一、酶免分析仪温度传感器的代换方法（论文文献综述）
张静[1]（2008）在《川楝素免疫分析方法及其应用研究》文中指出川楝素（toosendanin,TSN）是从传统驱蛔中药楝属植物川楝（Melia Toosendain Sieb. et Zucc）或苦楝（Melia azedarach L.）中分离得到的一种四环三萜类活性成分。川楝素除了临床应用的驱虫作用外,还具有阻遏乙酰胆碱释放、遏制前突触传递、易化L型Ca2+通道、抗肉毒作用和抑制肿瘤细胞增殖等多种生物效应。川楝素农用研究始于上世纪80年代,研究表明,川楝素对昆虫表现出多种生物活性,主要表现为拒食和胃毒作用。西北农林科技大学无公害农药研究服务中心研制了0.5%楝素乳油,主要用于防治甘蓝上菜青虫和其它果蔬等经济作物上具有咀嚼式口器的害虫,均有较高的防治效果。对川楝素胃毒作用机理研究结果表明,川楝素对中肠消化酶无明显影响,可严重破坏中肠上皮细胞,推测川楝素可能作用于昆虫中肠的膜系统。随着对川楝素的进一步研究开发,亟需一种快速、灵敏的川楝素定量检测方法,以用于更深入的环境毒理及杀虫作用机理等方面的研究。本研究首先合成了川楝素人工抗原,建立了能分泌抗川楝素单克隆抗体的杂交瘤细胞系,制备了高特异性抗川楝素单克隆抗体;建立了适合于多种介质中痕量川楝素检测的间接竞争酶联免疫（IC-ELISA）分析方法;以粘虫为试虫,观察了川楝素处理对中肠上皮细胞超微结构的影响,并以川楝素单克隆抗体为一抗,胶体金标记的羊抗小鼠IgG为二抗,对川楝素处理后在粘虫中肠上皮细胞的结合进行了定位研究。研究主要结果如下:1.以川楝素和琥珀酸酐为原料,合成了川楝素半抗原,经高分辨质谱（HRMS）、红外光谱（IR）和核磁共振（1H-NMR,13C-NMR）分析,该化合物即为目标产物28-琥珀酸单酰川楝素（TSN-S）;利用混合酸酐法（MAR）和活泼酯法（EDC）将半抗原TSN-S偶联于载体蛋白牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）上,红外扫描法证实获得偶联物同时具备半抗原和载体蛋白的吸收特征,表明人工抗原（TSN-S-BSA）和包被原（TSN-S-OVA）合成成功。2.以人工抗原TSN-S-BAS免疫5只BALB/C小鼠,经过3次免疫后,小鼠抗血清效价均大于100000。小鼠加强免疫后取5×107个脾脏细胞和1×107个SP2/0骨髓瘤细胞,0.7 mL 33%的聚乙二醇（PEG 4000,pH 8.0）为融和剂进行细胞融合。通过HAT选择型培养基筛选杂交瘤细胞,以TSN-S-OVA为包被原,采用间接ELISA方法进行阳性筛选,经过3次克隆化后,获得了能稳定分泌抗川楝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株EE7和FB9,两株杂交瘤细胞培养上清的效价分别为1:160和1:80。采用双向琼脂扩散法验证两株杂交瘤细胞培养上清均与抗IgG抗体有沉淀线,均为IgG类抗体蛋白,亚类均为IgG2b。3.将获得的两株杂交瘤细胞EE7和FB9扩大培养后,采用诱生腹水法制备了抗川楝素单克隆抗体腹水。腹水抗体EE7和FB9以辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后,测得蛋白含量分别为4.25和3.32 mg/mL;采用方阵滴定法确定了包被原、腹水抗体、二抗的工作浓度分别为:包被原2000×,二抗5000×,EE7和FB9分别稀释6000×和4000×;采用间接ELISA方法测定抗体EE7和FB9效价分别为4×10-6和8×10-6。4.对IC-ELISA分析条件进行优化,确定了两个抗体最适pH、离子强度和有机溶剂。结果表明,对于抗体EE7的最适反应体系为:10%甲醇,pH 7.4,50 mmol/L PBS;对于FB9则为:10%甲醇,pH 7.4,100 mmol/L PBS。在优化的检测条件下,抗体EE7对川楝素的半数抑制浓度（IC50）为1.806 ng/mL,最低检测浓度为0.064 ng/mL,检测范围为0.22822.878 ng/mL;FB9对川楝素的半数抑制浓度（IC50）为3.803 ng/mL,最低检测浓度为0.632 ng/mL,检测范围为1.32237.530 ng/mL;IC-ELISA特异性检测表明,EE7和FB9对3种川楝素类似物均无明显的交叉反应。5.建立了0.5%楝素乳油、川楝树皮和川楝子提取物中川楝素的IC-ELISA分析方法。测定结果表明,0.5%楝素乳油中川楝素的含量为3.654 mg/mL;以甲醇为溶剂,采用超声波提取法测得川楝树皮和川楝子提取物中川楝素的含量分别为3.358%和0.232%,方法的添加回收率（Recovery）为95.5104.2%,相对标准偏差（RSD）均小于6.0%。该方法快速、简便、准确,可用于川楝素原药及其制剂生产上的质量控制。6.采用IC-ELISA方法分析了不同水体和土壤中的川楝素及川楝素的降解。当添加浓度为1和10μg/kg时,水中的添加回收率为82.3%98.2%,相对标准偏差（RSD）为2.6%9.2%;土壤中回收率在81.4%95.9%间,平均RSD为4.7%,表明建立的IC-ELISA方法适合于水体和土壤中痕量川楝素的检测。降解试验结果表明,川楝素属易降解或者极易降解农药。7.建立了川楝素在果蔬上残留IC-ELISA分析方法,分析了基质对ELISA检测的影响。3种空白果蔬样品中添加0200 ng/mL的川楝素,在优化的提取条件下,样品提取液稀释20倍进行IC-ELISA分析,在添加浓度为20200 ng/mL时,回收率为87.9%98.7%,批内、批间相对标准偏差均小于7.0%,符合药物残留分析要求。8.以粘虫6龄初幼虫为试虫,透射电镜下观察了川楝素饲喂处理对其中肠上皮细胞超微结构的影响。观察发现,川楝素可明显破坏中肠上皮细胞的膜结构,柱状细胞顶膜微绒毛肿胀、空泡化乃至消失,出现髓鞘样结构;光面内质网扩张和柱状细胞核异染质增多。随着川楝素作用时间的增加,对中肠细胞的破坏程度加深。9.粘虫中肠上皮细胞中川楝素的免疫电镜研究采用包埋后染色法进行。以1%OVA为封闭液,100×的川楝素单克隆抗体EE7为一抗、100×的15nm胶体金标记羊抗小鼠IgG为二抗,对置于镍网上的粘虫中肠组织超薄切片进行免疫染色,醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色后,在透射电镜下观察川楝素在中肠上皮细胞内的结合。观察发现,阴性对照无非特异性染色,未经川楝素处理的试虫中肠组织中未见金颗粒积聚;川楝素处理后0.5 h,川楝素主要结合在柱状细胞微绒毛上,处理24 h后可见大量的金颗粒积聚在肿胀的微绒毛和杯状细胞囊腔中微绒毛上,扩张的光面内质网及靠近微绒毛根部的细胞质上也有少量的金颗粒积聚。免疫定位结果表明川楝素在粘虫中肠组织中主要结合在的细胞质膜上,有较好的组织特异性,粘虫中肠细胞膜上可能存在川楝素的特异性受体。
荆西京,张莉,文爱东,赵磊[2]（2003）在《酶免分析仪温度传感器的代换方法》文中研究表明
王军学[3]（2003）在《Stratus荧光酶免分析仪故障检修一例》文中研究指明
杨常清,任俐,黄晓庆,张德昌[4]（2003）在《变色龙全自动酶免系统的安装、保养和维修》文中研究表明本文介绍了TRITURUS全自动酶标分析仪安装和维护的注意事项及典型故障的分析和排除方法。
二、酶免分析仪温度传感器的代换方法（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、酶免分析仪温度传感器的代换方法（论文提纲范文）
（1）川楝素免疫分析方法及其应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 川楝素的研究进展 |
| 1.1.1 川楝素的发现及其理化性质 |
| 1.1.2 川楝素生理及药理作用研究 |
| 1.1.3 川楝素杀虫作用应用研究进展 |
| 1.1.4 川楝素的分析方法 |
| 1.2 农药免疫分析技术及其研究进展 |
| 1.2.1 农药免疫分析技术的程序 |
| 1.2.2 农药免疫分析方法在农药学研究中的应用 |
| 1.3 本研究的提出 |
| 第二章 川楝素人工抗原的合成和鉴定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试剂和试材 |
| 2.1.2 主要试验仪器 |
| 2.1.3 试验方法 |
| 2.1.3.1 半抗原的合成 |
| 2.1.3.2 川楝素人工抗原的合成 |
| 2.1.3.3 半抗原的鉴定方法 |
| 2.1.3.4 人工抗原的鉴定方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 化合物TSN-S |
| 2.2.2 人工抗原的鉴定 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 川楝素半抗原的设计思路 |
| 2.3.2 人工抗原的鉴定方法应根据半抗原和抗原的性质具体选择 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 抗川楝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 试剂 |
| 3.1.2 主要仪器设备 |
| 3.1.3 实验动物及细胞 |
| 3.1.4 试验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 BALB/C 小鼠免疫结果 |
| 3.2.2 细胞融合 |
| 3.2.3 杂交瘤细胞的形态观察 |
| 3.2.4 杂交瘤细胞的筛选 |
| 3.2.5 杂交瘤细胞株的效价和特异性 |
| 3.2.6 杂交瘤细胞培养上清抗体亚型 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 免疫次数和免疫原剂量对免疫效果有较大影响 |
| 3.3.2 血清的选择对融合成功至关重要 |
| 3.3.3 骨髓瘤细胞的状态是融合成功的一个重要因素 |
| 3.3.4 饲养细胞对杂交瘤生成的影响 |
| 3.3.5 应选择合适的融和剂浓度和用量 |
| 3.3.6 应适时改变选择性培养基 |
| 3.3.7 杂交瘤细胞阳性筛选的时间非常重要 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 单克隆抗体的制备及川楝素间接竞争ELISA 方法的建立 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料和试剂 |
| 4.1.2 试验仪器 |
| 4.1.3 试验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 杂交瘤细胞株的扩大培养和腹水制备 |
| 4.2.2 腹水抗体的蛋白含量 |
| 4.2.3 单抗和包被原最佳工作浓度的确定 |
| 4.2.4 单抗效价的确定 |
| 4.2.5 IC-ELISA 条件的优化 |
| 4.2.6 单克隆抗体灵敏度的测定 |
| 4.2.7 单克隆抗体特异性测定 |
| 4.2.8 蒸馏水中川楝素含量分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 单克隆抗体的大量制备方法 |
| 4.3.2 ELISA 分析条件的优化中应注意的几个因素 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 川楝制品中川楝素含量的IC-ELISA 测定方法 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试剂和材料 |
| 5.1.2 试验仪器 |
| 5.1.3 试验方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 川楝素IC-ELISA 方法标准曲线的建立 |
| 5.2.2 0.5%楝素乳油中川楝素含量的测定结果 |
| 5.2.3 川楝树皮和川楝子中川楝素含量测定结果 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 IC-ELISA 分析法测定水和土壤中的川楝素 |
| 6.1 材料和方法 |
| 6.1.1 试验试剂 |
| 6.1.2 供试水体和土壤 |
| 6.1.3 仪器设备 |
| 6.1.4 间接竞争ELISA |
| 6.1.5 IC-ELISA 标准曲线的测定 |
| 6.1.6 水中添加回收率试验 |
| 6.1.7 川楝素的水解 |
| 6.1.8 土壤中添加回收 |
| 6.1.9 川楝素在土壤中的降解 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 标准曲线 |
| 6.2.2 川楝素在水中的添加回收率 |
| 6.2.3 川楝素在水中的降解动态 |
| 6.2.4 川楝素在水中的降解动力参数 |
| 6.2.5 川楝素在土壤中的添加回收 |
| 6.2.6 川楝素在土壤中的降解动态 |
| 6.2.7 川楝素在土壤中的降解动力参数 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 ELISA 方法适用于环境样品中川楝素的检测 |
| 6.3.2 川楝素在水和土壤中稳定性差，不易造成环境污染 |
| 6.4 小结 |
| 第七章 果蔬中川楝素残留的间接竞争ELISA 方法分析 |
| 7.1 材料与方法 |
| 7.1.1 试验试剂 |
| 7.1.2 供试蔬菜 |
| 7.1.3 仪器设备 |
| 7.1.4 样品前处理方法的选择 |
| 7.1.5 间接竞争ELISA |
| 7.1.6 IC-ELISA 标准曲线的测定 |
| 7.1.7 基质对IC-ELISA 的影响 |
| 7.1.8 准确度试验 |
| 7.1.9 精密度试验 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 标准曲线 |
| 7.2.2 样品提取条件的优化 |
| 7.2.3 基质对ELISA 的影响 |
| 7.2.4 IC-ELISA 分析方法的准确度 |
| 7.2.5 IC-ELISA 分析方法的精密度 |
| 7.3 讨论 |
| 7.3.1 果蔬样品基质对川楝素ELISA 检测有一定的影响 |
| 7.3.2 ELISA 法可快速灵敏检测果蔬中的痕量川楝素 |
| 7.4 小结 |
| 第八章 川楝素对粘虫中肠超微结构的影响及其在中肠上结合的定位研究 |
| 8.1 材料与方法 |
| 8.1.1 试剂和试材 |
| 8.1.2 供试昆虫 |
| 8.1.3 仪器设备 |
| 8.1.4 试虫处理 |
| 8.1.5 中肠透射电镜 |
| 8.1.6 中肠免疫电镜 |
| 8.2 结果与分析 |
| 8.2.1 川楝素对粘虫中肠细胞超微结构的影响 |
| 8.2.2 川楝素在粘虫中肠上皮细胞内的免疫定位 |
| 8.3 讨论 |
| 8.3.1 免疫金染色过程中需注意的问题 |
| 8.3.2 川楝素可严重破坏粘虫中肠上皮细胞膜 |
| 8.3.3 川楝素的胃毒作用靶标需进一步研究 |
| 8.4 小结 |
| 第九章 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）Stratus荧光酶免分析仪故障检修一例（论文提纲范文）
| 1 故障现象 |
| 2 分析与检修 |
（4）变色龙全自动酶免系统的安装、保养和维修（论文提纲范文）
| 1 工作场地的选择 |
| 2 仪器的安装 |
| 3 日常维护 |
| 3.1 开机前应仔细查看 |
| 3.2 做好日常维护 |
| 4 常见故障及排除方法 |
四、酶免分析仪温度传感器的代换方法（论文参考文献）
- [1]川楝素免疫分析方法及其应用研究[D]. 张静. 西北农林科技大学, 2008(11)
- [2]酶免分析仪温度传感器的代换方法[J]. 荆西京,张莉,文爱东,赵磊. 医疗卫生装备, 2003(S1)
- [3]Stratus荧光酶免分析仪故障检修一例[J]. 王军学. 医疗卫生装备, 2003(06)
- [4]变色龙全自动酶免系统的安装、保养和维修[J]. 杨常清,任俐,黄晓庆,张德昌. 医疗设备信息, 2003(02)