徐志鹏[1]2003年在《波尔山羊胚胎移植及配子移植研究》文中指出波尔山羊原产于南非，是目前世界上最优秀的肉用山羊品种。它具有体形大、适应性强、生长速度快，产肉率高、抗病力强等特点，在世界山羊品种改良中起着非常重要的作用。而目前波尔山羊的数量尚少，发展太慢远远跟不上生产的需求。运用超数排卵-胚胎移植技术可以加速国内波尔山羊扩大种群。由于受生殖器官解剖学特点的限制，至今尚未建立一种令人满意的山羊超数排卵、胚胎采集、移植方法。本研究对胚胎移植中超数排卵、腹腔镜检查的准确性、胚胎采集与移植方法等方面进行了探讨，试图建立起一套完整的胚胎移植程序，为以后分割胚胎、细胞核移植、体外受精、转基因动物等技术建立基础。 论文首先对波尔山羊胚胎移植方法进行探讨。用叁种方法对供体波尔山羊进行超数排卵处理。方法一，供体羊D0天置栓同时注射雌二醇，D12天开始用国产FSH进行超排连续四天，D13天下午撤栓，FSH使用总剂量为280IU．方法二，供体羊不用栓处理，于D0天注射PG0.6ml／只，D15天开始用国产FSH进行超排连续四天，于D17天下午注射PG0.6ml／只，FSH使用总剂量为280IU．方法叁，供体羊于D0天置进口栓CIDR，于D12天换栓，D12天下午开始超排，超排所用FSH为进口试剂，一种澳大利亚产，所用剂量为25NIH／只，另一种加拿大产，所用剂量为300ms／只。通过腹腔镜技术检查供体羊卵巢超排情况，其中方法一、二超数排卵效果不佳，与不用激素处理没有差异。方法叁中，用加拿大产FSH共处理5只供体羊，其中有叁只回收到的是未受精卵，其余两只共回收到20枚胚胎，移植到受体徐淮白山羊体内，最后仅产仔2只，表明卵母细胞的受精质量不好，这可能与所用激素剂量过大有关。用澳大利亚产FSH处理的7只供体羊，共回收到可用胚胎91枚，移植到54只受体羊中，最后产仔43只，出生率达47.3％。取得了较好的结果。 尝试利用配子输卵管移植技术解决胚胎移植中遇到的波尔山羊不育问题。将从两只供体波尔山羊采集到的9枚卵母细胞和获能精子移植到4头受体徐淮白山羊中，另30枚采自当地羊和杂交波尔山羊的卵母细胞移植到8只受体中，结果9枚波尔山羊卵母细胞移植受体羊均未受孕，而当地羊和杂交羊卵母细胞移植受体羊有叁只受孕产羔，共产仔5只，配子受精发育率为13％，初步验证了配子移植术在山羊上开展的可能性。 硕士学位论文 徐志鹏：波尔山羊胚胎移植与配子移植研究 前次配于移植研究结果未能有纯种波尔山羊出生，这可能与卵母细胞移植到输卵管中时的成熟状态以及精子活力情况有关。因此我们将采得的波尔山羊卵母细胞进行成熟培养，成熟培养系统采用TCM199＋10pg／ml FSH＋20pg／ml LH＋lpg／m 176－EZ＋10％ EGS，共采集到9枚卵母细胞，26’J＼时后，有6枚卵丘细胞扩散良好，判断为成熟。精子于含有咖啡因和肝素钠的培养系统中进行获能处理，将成熟培养后的卵母细胞和获能精于一起移植到四只受体羊的输卵管中，结果有两只羊已经妊娠。初步表明卵母细胞的成熟培养有利于提高配子移植的成功率。 本研究中成功的建立了波尔山羊胚胎移植及配子移植系列技术，为以后大规模的开展胚胎移植工作奠定基础，同时，为开展山羊胚胎工程其它研究提供借鉴。
王公金, 徐小波, 赵伟, 孙梅, 王瑞勇[2]2004年在《波尔山羊卵巢卵母细胞的体外培养与体外受精》文中研究说明以10只不孕不育波尔母山羊群为试验动物穴供体雪,采用超数排卵、活体采卵、卵母细胞体外成熟培养以及体外受精等技术方法,探讨有繁殖障碍波尔山羊群体繁育正常后代的有效技术途径。在该实验中试验动物中7只经超数排卵处理后诱导发情,利用特制的采卵装置成功地进行了6只供体的活体采卵熏从10个卵巢上成功地采集到30枚形态学正常的卵母细胞。经体外成熟培养后24枚成熟卵母细胞进行了体外受精处理,获得16枚正常受精卵,移植到4只同期发情的当地山羊受体输卵管内,经3个月妊娠检验判定,其中两只受体受孕。该研究为解决不孕不育波尔山羊群繁殖后代的难题探索出一条新途径。
徐志鹏, 王公金, 张锡然, 孙贝加, 赵伟[3]2002年在《山羊配子输卵管内移植受精技术》文中提出以2只屡配不孕"波尔山羊"、1只F2代杂交波尔山羊、6只"徐淮白山羊"为卵子供体,经同期发情和超排处理,腹腔镜观察卵巢卵泡发育状况后筛选出供手术采卵供体。从7只供体中采集到可用卵子39枚,采用输卵管内配子移植(GIFT)技术植入受体徐淮母羊12只。移植后连续3个发情周期妊娠鉴定表明,12只受体中有6只未返情,妊娠率为50%。2只受体产单羔,1只受体产3羔(难产)。共移植39枚卵子,5枚发育为后代,配子受精发育率为13%。
参考文献：
[1]. 波尔山羊胚胎移植及配子移植研究[D]. 徐志鹏. 南京师范大学. 2003
[2]. 波尔山羊卵巢卵母细胞的体外培养与体外受精[J]. 王公金, 徐小波, 赵伟, 孙梅, 王瑞勇. 畜禽业. 2004
[3]. 山羊配子输卵管内移植受精技术[J]. 徐志鹏, 王公金, 张锡然, 孙贝加, 赵伟. 江苏农业学报. 2002