一、山羊卵泡刺激素β-亚基cDNA的分子克隆与序列分析（论文文献综述）
胡虹[1]（2020）在《不同倍性鲫鲤Inhibin和Activin亚基的分子克隆及表达研究》文中进行了进一步梳理红鲫（Carassius auratus red var.）（2n=100,♀）与鲤鱼（Cyprinus carpio L.）（2n=100,♂）远缘杂交培育出两性可育的异源四倍体鲫鲤,通过多代自交后形成异源四倍体鲫鲤品系。以改良异源四倍体鲫鲤为父本与二倍体红鲫为母本杂交得到不育的异源三倍体鲫（湘云鲫2号）。脊椎动物性腺发育机制是近年来生物学领域的一个热门话题。与硬骨鱼性腺发育相关的Inhibin（抑制素）和Activin（激活素）的研究已有报道,但在不同倍性鱼类中的研究较少。已有研究表明Inhibin和Activin参与许多重要生理过程,现在有关研究最多的是Inhibin和Activin在生殖过程中的调控。Inhibin和Activin参与了下丘脑-垂体-性腺生殖轴（HPG轴）的调控。在下丘脑中,Inhibin和Activin可调节促性腺激素释放激素（gonadotropin releasing hormone,GnRH）分泌;在垂体中,Inhibin和Activin调节促性腺细胞分泌卵泡刺激素（Follicle stimulating hormone,FSH）和促性腺激素释放激素受体（Gonadotropin releasing hormone receptor,GnRHR）的表达;在卵巢中,Inhibin和Activin可调节卵泡发生和卵母细胞成熟。此外,不育的异源三倍体鲫为育性相关基因的功能和机制的研究提供了很好的实验材料。本研究的具体内容及结果如下:1.对二倍体红鲫和异源三倍体鲫的inhibinα基因的cDNA全长序列进行了克隆及序列分析。二倍体红鲫inhibinα基因cDNA全长1642bp,其中5’非编码区为170bp,3’非编码区为428bp,开放阅读框为1044bp,编码347个氨基酸。异源三倍体鲫inhibinα基因cDNA全长1632bp,其中5’非编码区为165bp,3’非编码区为423bp,开放阅读框为1044bp,编码347个氨基酸。2.通过实时定量PCR对比分析了inhibinα基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫各个组织的表达特征。结果显示inhibinα在性腺中有较高的表达量。推测Inhibin主要作用与鱼类的生殖过程相关,这与之前在哺乳类动物及斑马鱼中的研究一致。此外,我们还比较了inhibinα在二倍体红鲫和异源三倍体鲫卵巢中的表达,研究结果表明在异源三倍体鲫卵巢中的表达量高于二倍体红鲫。我们推测inhibinα在异源三倍体鲫卵巢中高表达,可以通过阻断Activin的作用抑制性腺的发育,从而导致异源三倍体鲫的不育。3.在实验室前期已获得了不同倍性鲫鲤activinβA和activinβB基因cDNA全长的基础上,我们对activinβA和activinβB基因在不同组织中的表达情况开展了研究。研究结果显示activinβA和βB在组织中广泛表达,这也表明Activin在组织中起着旁分泌和自分泌的作用。activinβA和βB基因分别在不同时期的红鲫和异源三倍体鲫垂体和卵巢的表达结果显示,activinβA和βB基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫垂体中的表达不一致,activinβA基因在异源三倍体鲫中高表达,然而activinβB基因在二倍体红鲫较高的表达。根据之前的研究我们推测activinβA和activinβB可能在垂体中受到不同的调节,并发挥不同的作用。无论是在繁殖期还是非繁殖期,activinβA和βB基因在异源三倍体鲫卵巢中的表达都明显高于红鲫。根据inhibinα在异源三倍体鲫卵巢中的表达量高于二倍体红鲫的实验结果,我们推测inhibinα竞争性的结合activinβA和βB,通过影响activin二聚体的形成抑制性腺的发育。4.采用免疫组织化学技术对Activin亚基在不同性腺发育时期的不同倍性鱼卵巢中进行定位分析,发现ActivinβA和βB主要定位在颗粒细胞中。在异源三倍体鲫的卵原细胞中我们发现了大量的阳性信号的存在。本研究从Inhibin和Activin亚基在可育二倍体红鲫和不育异源三倍体鲫的表达情况进行了一系列研究讨论,进一步揭示了异源三倍体鱼生殖调控的分子机制,为鱼类生殖生理学研究及繁殖育种提供理论依据。
张建肖,关洪斌[2]（2010）在《梅花鹿促卵泡激素α亚基基因克隆与融合表达》文中认为以原构建的克隆载体为模板,PCR扩增梅花鹿FSHα亚基基因,TA克隆后经双酶切插入表达载体pGEX-6P-2,阳性克隆导入E.coli BL21,IPTG诱导表达GST-FSHα融合蛋白,SDS-PAGE进行分析鉴定。结果表明,FSHαPCR产物大小约380bp,测序结果与GenBank序列一致;重组表达载体pGEX-6P-2-FSHα构建成功;融合蛋白经SDS-PAGE分析,结果发现,在分子质量39.3ku处出现特异性蛋白质条带,说明梅花鹿FSHα亚基基因片段已在E.coli BL21中成功表达了FSHα-GST融合蛋白。
张建肖[3]（2010）在《梅花鹿卵泡刺激素原核表达研究》文中指出卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）广泛用于牛、羊、猪等动物的超排、人工受精等繁殖育种工作中。可通过多种方法获得FSH,但是由动物脑垂体中提取的FSH存在较多问题,如材料来源有限、提取纯化工作费时、费力、质量差、纯度低、常有其它激素的污染等。而采用基因重组技术可大量生产高纯度的FSH,降低生产费用,这对畜牧业生产具有重要意义。本文在导师关洪斌研究的基础上,进一步研究了梅花鹿FSHa/β两亚基基因的克隆和融合表达。本实验首先以原构建的克隆载体为模板,设计引入限制性内切酶EcoR I和XhoⅠ酶切位点的引物,对梅花鹿FSHα／β两亚基基因分别进行PCR扩增,然后将纯化回收的PCR产物与pMD18-T载体连接后,转化JM109感受态菌,通过XhoⅠ和EcoR I双酶切后插入表达载体pGEX-6P-2,重组质粒,将阳性克隆导入E.coli BL21, IPTG诱导表达GST-FSHa/β融合蛋白,最后使用SDS-PAGE进行分析鉴定。本实验最终成功克隆了FSHα亚基基因,PCR产物大小约370 bp,测序结果与GenBank序列一致,成功构建了重组表达载体pGEX-6P-2-FSHa,由IPTG诱导表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子量39.3 kD处,出现特异性蛋白条带；FSHβ亚基基因PCR产物大小约400 bp,测序结果与GenBank序列一致,成功构建了重组表达载体pGEX-6P-2-FSHβ,由IPTG诱导表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子量39.5 kD处,出现特异性蛋白条带。上述结果说明在E.coli BL21中成功表达了梅花鹿FSHα／β-GST融合蛋白。
何小龙[4]（2010）在《蒙古羊BMPR-IB、FSHβ基因克隆与表达及卵巢组织差异表达基因研究》文中进行了进一步梳理绵羊的繁殖性状一般分为受胎率、多胎率及羔羊存活率三类性状,繁殖性能的高低直接关系到养羊业生产成本和生产效率,具有重大的经济意义。蒙古羊是我国最古老的地方绵羊品种之一,乌珠穆沁系蒙古羊是在当地生态环境条件下,经长期选育形成的一个优良类群,具有许多优良特性,主要以抗病力强、产肉率高和繁殖性能高而闻名。为了揭示蒙古羊高繁殖性能,使蒙古羊这一宝贵资源能得到有效利用,本研究以乌珠穆沁系蒙古羊为实验材料,首先以BMPR-IB和FSHβ基因作为蒙古羊高繁殖力候选基因,对其进行了克隆及序列分析,并采用实时荧光定量PCR（RQ-PCR）的相对定量方法对BMPR-IB和FSHβ基因在单羔蒙古羊非发情期、发情期及产双羔蒙古羊怀孕后期的卵巢、子宫、输卵管、下丘脑和垂体组织进行了差异表达研究;其次采用抑制性消减杂交技术（SSH）对经产单、双羔蒙古羊的卵巢组织差异表达基因进行了筛选并采用电子克隆加RT-PCR方法对部分差异表达基因进行了克隆和验证。通过以上研究,为提高我国肉用绵羊繁殖力及加快肉羊新品种选育提供了重要的理论依据,并获得以下主要研究结果:（1）采用RT-PCR方法分别从蒙古羊卵巢组织中扩增出BMPR-IB、FSHβ基因的cDNA序列。蒙古羊BMPR-IB基因全长1567bp,包括完整的1509bp开放读码框（ORF）,共编码502个氨基酸。通过对单、多胎蒙古羊BMPR-IB基因测序结果分析发现,在单、多胎蒙古羊BMPR-IB基因编码区第746位和第1113位碱基相一致,分别为“A”和“C”,并没有发生同多胎Booroola羊相同的A→G突变和C→A突变。蒙古羊FSHβ基因全长1021bp,包括完整的390bp ORF,共编码129个氨基酸。（2）采用相对定量的双标准曲线法建立了蒙古羊β-Actin、BMPR-IB和FSHβ基因的RQ-PCR反应体系。以非发情期单羔蒙古羊的卵巢组织定量结果为对照,计算得到FSHβ基因在单羔蒙古羊发情期下丘脑组织中表达量最高,在发情期的输卵管组织中表达量最低;BMPR-IB基因在单羔蒙古羊发情期卵巢组织中表达量最高,在发情期的子宫组织中表达量最低。在卵巢组织中,FSHβ基因在发情期卵巢组织中的表达量是非发情期的1.31倍,双羔羊是单羔羊的0.70倍;BMPR-IB基因在发情期卵巢组织中的表达量是非发情期的2.65倍,双羔羊是单羔羊的2.16倍。证明BMPR-IB基因是蒙古羊多胎主要候选基因,FSHβ基因虽然在绵羊繁殖过程中具有重要的作用,但并非蒙古羊多胎主效基因,可能与多胎性状的主基因或QTL相连锁。（3）采用SSH技术成功构建了单、双羔蒙古羊卵巢组织的正、反向消减cDNA文库,并从两个消减cDNA质粒文库中筛选得到768个有效阳性克隆,插入片段长度主要分布于1501000bp之间。结合斑点杂交技术获得到差异克隆373个,通过测序和同源性检索获得已知基因序列185条,10条已知的差异表达EST和4条未知的EST序列。（4）对差异表达基因功能分析表明,本实验所获得的基因主要由以下几大类组成:机体和细胞防御、免疫类14个,代谢类53个,物质运输类20个,核酸修饰类12个,细胞发育类18个,信号传导类12个,细胞结构类9个,未分类47个,其中代谢类基因占据了最大部分占28.65%。将这些差异表达基因和已报道的与繁殖性状相关的基因比较发现,经过初步筛选得到12个差异表达基因与已报道的繁殖性状相关基因相一致,这些基因分别为ITGB1、BMP6、MHC-I、ACVRL1、IGFBP5、SPON1、FABP5、ADAMTS1、FAM46A、THY1、ARP3和Id3基因。（5）分别以SSH获得的差异表达ADAMTS1和Id3基因序列片段为种子序列在绵羊的EST数据库中进行blastn同源性检索,得到相应的UniGene编号分别为Oar.7453和Oar.5068,经过序列拼接分别得到2418bp和1099bp的蒙古羊ADAMTS1、Id3基因电子克隆cDNA序列。采用RT-PCR方法实验克隆得到2420bp的蒙古羊ADAMTS1基因序列和1045bp的蒙古羊Id3基因序列,经同源性比对发现,实验所得序列与电子延伸序列的同源性分别为99.4%和99.3%,并将序列提交至GenBank获得注册号分别为:GU437212和GU437213。
郭景茹,杨焕民,蔡军,李鹏,康波[5]（2009）在《籽鹅促卵泡激素α亚基基因的克隆、序列分析及其原核表达载体的构建》文中进行了进一步梳理以雌性籽鹅脑垂体的总RNA为模板,利用特异性引物通过RT-PCR扩增获得长为363 bp的籽鹅促卵泡激素α亚基的cDNA片段,将扩增的促卵泡激素α亚基基因片段克隆至pMD18-T载体后进行测序。将测序结果与鸡、鹌鹑、火鸡、鼠、羊、牛等多种禽类和哺乳动物的该基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行同源性分析。结果表明,这些物种促卵泡激素α亚基基因序列具有较高的保守性,其中与鸡、鹌鹑、火鸡的核苷酸同源性最高,均为95.9%,推导的氨基酸序列与鸡、鹌鹑、火鸡的同源性最高,均为97.5%。为了对克隆的籽鹅促卵泡激素α亚基基因功能研究提供基础,将籽鹅促卵泡激素α亚基基因克隆至pET-32a（+）原核表达载体。
蔡军,杨焕民,李鹏,郭丽[6]（2009）在《籽鹅促卵泡激素β亚基cDNA的分子克隆与序列分析》文中研究指明从新屠宰的雌性籽鹅脑垂体中提取总RNA,经RT-PCR法扩增目的片段,获得长为396 bp的籽鹅促卵泡激素β亚基cDNA片段。将扩增的片段与pMD18-T载体连接,并转化至DH5α感受态细胞中。随机挑选阳性重组子进行鉴定、测序,将测序结果与绵羊、水牛、鸡、鸭等多种哺乳动物和禽类该基因序列及相应氨基酸序列进行同源性分析。结果显示,籽鹅促卵泡激素β亚基基因序列和其它动物一样,都有较高的保守性。其中与鸭的同源性最高,核苷酸同源性为97.0%,氨基酸同源性为100%。总体来看,在各种动物中FSHβ亚基基因同源性是很高的。
张璐[7]（2009）在《猪BMP15、GDF9和FSHβ基因的遗传多态性与产仔数的相关性研究》文中指出本研究利用PCR和PCR-SSCP技术对大白猪、长白猪、杜洛克、辽宁黑猪、丹育黑猪5个猪群共167头的BMP15基因、GDF9基因和FSHβ亚基基因检测多态性,研究基因和猪产仔数之间的关系。利用GenBank上已经发表的猪的基因序列设计引物,进行PCR扩增并测序,多态分析,和对两个插入序列进行生物信息学分析,并对产仔数建立GLM模型,探讨两个多态性与猪产仔数的关系。结果表明:（1）BMP15基因的多态性检测:设计2条引物（引物1和引物2）扩增,共检测到3个突变: 5582C/T（TCC-TCT）、6031 T/C （AAT-AAC）和6056C/T （AAC-AAT）。6031 T/C （AAT-AAC）,为同意突变,在辽宁黑猪中检测到T。（2）GDF9基因的多态性检测及与产仔数性状的相关性分析:设计5条引物（引物3、引物4、引物5、引物6和引物7）扩增,引物3序列检测到1个约300bp序列的插入/缺失多态。引物4序列检测到辽宁黑猪存在2个杂合突变:3422C/T,其它猪种均为C;3427 C/T,其它猪种均为T,且这两个突变距离很近。引物5序列检测到2个多态:辽宁黑猪存在杂合,其它猪均为纯和。引物6序列检测到6个多态,其中还有1个杜洛克3bp序列的缺失。引物7序列的突变同引物6,设计短序列主要为了使用SSCP技术检测品种间差异。对插入/缺失多态与产仔数进行相关性分析,研究表明不同品种、胎次、基因型,产仔数不同基因型之间差异不显着（P>0.05）。（3）FSHβ基因的多态性检测及与产仔数性状的相关性分析:设计1条引物扩增,发现存在1个约300bp序列的插入/缺失多态。本研究表明不同品种、胎次、基因型,产仔数差异极显着（P<0.01）,BB型纯合子比AA型纯合子多产1.3头。（4）GDF9基因和FSHβ基因Alu序列插入/缺失的多态性与产仔数性状的相关性分析:使用聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction ,PCR）对辽宁黑猪、长白、大约克、丹育猪和杜洛克的FSHβ亚基基因和GDF9基因的插入片段扩增进行多态分析,和对两个插入序列进行生物信息学分析,并对产仔数建立GLM模型,探讨两个多态性与猪产仔数的关系。结果发现FSHβ亚基基因和GDF9基因以某种方式相互结合影响猪产仔数,这可能会作为猪产仔数性状的遗传标记。首次证明FSHβ亚基基因与GDF9基因在辽宁黑猪、长白、大约克、丹育猪和杜洛克猪种中与控制猪产仔数的主效基因紧密连锁。优势基因型BBDD纯合子比AACC型纯合子母猪平均每胎多产仔1.5头（p<0.01）,因此FSHβ亚基基因与GDF9基因的优势等位基因可以用于实践中改良猪的产仔数性状。
杨玉敏[8]（2009）在《黄淮山羊FSHβ基因部分序列遗传多态性及其与产羔性能关联性研究》文中提出促卵泡激素（Follicle-stimulating hormone,FSH）是由垂体前叶分泌的糖蛋白类促性腺激素,在下丘脑-垂体-性腺繁殖轴中起到重要的作用。FSH由α和β两个亚基组成,其中α亚基为hCG、LH、TSH等糖蛋白激素所共有;而特异性的β亚基则决定其特异性结合位点及其生物学功能。本研究以高繁殖力山羊品种（黄淮山羊）、低繁殖力山羊品种（波尔山羊）为对象,研究FSHβ基因第1外显子和第2外显子的单链核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）及其与黄淮山羊繁殖力之间的关系。根据GenBank中发表的绵羊FSHβ基因外显子1和外显子2的序列设计5对引物,对山羊FSHβ基因的部分序列进行了克隆测序;采用PCR-SSCP技术分别检测黄淮山羊和波尔山羊在FSHβ基因外显子2的突变位点,并分析基因多态性及其与黄淮山羊产羔性状间的相关性。结果表明:1.在5对引物中,有1对引物扩增片段存在多态性,P5引物扩增序列的突变位点位于FSHβ基因外显子2上。2.黄淮山羊与绵羊FSHβ基因exon 2的序列的中有8个碱基发生突变,其同源性为96.8%。3.在黄淮山羊中检测到AA、AB和AC三种基因型。测序分析发现AB型基因与AA型基因相比在47bp处C→T和147bp处C→T两处突变;AC型基因与AA型基因相比在147bp处C→T和156bp处G→A两处突变。4.群体遗传学分析表明,黄淮山羊P5引物检测到三个等位基因频率分别为0.9257、0.0608和0.0135,三种基因型（AA、AB和AC）频率分别为0.8514、0.1216和0.0270。χ2适合度检验表明,引物P5在黄淮山羊群体中检测到的基因型分布保持Hardy-Weinberg平衡。波尔山羊P5引物检测到的等位基因频率分别为0.9666和0.0444;其对应的基因型（AA、AB）频率分别为0.9333和0.0667。χ2检验表明,引物P5在波尔山羊群体中检测到的基因型分布也保持Hardy-Weinberg平衡。5.相关分析表明,在黄淮山羊群体中,AA基因型黄淮山羊产羔数比AB基因型的多0.37只（P<0.05）,比AC基因型的多0.76只（P<0.05）;AB与AC基因型的产羔数差异不显着。
向德标,黄生强,欧阳叙向[9]（2008）在《家畜繁殖性状遗传基因研究进展》文中指出家畜的繁殖性状是受多基因控制的,本文综述了现已发现的与家畜多胎性状有关的基因和QTL,如FSH基因、FSH基因、LHR基因、ESR基因、GDF9基因、GDF9B基因和FecB等.通过分析这些基因或QTL位点的作用、遗传方式及基因定位,旨在为利用分子育种技术进行标记辅助选择,培育出高繁殖力家畜品系提供科学依据.
孙瑞萍[10]（2008）在《西农萨能奶山羊和波尔山羊部分经济性状的PCR-SSCP标记研究》文中研究表明本研究以西农萨能奶山羊和波尔山羊2个品种共计260个个体为材料,利用生物信息学、DNA测序、DNA序列分析、PCR-SSCP技术研究了山羊PRLR基因（intron1、2,exon10）、PRL基因（5’端）、GHR基因（exon9、10）以及LHβ基因（5’端、exon2、exon3）共4个候选基因16个位点遗传变异,同时探讨山羊群体遗传多态性及其与经济性状（产奶量、产羔数）的关系,旨在获取相应的分子遗传学信息,找到与经济性状相关的DNA标记,为山羊遗传资源保护、开发与利用提供科学依据。本研究获得以下重要结果:1山羊PRLR基因遗传变异位点与经济性状的关系1.1 PRLR基因内含子Ⅰ和Ⅱ位点与经济性状的关系针对PRLR基因内含子Ⅰ和Ⅱ设计的2对引物中,引物P1不存在多态,3处突变导致引物P2位点多态,共发现GG、GH、HH 3种基因型,2个山羊群体都以GG型为主;其基因型和等位基因分布与西农萨能奶山羊的产奶量和产羔数之间不存在显着相关（P>0.05）;该位点与波尔山羊产羔数之间存在显着相关（P<0.01）,如:引物P2位点多态的GH基因型在第5胎产羔数极显着高于GG型个体（P<0.01）,第3胎也显着高于GG型（P<0.05）。1.2 PRLR基因外显子10位点与经济性状的关系在针对PRLR基因外显子10设计的4对引物的PCR-SSCP分析中,发现仅引物P3不存在多态性,引物P4、P5与P6扩增片段具有多态性。应用P4扩增片段,在2个品种中仅检测到AA型和AB型,纯化测序表明AA型与AB型相比有2处突变,27C→T的突变没有导致氨基酸变化,第189处的碱基缺失导致氨基酸由组氨酸变为酪氨酸和苏氨酸。AA和AB基因型之间产奶量的最小二乘均值差异显着（P<0.05）,AA基因型在各胎次产奶量和平均产奶量等指标上均高于AB基因型,其中第三胎的产奶量达到显着水平（P<0.05）;应用P5扩增片段,只检测到三种基因型（CC、CD、DD）,纯化测序表明CC型与DD型相比有2处突变（103C→A和106T→C）,分别导致氨基酸由赖氨酸变为苏氨酸、苏氨酸变为异亮氨酸;三种基因型之间产奶量的最小二乘均值差异不显着（P>0.05）。在两个品种中,引物P5的多态都与产羔数相关。如:波尔山羊P5位点的各基因型与产羔数间存在显着相关,在第三胎产羔数指标上,CC基因型个体产羔数显着多于DD型（P<0.05）。应用P6扩增片段,在2个品种中也只检测到EE型和EF型,纯化测序表明EE型与EF型相比有1处突变（114A→G）,该突变导致氨基酸有蛋氨酸变为缬氨酸;EE和EF基因型之间产奶量差异显着（P<0.05）。EE基因型的个体各胎次产奶量均比EF型高,其中在第3、4胎产奶量和前四胎平均产奶量3项指标上都达到显着水平（P<0.05）。2山羊GHR基因遗传变异位点与经济性状的关系在山羊GHR基因Exon9和Exon10位点中,仅发现Exon9存在1处突变位点:241G→T,在两个群体中只发现两个基因型（NN,NT）,该位点仍在两个山羊中均为低度多态（PIC<0.25）。Exon9扩增位点对产奶量有显着影响:NN基因型在各胎次产奶量和平均产奶量等指标上均好于NT基因型,其中在第三胎的产奶量和第四胎产奶量2项指标上都达到显着水平（P<0.05）。在西农萨能山羊品种上,GHR基因座位的不同基因型与各胎次产羔数及平均产羔数等指标均无相关性（P>0.05）。在波尔山羊中,GHR基因NN基因型在各胎次产羔数上均好于NT基因型,且在第四胎产羔数上NN型个体优于NT型个体（P<0.05）。3山羊LHβ基因遗传变异位点与产羔数的关系应用PCR-SSCP技术对两个山羊品种进行LHβ基因多态性分析,在设计的6对引物中,山羊LHβ基因P1与P5（exon2）存在153C→A和64T→C突变位点,它们与山羊的产羔数之间存在显着相关,P1引物位点多态与波尔山羊第3胎产羔数和第4胎产羔数显着相关:PP型个体第3胎和第4胎产羔数均极显着高于PQ型个体（P<0.01）;此位点多态在西农萨能奶山羊第4胎和第5胎产羔的差异显着（P<0.05）;在引物P5位点,不同基因型与产羔数之间存在显着关联:在波尔山羊中,LL型个体第4胎产羔数极显着高于LM型（P<0.01）,第5胎产羔数显着高于LM型（P<0.05）。
二、山羊卵泡刺激素β-亚基cDNA的分子克隆与序列分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、山羊卵泡刺激素β-亚基cDNA的分子克隆与序列分析（论文提纲范文）
（1）不同倍性鲫鲤Inhibin和Activin亚基的分子克隆及表达研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 远缘杂交研究进展 |
| 1.2 多倍体育种研究进展 |
| 1.3 异源四倍体鲫鲤品系及异源三倍体鲫 |
| 1.3.1 异源三倍体鲫的产生及生物学特性 |
| 1.3.2 异源三倍体鲫育性相关研究 |
| 1.4 Activin和 Inhibin的研究进展 |
| 1.4.1 Activin和 Inhibin的分类和结构 |
| 1.4.2 Activin和 Inhibin的信号通路 |
| 1.4.3 Activin和 Inhibin的生物学功能 |
| 1.4.4 Activin和 Inhibin在鱼类中的研究进展 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 第二章 inhibinα的基因克隆 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 inhibinα基因全长c DNA序列分析 |
| 2.2.2 Inhibinα基因氨基酸序列的同源性分析 |
| 2.2.3 Inhibinα进化树的构建 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 inhibinα基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫组织中的表达分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 inhibinα基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫不同组织中的表达分析 |
| 3.2.2 inhibinα基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫卵巢中的表达分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 activinβA和βB在二倍体红鲫和异源三倍体鲫组织中的表达分析和定位分析 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 activinβA和 activinβB基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫不同组织中的表达分析 |
| 4.2.2 activinβA和 activinβB基因在二倍体红鲫和异源三倍体鲫卵巢和垂体中的表达分析 |
| 4.2.3 ActivinβA和 ActivinβB蛋白在二倍体红鲫和异源三倍体鲫卵巢中的定位分析 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）梅花鹿促卵泡激素α亚基基因克隆与融合表达（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 质粒与菌株 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 pGEX-6P-2/FSHα原核表达系统的制备 |
| 1.3.1 PCR扩增FSHα亚基DNA序列 |
| 1.3.2 PCR产物回收、TA克隆 |
| 1.3.3 重组质粒的构建和鉴定 |
| 1.4 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 |
| 1.5 SDS-PAGE鉴定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 PCR扩增 |
| 2.2 pMD18-T-FSHα质粒的酶切及测序鉴定 |
| 2.3 重组质粒pGEX-6P-2-FSHα的酶切及测序鉴定 |
| 2.4 重组GST-FSHα融合蛋白表达及SDS-PAGE鉴定 |
| 3 讨论 |
（3）梅花鹿卵泡刺激素原核表达研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第1章 文章综述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 卵泡刺激素的研究进展 |
| 1.2.1 卵泡刺激素简介 |
| 1.2.2 相同的α亚基 |
| 1.2.3 不同的β亚基 |
| 1.2.4 国内外FSH的研究进展简介 |
| 1.3 FSH的作用机理 |
| 1.3.1 FSH的基因结构 |
| 1.3.2 FSH的生理作用 |
| 1.3.3 FSH的合成与代谢 |
| 1.3.4 FSH作用的分子机制 |
| 1.4 本实验研究的目的和意义 |
| 第2章 梅花鹿FSHα/β亚基的基因克隆 |
| 2.1 主要实验仪器和药品 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 菌株与载体 |
| 2.1.3 工具酶及试剂 |
| 2.1.4 培养基 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 含梅花鹿FSHα/β亚基的质粒DNA的提取 |
| 2.2.2 紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA |
| 2.2.4 PCR克隆梅花鹿FSHα/β亚基 |
| 2.2.5 0.2 mL微量离心管中配置PCR反应各成分 |
| 2.2.6 PCR产物切胶回收 |
| 2.2.7 E.coli JM109感受态细胞制备 |
| 2.2.8 TA克隆 |
| 2.2.9 转化 |
| 2.2.10 重组质粒的筛选、鉴定及测序 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 梅花鹿FSHα/β亚基基因克隆及回收纯化 |
| 2.3.2 FSHα/β基因片段与pMD18-T Vector连接、转化 |
| 2.3.3 重组质粒的筛选、鉴定及测序 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 梅花鹿FSHα/β亚基表达载体构建 |
| 3.1 主要实验仪器和药品 |
| 3.1.1 实验仪器 |
| 3.1.2 菌株与载体 |
| 3.1.3 工具酶及试剂 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 表达载体pGEX-6p-2质粒的大量制备 |
| 3.2.2 表达载体pGEX-6p-2酶切,胶回收载体片段 |
| 3.2.3 目的基因酶切,回收 |
| 3.2.4 目的基因与酶切载体连接及转化 |
| 3.2.5 重组质粒鉴定 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 表达载体pGEX-6p-2质粒提取及酶切 |
| 3.3.2 表达载体pGEX-6p-2与FSHα/β的连接、转化 |
| 3.3.3 重组质粒α/β-P的鉴定 |
| 第4章 融合蛋白表达及鉴定 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 菌株与载体 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 主要药品的配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 感受态细胞BL21的制备 |
| 4.2.2 重组表达载体转化BL21 |
| 4.2.3 菌落PCR检测重组菌 |
| 4.2.4 融合蛋白的诱导、表达 |
| 4.2.5 SDS-PAGE电泳检测表达蛋白 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 载体胶回收及转化BL21感受态细胞 |
| 4.3.2 诱导、表达及SDS-PAGE电泳检测 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士期间发表论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（4）蒙古羊BMPR-IB、FSHβ基因克隆与表达及卵巢组织差异表达基因研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 卵泡的发育模式及调控 |
| 1.1.1 卵泡发育的基本模式 |
| 1.1.2 下丘脑-垂体-卵巢轴在卵泡发育过程中的作用 |
| 1.1.3 生长因子对卵泡发育的调控 |
| 1.2 BMPR-IB 基因作为绵羊繁殖性状候选基因的研究进展 |
| 1.2.1 骨形态发生蛋白家族及BMPR-IB 基因的发现 |
| 1.2.2 BMPR-IB 基因的结构及染色体定位 |
| 1.2.3 BMPR-IB 基因对绵羊繁殖性能的影响 |
| 1.3 FSHβ基因的研究进展 |
| 1.3.1 FSHβ基因的结构 |
| 1.3.2 FSHβ基因与动物繁殖性状的关系 |
| 1.4 FSH 与 BMPs 信号传导通路及相互调控机制 |
| 1.5 本研究中所采用主要方法简介 |
| 1.5.1 实时荧光定量 PCR（Real-time Quantitative PCR，RQ-PCR） |
| 1.5.2 抑制性消减杂交技术 |
| 1.5.3 电子克隆技术（Silicon Cloning） |
| 1.6 本研究的目的、意义及主要研究内容 |
| 2 实验一 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ基因的cDNA 克隆与序列分析 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物及其组织 |
| 2.1.2 菌株和载体 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 |
| 2.1.5 实验常用溶液和试剂的配制 |
| 2.1.6 主要分子生物学软件及相关网站 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 卵巢组织总RNA 的提取 |
| 2.2.2 RT-PCR 反应过程 |
| 2.2.3 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ基因的克隆与测序 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 蒙古羊卵巢组织总RNA 的提取结果 |
| 2.3.2 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ基因的RT-PCR 扩增结果 |
| 2.3.3 扩增产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 |
| 2.3.4 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ基因的测序结果及序列拼接 |
| 2.3.5 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ基因序列分析 |
| 2.3.6 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ蛋白结构分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 BMPR-IB 基因对绵羊繁殖性能的调控 |
| 2.4.2 FSHβ基因对绵羊繁殖性能的调控 |
| 2.5 小结 |
| 3 实验二 蒙古羊BMPR-IB 和FSHβ基因在不同组织差异表达研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验动物及其组织 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 卵巢组织总RNA 的提取 |
| 3.2.2 RQ-PCR 反应过程 |
| 3.2.3 标准品的制备及标准曲线制作 |
| 3.2.4 差异表达分析方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 蒙古羊各组织总RNA 的提取结果 |
| 3.3.2 蒙古羊β-Actin、BMPR-IB 和FSHβ基因的RQ-PCR 扩增结果分析 |
| 3.3.3 蒙古羊β-Actin、BMPR-IB 和FSHβ基因的RQ-PCR 定量结果分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 关于荧光定量PCR 的引物设计 |
| 3.4.2 关于标准品的制备 |
| 3.4.3 关于相对定量的必要性 |
| 3.4.4 关于定量结果的可信度 |
| 3.4.5 BMPR-IB 和 FSHβ基因的表达与绵羊繁殖性能的关系 |
| 3.5 小结 |
| 4 实验三 单、双羔蒙古羊卵巢组织差异表达基因的筛选及鉴定 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验动物及其组织 |
| 4.1.2 主要仪器和设备 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.1.4 载体和菌株 |
| 4.1.5 实验中所需的引物序列 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 卵巢组织总RNA 的提取 |
| 4.2.2 单、双羔蒙古羊卵巢组织mRNA 的分离与纯化 |
| 4.2.3 抑制性消减杂交过程 |
| 4.2.4 差减文库的构建 |
| 4.2.5 斑点杂交（Dot Blot） |
| 4.2.6 部分差异表达基因的RQ-PCR 验证 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 总RNA 检测及纯化结果 |
| 4.3.2 cDNA 合成与 RsaI 酶切结果 |
| 4.3.3 第二轮PCR 扩增结果 |
| 4.3.4 差减文库的PCR 鉴定结果 |
| 4.3.5 斑点杂交筛选 |
| 4.3.6 差异克隆测序及序列同源性检索 |
| 4.3.7 差异表达基因的功能分析 |
| 4.3.8 部分差异表达基因的RQ-PCR 验证结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 关于差异表达基因的筛选 |
| 4.4.2 部分差异表达基因的功能分析 |
| 4.4.3 关于部分差异表达基因验证结果分析 |
| 4.5 小结 |
| 5 实验四 部分差异表达基因的电子克隆及RT-PCR 验证 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 电子克隆方法 |
| 5.2.2 RT-PCR 实验验证方法 |
| 5.2.3 蒙古羊ADAMT51 和Id3 基因的克隆与测序 |
| 5.2.4 数据分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 电子延伸结果 |
| 5.3.2 RT-PCR 扩增结果 |
| 5.3.3 测序结果及序列分析 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 关于电子克隆技术 |
| 5.4.2 ADAMT51 基因结构及在排卵中的作用 |
| 5.4.3 Id3 基因结构及生物学功能 |
| 5.5 小结 |
| 6 结论、创新点及进一步研究问题 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 需进一步研究问题 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（5）籽鹅促卵泡激素α亚基基因的克隆、序列分析及其原核表达载体的构建（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物及采样 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 总RNA的提取 |
| 1.3.2 引物设计 |
| 1.3.3 RT-PCR 在DEPC水处理过的Eppendorf管中加入Oligo (dT) 18 (50 μmol/μL) 2.0 |
| 1.3.4 PCR扩增 |
| 1.3.5 重组质粒的构建、转化、提取及鉴定 |
| 1.3.6 表达载体的构建 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 总RNA的电泳检测 |
| 2.2 RT-PCR鉴定结果 |
| 2.3 序列分析 |
| 2.4 重组质粒的PCR鉴定结果 |
| 2.5 重组表达质粒的双酶切鉴定结果 |
| 3 讨论 |
（6）籽鹅促卵泡激素β亚基cDNA的分子克隆与序列分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 总RNA的提取 |
| 1.2.2 PCR引物的设计 |
| 1.2.3 RT-PCR扩增 |
| 1.2.4 PCR产物的克隆与鉴定 |
| 1.2.5 序列测定及分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 总RNA的分离 |
| 2.2 RT-PCR扩增、PCR产物克隆及其鉴定 |
| 2.3 序列分析 |
| 2.3.1 籽鹅FSHβ基因信息 |
| 2.3.2 同源性序列分析 |
| 3 讨论 |
（7）猪BMP15、GDF9和FSHβ基因的遗传多态性与产仔数的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.2 BMP15 基因和 GDF9 基因的概述和研究进展 |
| 1.2.1 BMP15 基因和GDF9 基因概述 |
| 1.2.2 BMP15 和GDF9 的研究进展 |
| 1.3 促卵泡素(Follicle Stimulating Hormone，FSH)β亚基基因的概述和研究进展 |
| 1.3.1 促卵泡素β(Follicle Stimulating Hormone beta-subunit，FSHβ)亚基基因概况 |
| 1.3.2 FSHβ亚基基因研究进展 |
| 1.3.3 FSHβ亚基基因的突变 |
| 1.3.4 FSHβ亚基基因对猪繁殖性状的影响 |
| 1.4 Alu 家族 |
| 1.4.1 Alu 序列的结构 |
| 1.4.2 Alu 序列在人类基因组中的分布 |
| 1.4.3 Alu 家族的起源和扩增 |
| 1.4.4 Alu 家族的多态性和进化 |
| 1.4.5 Alu 序列的功能 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 药品种类 |
| 2.1.3 试剂的配制及保存 |
| 2.1.4 主要仪器设备 |
| 2.1.5 主要分析工具软件及在线分析网站 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 样品的采集与保存 |
| 2.2.2 猪组织样DNA 的提取 |
| 2.2.3 引物的设计与合成 |
| 2.2.4 PCR 扩增 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果分析 |
| 3.1 猪样品DNA 提取结果 |
| 3.2 PCR 扩增 |
| 3.3 测序结果 |
| 3.4 引物3 和引物8 的PCR 产物序列比对 |
| 3.5 引物7 的PCR 产物序列中3 个位点的PCR-SSCP |
| 3.6 统计分析结果 |
| 3.6.1 FSHβ亚基基因、胎次与产仔数关系 |
| 3.6.2 GDF9 基因、胎次与产仔数关系 |
| 3.6.3 GDF9 和FSHβ结合基因型、胎次与产仔数关系 |
| 4 讨论 |
| 4.1 样品DNA 的提取 |
| 4.2 PCR 扩增 |
| 4.2.1 模板的质量 |
| 4.2.2 引物的设计、使用和保存 |
| 4.2.3 引物和dNTP 的浓度 |
| 4.2.4 退火温度 |
| 4.2.5 退火时间 |
| 4.2.6 循环数 |
| 4.3 FSHβ亚基基因与GDF9 基因插入相同点 |
| 4.3.1 两个基因均位于2 号染色体 |
| 4.3.2 两个基因型插入多态性导致产仔数变化 |
| 4.3.3 关于Alu 序列 |
| 4.3.4 Alu 序列作为人类基因组标记物的应用 |
| 4.3.5 FSHβ亚基基因与GDF9 基因插入不同点 |
| 4.4 进一步的工作 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的论文 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（8）黄淮山羊FSHβ基因部分序列遗传多态性及其与产羔性能关联性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 畜禽育种与主基因 |
| 1.1.1 畜禽主基因的研究现状 |
| 1.1.2 主基因的检测方法 |
| 1.1.3 主基因研究的意义和前景 |
| 1.2 山羊繁殖力性状候选基因的研究进展 |
| 1.2.1 生长分化因子9 基因 |
| 1.2.2 催乳素受体基因 |
| 1.2.3 褪黑素受体基因 |
| 1.2.4 骨形态发生蛋白15 基因 |
| 1.3 促卵泡激素研究进展 |
| 1.3.1 促卵泡激素及其生物学效应 |
| 1.3.2 FSHβ基因结构 |
| 1.3.3 FSHβ基因的克隆和定位 |
| 1.3.4 FSHβ基因突变与动物生殖关系的研究 |
| 1.4 PCR-SSCP |
| 1.4.1 SSCP 基本原理 |
| 1.4.2 PCR-SSCP 技术在动物育种中的应用 |
| 1.4.3 PCR-SSCP 在羊遗传育种中的应用 |
| 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验山羊来源及采样方法 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 菌株和载体 |
| 2.1.4 主要实验仪器 |
| 2.1.5 软件工具 |
| 2.1.6 溶液试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 羊血液DNA 的提取 |
| 2.2.2 DNA 浓度和纯度测定 |
| 2.2.3 引物设计 |
| 2.2.4 PCR 扩增 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳检测 |
| 2.2.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| 2.2.7 FSHβ基因克隆和测序 |
| 2.2.8 数据统计分析方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 FSHβ基因的PCR 扩增 |
| 3.2 SSCP 分析 |
| 3.3 黄淮山羊和绵羊FSHβ基因部分序列测定及同源性比较 |
| 3.4 不同基因型个体的克隆测序结果及其多态性分析 |
| 3.5 基因群体遗传学分析 |
| 3.5.1 FSHβ基因频率和基因型频率 |
| 3.5.2 FSHβ基因的Hardy-Weinberg 平衡检验 |
| 3.5.3 FSHβ基因的遗传特性分析 |
| 3.5.4 FSHβ基因与黄淮山羊产羔数的关联分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 山羊FSHβ基因的部分序列比较分析 |
| 4.2 山羊FSHβ基因的突变及其多态性分析 |
| 4.3 黄淮山羊和波尔山羊FSHβ基因群体遗传结构 |
| 4.4 黄淮山羊FSHβ基因型与产羔性能的相关性分析 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（9）家畜繁殖性状遗传基因研究进展（论文提纲范文）
| 1 FSH基因 |
| 1.1 FSH基因结构的研究 |
| 1.2 FSH基因与动物繁殖性能关系的研究 |
| 2 FSHR基因 |
| 2.1 FSHR基因结构的研究 |
| 2.2 FSHR基因与动物繁殖性能关系的研究 |
| 3 LHR基因 |
| 3.1 LHR基因的结构研究 |
| 3.2 LHR与动物繁殖性能关系的研究 |
| 4 ESR基因 |
| 4.1 ESR基因的结构研究 |
| 4.2 ESR基因与动物繁殖性能关系研究 |
| 5 GDF9和GDF9B基因 |
| 6 FecB基因 |
| 6.1 FecB基因结构的研究 |
| 6.2 FecB基因与动物繁殖性能关系的研究 |
| 6.2.1 对卵巢发育的影响 |
| 6.2.2 对动物排卵、发情的影响 |
| 6.2.3 对胚胎和羔羊发育的负影响 |
| 7 展望 |
（10）西农萨能奶山羊和波尔山羊部分经济性状的PCR-SSCP标记研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文献综述 |
| 第一章 西农萨能奶山羊和波尔山羊遗传特性及生产性能 |
| 1.1 西农萨能奶山羊 |
| 1.2 波尔山羊 |
| 第二章 分子遗传标记与动物遗传育种 |
| 2.1 分子标记的分类 |
| 2.2 几种常用的分子遗传标记的原理及特点 |
| 2.2.1 RFLP 标记 |
| 2.2.2 微卫星标记 |
| 2.2.3 PCR-SSCP 标记 |
| 2.2.4 单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP) |
| 2.3 分子标记在动物遗传育种中的应用 |
| 2.3.1 动物品种、品系和类群的鉴定 |
| 2.3.2 QTL 主基因的定位与遗传图谱的构建 |
| 2.3.3 动物遗传标记辅助选择 |
| 2.3.4 动物杂种优势预测 |
| 第三章 山羊部分经济性状相关的分子标记研究进展 |
| 3.1 产奶性状相关的分子标记研究进展 |
| 3.1.1 乳蛋白基因多态与产乳性状的相关性 |
| 3.1.2 催乳素及其受体基因多态性与产乳性状的相关性 |
| 3.1.3 核外基因和产乳性状的相关性 |
| 3.1.4 Weaver 基因及其他基因座和产乳性状的关系 |
| 3.1.5 生长激素基因和生长激素受体基因和产乳性状的关系 |
| 3.1.6 IGFs 和IGFBP3 与和产乳性状的关系 |
| 3.1.7 MHC 基因多态与产乳性状的相关性 |
| 3.1.8 POU1Fl 基因与产奶性状的相关性 |
| 3.2 繁殖性状的分子标记研究进展 |
| 3.2.1 FecB 基因和酪蛋白基因 |
| 3.2.2 雌激素（ES）和雌激素受体(ESR) |
| 3.2.3 卵泡刺激素（FSH）和促卵泡激素受体（FSHR）基因 |
| 3.2.4 PRL、PRLR 基因与PROP1-POU1F1 调控家族基因 |
| 3.2.5 IGFs 和IGFBP3 基因 |
| 3.2.6 生长激素和生长激素受体基因与产羔性状的关系 |
| 第四章 影响山羊经济性状候选基因的研究进展 |
| 4.1 催乳素（PRL）基因研究进展 |
| 4.1.1 PRL 的分子结构和生理功能 |
| 4.1.2 PRL 基因多态及其与经济特性的关系 |
| 4.2 催乳素受体(PRLR)及其基因的研究进展 |
| 4.2.1 PRLR 的结构、功能和调控 |
| 4.2.2 PRLR 基因多态性与经济特性的关系 |
| 4.3 GHR 基因的研究进展 |
| 4.3.1 GHR 基因的结构 |
| 4.3.2 GHR 基因多态性与经济特性的关系 |
| 4.4 LH 基因的研究进展 |
| 4.4.1 促黄体素的生理功能 |
| 4.4.2 促性腺激素的结构特点 |
| 4.4.2.1 α-亚基 |
| 4.4.2.2 β-亚基 |
| 4.4.3 各物种的促黄体素β亚基基因的研究现状 |
| 4.4.3.1 绵羊促黄体素的β亚基基因 |
| 4.4.3.2 牛促黄体素β亚基基因 |
| 4.4.3.3 猪促黄体素亚β亚基基因 |
| 4.4.4 促黄体素基因的研究作用 |
| 4.5 LH 基因多态及其与产羔数的关系 |
| 第二部分 试验研究 |
| 第五章 山羊PRLR 基因遗传变异分析及其与经济性状的关系 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 试验材料与方法 |
| 5.2.1 试验材料 |
| 5.2.1.1 试验动物与产奶量、产羔数的记录 |
| 5.2.1.2 试验药品与试剂 |
| 5.2.1.3 仪器设备 |
| 5.2.2 试验方法 |
| 5.2.2.1 基因组DNA 的分离 |
| 5.2.2.2 DNA 质量的检测、纯化及浓度计算 |
| 5.2.2.3 PRLR 基因引物的设计及PCR 反应 |
| 5.2.3 PCR-SSCP 分析 |
| 5.2.3.1 PCR-SSCP 的试剂准备与配置 |
| 5.2.3.2 PCR-SSCP 分析 |
| 5.2.3.3 照相分析与SSCP 带型的判定 |
| 5.2.3.4 DNA 测序技术研究SSCP 片断及序列遗传变异分析 |
| 5.2.4 统计分析 |
| 5.2.4.1 遗传多态性分析 |
| 5.2.4.2 统计分析模型 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 试验羊基因组DNA 样品的电泳检测 |
| 5.3.2 PCR 扩增结果 |
| 5.3.3 SSCP 分析 |
| 5.3.4 DNA 测序结果 |
| 5.3.5 遗传变异位点分析 |
| 5.3.6 山羊PRLR 基因多态位点频率分布及群体遗传结构分析 |
| 5.3.7 PRLR 基因多态性与经济性状的关系 |
| 5.3.7.1 PRLR 基因多态与西农萨能奶山羊产奶性状的关系 |
| 5.3.7.2 PRLR 基因多态与山羊产羔数的关系 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 PRLR 基因的遗传多态性及其对西农萨能奶山羊产奶量的影响 |
| 5.4.2 PRLR 基因遗传多态性与产羔数的关系 |
| 5.4.2.1 PRLR 内含子多态性及其与产羔数的相关性 |
| 5.4.2.2 PRLR 外显子10 多态性及其与产羔数的相关性 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 山羊PRL 基因遗传变异分析及其与山羊经济性状的关系 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 PCR 引物的设计 |
| 6.2.2 PCR 扩增反应体系与反应程序 |
| 6.3 实验结果 |
| 6.3.1 两个品种PRL 基因5’端的PCR 扩增结果 |
| 6.3.2 两个品种PRL 基因5’端的PCR-SSCP 分析 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 山羊GHR 基因遗传变异分析及其与山羊经济性状的关系 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 材料与方法 |
| 7.2.1 PCR 引物的设计 |
| 7.2.2 PCR 扩增反应体系与反应程序 |
| 7.3 结果与分析 |
| 7.3.1 GHR 基因的PCR 和PCR-SSCP 分析 |
| 7.3.2 DNA 测序结果及序列分析 |
| 7.3.3 山羊GHR 基因多态位点频率分布及群体遗传结构分析 |
| 7.3.4 GHR 基因多态性与经济性状的关系 |
| 7.3.4.1 GHR 基因多态与西农萨能奶山羊产奶性状的关系 |
| 7.3.4.2 GHR 基因多态与两个山羊品种产羔数的关系 |
| 7.4 讨论 |
| 7.4.1 GHR 基因多态性对产奶性能的影响 |
| 7.4.2 GHR 基因多态与产羔数的关系 |
| 7.5 小结 |
| 第八章 山羊LHΒ基因遗传变异分析及其与山羊繁殖性状的关系 |
| 8.1 引言 |
| 8.2 材料与方法 |
| 8.2.1 PCR 引物的设计 |
| 8.2.2 PCR 扩增反应体系与反应程序 |
| 8.3 结果与分析 |
| 8.3.1 LHβ基因的PCR 扩增结果 |
| 8.3.2 LHβ基因的PCR-SSCP 分析 |
| 8.3.3 DNA 测序结果及序列分析 |
| 8.3.4 遗传变异位点分析 |
| 8.3.5 山羊LHβ基因多态位点频率分布及群体遗传结构分析 |
| 8.3.6 LHβ基因多态性与山羊产羔数的关系 |
| 8.4 讨论 |
| 8.5 小结 |
| 第九章 结论及创新点 |
| 9.1 结论 |
| 9.2 创新点 |
| 9.3 进一步需要研究的问题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、山羊卵泡刺激素β-亚基cDNA的分子克隆与序列分析（论文参考文献）
- [1]不同倍性鲫鲤Inhibin和Activin亚基的分子克隆及表达研究[D]. 胡虹. 湖南师范大学, 2020(01)
- [2]梅花鹿促卵泡激素α亚基基因克隆与融合表达[J]. 张建肖,关洪斌. 中国畜牧兽医, 2010(06)
- [3]梅花鹿卵泡刺激素原核表达研究[D]. 张建肖. 山东大学, 2010(09)
- [4]蒙古羊BMPR-IB、FSHβ基因克隆与表达及卵巢组织差异表达基因研究[D]. 何小龙. 内蒙古农业大学, 2010(10)
- [5]籽鹅促卵泡激素α亚基基因的克隆、序列分析及其原核表达载体的构建[J]. 郭景茹,杨焕民,蔡军,李鹏,康波. 中国畜牧兽医, 2009(11)
- [6]籽鹅促卵泡激素β亚基cDNA的分子克隆与序列分析[J]. 蔡军,杨焕民,李鹏,郭丽. 中国畜牧兽医, 2009(10)
- [7]猪BMP15、GDF9和FSHβ基因的遗传多态性与产仔数的相关性研究[D]. 张璐. 河北农业大学, 2009(10)
- [8]黄淮山羊FSHβ基因部分序列遗传多态性及其与产羔性能关联性研究[D]. 杨玉敏. 安徽农业大学, 2009(07)
- [9]家畜繁殖性状遗传基因研究进展[J]. 向德标,黄生强,欧阳叙向. 怀化学院学报(自然科学), 2008(03)
- [10]西农萨能奶山羊和波尔山羊部分经济性状的PCR-SSCP标记研究[D]. 孙瑞萍. 西北农林科技大学, 2008(01)