美洲大蠊内生菌几丁质酶基因的克隆、表达及其活性研究

论文摘要

目的:对美洲大蠊内生黏质沙雷氏菌几丁质酶ChiA基因进行克隆、可溶性表达及功能验证。方法:PCR扩增ChiA基因,TA亚克隆,构建重组表达载体ChiA/p ET21b,生物信息学分析和低温诱导表达、SDS-PAGE、Western blot鉴定,打孔法对几丁质酶活性检测。结果:PCR成功扩增了ChiA基因序列,该序列与GenBank上的S. marcescens ChiA基因序列同源性达99%;该序列编码571个氨基酸,并能够在原核系统中稳定表达。可溶性表达分析显示:通过低温诱导表达,获得可溶性的目的蛋白;活性试验发现:含目的蛋白的表达产物可分解几丁质,且活性强于美洲大蠊内生黏质沙雷氏菌。结论:从美洲大蠊内生黏质沙雷氏菌基因组中成功克隆了几丁质酶ChiA基因,通过原核表达系统获得了具有较强活性的可溶性几丁质酶ChiA,为其应用奠定了基础。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 许敏华,张晶晶,金小宝,李小波,王艳,马艳

关键词: 美洲大蠊,黏质沙雷氏菌,几丁质酶,可溶性表达,活性验证

来源: 中国生物工程杂志 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 广东药科大学广东省生物活性药物研究重点实验室

基金: 国家自然科学基金(81502520),广东省自然科学基金(2016A030310299),广东省医学科研基金(A2016077)资助项目

分类号: Q78;Q936

DOI: 10.13523/j.cb.20190104

页码: 31-37

总页数: 7

文件大小: 392K

下载量: 134

相关论文文献

• [1].美洲大蠊粉酶解工艺最佳用酶初步筛选[J]. 西部中医药 2019(09)
• [2].美洲大蠊多肽对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用研究[J]. 江西中医药大学学报 2018(01)
• [3].中药美洲大蠊的生药鉴别研究[J]. 时珍国医国药 2018(08)
• [4].克隆法检测不同环境下美洲大蠊携带细菌的比较研究[J]. 中国媒介生物学及控制杂志 2017(05)
• [5].美洲大蠊油脂急性毒性及其拮抗美洲大蠊提取液肝脏保护作用的初步研究[J]. 现代中药研究与实践 2015(06)
• [6].盐提法提取美洲大蠊多糖工艺优化的研究[J]. 安徽农学通报 2016(10)
• [7].稀碱法提取美洲大蠊多糖工艺条件的研究[J]. 安徽农业科学 2016(15)
• [8].药用昆虫美洲大蠊化学成分及其药理作用的研究进展[J]. 抗感染药学 2014(05)
• [9].美洲大蠊温敏凝胶的制备及其促糖尿病大鼠创面修复作用考察[J]. 中国实验方剂学杂志 2020(14)
• [10].美洲大蠊精粉在肛周脓肿术后患者中的应用效果[J]. 中国民康医学 2020(15)
• [11].美洲大蠊前处理工艺及其体外抗肿瘤活性研究[J]. 山东中医杂志 2019(03)
• [12].美洲大蠊多肽对血管生成的影响[J]. 中国实验方剂学杂志 2019(08)
• [13].美洲大蠊人工养殖的营养与饲料研究进展[J]. 饲料博览 2019(05)
• [14].美洲大蠊研究现状及其研究中关键问题分析与展望[J]. 中国中药杂志 2018(07)
• [15].传递正能量——读陈静同志《美洲大蠊》有感[J]. 中国工会财会 2015(05)
• [16].大孔树脂对美洲大蠊多糖吸附解吸性能考察[J]. 大理学院学报 2011(06)
• [17].美洲大蠊质量评价研究进展[J]. 亚太传统医药 2019(08)
• [18].美洲大蠊的含氮成分及其促创面愈合相关活性研究[J]. 中国现代中药 2018(01)
• [19].美洲大蠊愈创活性成分研究[J]. 天然产物研究与开发 2018(04)
• [20].美洲大蠊化学成分和药理活性[J]. 动物医学进展 2018(03)
• [21].美洲大蠊黄酮提取工艺条件研究[J]. 安徽农业科学 2018(10)
• [22].美洲大蠊醇提物对小鼠免疫调节功能影响及抗疲劳作用的研究[J]. 大理大学学报 2018(02)
• [23].美洲大蠊对人胚肺成纤维细胞增殖的影响及作用机制初探[J]. 时珍国医国药 2018(09)
• [24].肝龙胶囊和美洲大蠊脱脂膏对正常大鼠胆汁分泌的影响[J]. 大理学院学报 2015(02)
• [25].美洲大蠊对小鼠急性酒精性肝损伤的药理作用研究[J]. 世界科学技术-中医药现代化 2014(04)
• [26].美洲大蠊[J]. 中国工会财会 2014(10)
• [27].济南:养美洲大蠊起点低见效快[J]. 现代营销(经营版) 2013(02)
• [28].美洲大蠊人工养殖及经济价值的研究进展[J]. 现代畜牧科技 2019(11)
• [29].HS-SPME-GC-MS分析美洲大蠊不同炮制品的腥臭味物质[J]. 中国实验方剂学杂志 2019(24)
• [30].美洲大蠊化学成分的研究[J]. 中成药 2018(02)

标签：美洲大蠊论文;  黏质沙雷氏菌论文;  几丁质酶论文;  可溶性表达论文;  活性验证论文;