全. 郑州大学. 2003
[2]. hMLH1基因蛋白在食管鳞状细胞癌组织、不典型增生组织、正常食管鳞状上皮组织中表达的研究[D]. 贾瑞. 山东大学. 2007