N末端脑利钠肽前体电化学发光检测方法的建立

N末端脑利钠肽前体电化学发光检测方法的建立

论文摘要

目的建立一种定量检测人血清中N末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)的基于三联吡啶钌的电化学发光免疫分析方法。方法以双抗体夹心法为原理,以生物素和三联吡啶钌标记NT-proBNP的单克隆抗体,以链霉亲和素包被磁微粒,建立一种以磁颗粒-链霉亲和素-生物素系统实现固相和液相分离的电化学发光免疫分析方法(eCLIA)。结果本研究建立的分析方法,其最低检测限可达2.39 pg/mL,线性范围为5~35 000 pg/mL,批内变异小于8%,批间变异小于8%,与罗氏公司NT-proBNP检测试剂盒相关系数r=0.9957,可报告范围为5~137 844 pg/mL。试剂盒整体置于37℃7 d,各性能指标不变,试剂稳定性良好。试剂抗干扰性能良好。结论该方法具有灵敏度高、线性范围广、稳定性好、受环境影响小、检测结果准确等特点,各项指标均达到临床检测要求,适合临床推广使用。

论文目录

  • 材料和方法
  •   1 实验仪器和材料
  •     1.1 实验仪器
  •     1.2 主要试剂
  •     1.3 样本来源
  •   2 方法的建立
  •     2.1 单克隆抗体的制备
  •     2.2 磁颗粒的工作浓度
  •     2.3 校准品的制备
  •     2.4 反应过程
  •     2.5 试剂盒的优化
  •   3 方法学评价
  •     3.1 分析灵敏度
  •     3.2 线性
  •     3.3 准确度
  •     3.4 精密度
  •     3.5 建立参考范围
  •     3.6 热稳定性
  •     3.7 方法学比对
  •     3.8 抗干扰性研究
  •     3.9 可报告范围研究
  • 结 果
  •   1 校准品定值
  •   2 试剂盒优化
  •     2.1 标记抗体浓度选择
  •     2.2 样本加样量选择
  •     2.3 体系稀释液的选择
  •     2.4 抗原基质的选择
  •   3 方法学评价
  •     3.1 分析灵敏度
  •     3.2 线性
  •     3.3 准确度
  •     3.4 批内变异及总变异
  •     3.5 正常参考值建立
  •     3.6 热稳定性评价
  •     3.7 方法学比对
  •     3.8 抗干扰性研究
  •     3.9 可报告范围
  • 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 魏雪梅,梁辰,薛辉,冯杰,邓文斌,周桂生,曾映,周明,颜光涛

    关键词: 末端脑利钠肽前体,链霉亲和素生物素,三联吡啶钌,电化学发光法

    来源: 标记免疫分析与临床 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 临床医学

    单位: 解放军总医院第一医学中心医学检验中心

    基金: 广东省引进创新创业团队计划资助(编号:2014ZT05S003),深圳市海外高层次人才创新创业资金(编号:KQTD2014063010175739),国家科技支撑计划(编号:2015BAK45B01)

    分类号: R446.6

    页码: 2130-2134+2155

    总页数: 6

    文件大小: 1683K

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