导读:本文包含了型口蹄疫基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:口蹄疫,病毒,基因,宿主,疫苗,载体,佐剂。
型口蹄疫基因论文文献综述
邹兴启,朱元源,包慧芳,孙普,郭晓宇[1](2019)在《宿主细胞基因序列插入亚洲1型口蹄疫病毒导致病毒对牛的致病性减弱的研究》一文中研究指出1株Asia 1型口蹄疫疫苗毒株在BHK21悬浮培养细胞中传代时与宿主BHK21细胞m RNA重组,导致VP1第206位与第207位氨基酸之间插入了VDLV序列,该插入突变使得疫苗免疫效果大幅下降,不能产生有效保护。比较发现,含12 nt插入序列的变异毒株(Vac-Asia1-VDLV)与亲本毒株(Asia 1/HN/06)在BHK21细胞上的生长曲线存在较大差异,变异毒株可感染CHO-K1,pgsA-745,pgsB-618,pgsD-677细胞,毒价可达到1×105PFU/mL以上,而亲本毒不能感染CHO类细胞并产生蚀斑。动物试验结果显示,乳鼠半数致死量(LD50)与亲本毒株相比变化不明显。但牛感染试验表明,大剂量(1×107LD50)接种牛舌面,Vac-Asia1-VDLV不引起体温反应和其它临床症状,荧光定量PCR检测鼻拭子和血液时未发现病毒,而Asia 1/HN/06引起典型的口蹄疫症状,鼻拭子和血液中检出病毒。上述试验结果表明,与亲本毒相比,变异毒株Vac-Asia 1-VDLV对牛的致病性明显降低。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年02期)
李天芝,于新友[2](2018)在《口蹄疫基因工程疫苗研究进展》一文中研究指出口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-andmouth disease virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,可感染猪、牛、羊等70多种动物~([1])。该病传染性强、传播快、在世界范围广泛流行。OIE将其列在15个A类动物疫病之首,我国政府也将其排在一类动物传染病的第一位。一年四季均可发病,多发于冬、春寒冷季节~([2])。FMDV是小RNA病毒科口蹄疫病毒属,其核酸为单股正链RNA,大小约8.5kb,由L基因、P1结构(本文来源于《猪业科学》期刊2018年08期)
高雅[3](2018)在《热稳定性O型口蹄疫基因工程病毒的构建及其特性分析》一文中研究指出口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth disease Virus,FMDV)引起猪、牛和羊等偶蹄动物感染的一种重大烈性传染病,是《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020)》中的叁个单列病种之一。目前,灭活疫苗的免疫接种是预防、控制和净化口蹄疫的主要手段。但口蹄疫病毒对热极其敏感(尤其是O型口蹄疫病毒),温度升高容易诱导病毒粒子解离成五聚体亚单位(12S)而导致疫苗的有效抗原(146S)含量降低,从而影响疫苗的免疫保护效力,进而影响口蹄疫的有效防控。因此,面对目前的市场需求,急需发展一种耐热特性优良的口蹄疫鉴别诊断疫苗,有效提升我国口蹄疫疫苗质量,满足国家口蹄疫免疫净化防控的技术需求。为了发展热稳定的口蹄疫鉴别诊断疫苗候选毒株,本论文从以下3部分进行研究:1.以实验室构建的免疫原性优良的O型口蹄疫标记病毒感染性克隆pO/TAA为骨架,在结构蛋白引入单个或多个氨基酸突变,分别构建了10种基因修饰的口蹄疫全长重组质粒。全长质粒经Not I线化后分别转染表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞,共成功拯救了9株重组病毒。对重组病毒进行RT-PCR测序和间接免疫荧光鉴定,结果证明拯救的6株口蹄疫重组病毒(rvO/EN、rvO/ER、rvO/FH、rvO/FI、rvO/FN、rvO/FO)含预期的氨基酸突变。2.在不同温度和pH=6.0条件下对重组病毒进行热和酸解离实验,结果表明叁株重组病毒(rvO/EN、rvO/FN、rvO/FO)的热和酸稳定性明显优于亲本病毒。重组病毒的一步生长曲线、噬斑特性分析结果显示在结构蛋白引入不同的氨基酸突变会不同程度的影响病毒的复制能力和噬斑表型。遗传稳定性分析结果表明,重组病毒在BHK-21细胞上连续传8代,一个重组病毒(rvO/EN)引入的氨基酸发生了部分的回复,另五个病毒中引入的氨基酸稳定存在。3.选取叁株热稳定性优良的重组病毒制备灭活疫苗免疫猪,每隔一周采血制备血清,用病毒中和实验分析结构蛋白氨基酸的突变对病毒抗原性的影响。结果表明,S2093H、Y2098F和S2093H-Y2098F的突变不会影响病毒的免疫原性。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2018-05-01)
刘斌,陈晓宇,牟克斌,黄银君,秦天达[4](2018)在《简述包涵体表达口蹄疫基因工程疫苗下游工艺》一文中研究指出以大肠杆菌为载体进行蛋白表达的工艺研发虽然技术成熟,但由于表达产物不同,所需要的工艺研发存在很大差异。下游纯化工艺的好坏对于疫苗产量、质量、效果有着直接影响。本文探讨了以包涵体形式表达的基因工程疫苗下游工艺,以供参考。(本文来源于《甘肃畜牧兽医》期刊2018年04期)
李淑萍,孙世琪,莫亚霞,胡永浩,郭慧琛[5](2019)在《O型口蹄疫病毒样颗粒编码基因的真核表达载体构建及表达》一文中研究指出为了构建O型口蹄疫病毒(FMDV)病毒样颗粒编码基因的真核表达载体,将FMDV结构蛋白VP0、VP1、VP3的基因分别克隆到真核表达载体pVAX1中,再分别通过带有BsmBⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,分别对重组质粒pVAX-VP0、pVAX-VP1和pVAX-VP3扩增后进行酶切,用T4连接酶连接得到重组的真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3。对重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3进行PCR鉴定并测序。用脂质体将重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3转染BHK-21细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)及Western blot检测重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3在细胞中的表达情况。结果表明,成功构建了重组真核表达载体pVAX-VP0VP1VP3,并在BHK-21细胞中得到表达。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年01期)
李继东,才学鹏[6](2017)在《O型口蹄疫病毒VP1基因重组山羊痘病毒活载体疫苗的研究》一文中研究指出旨在构建能够表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的重组山羊痘病毒(GPV),并以此为活载体疫苗,评估其免疫效力.将FMDV的VP1基因插入转移质粒pTKfpgigp中,构建重组转移质粒pTKfpgigp-VP1,并转染已感染GPV的羔羊睾丸(LT)细胞,产生重组GPV(rGPV),筛选纯化rGPV,检测rGPV在LT细胞中VP1基因的表达情况.将获得的rGPV皮内接种山羊,检测抗山羊痘(GP)和口蹄疫(FMD)特异性抗体水平.结果表明,获得含有FMDV的VP1基因重组毒株rGPV/FMDVVP1,在LT细胞中VP1基因进行正常转录,其表达产物能与FMDV抗血清产生特异性反应.rGPV能诱导产生不同水平的抗GP和FMD的特异性抗体.可为FMD重组标记疫苗的研制提供参考.(本文来源于《宁夏大学学报(自然科学版)》期刊2017年04期)
姚怀兵,赵毅,朱妍,张毅,刘宏[7](2017)在《O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒3A基因序列分析》一文中研究指出为了对缅甸98谱系O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒的3A编码基因序列及其氨基酸序列进行分析,从而研究O型口蹄疫病毒的演化、变异情况,将O型口蹄疫病毒株O/XJ/10-11接种于牛、乳鼠、猪及BHK-21细胞,获得相应的适应毒,以各组织液中的口蹄疫病毒RNA为模板,反转录并扩增3A基因,采用Vector NTI 11.5和DNA Star生物学软件对3A基因进行比对分析。结果表明:牛、乳鼠、猪、BHK-21细胞4种宿主适应毒,3A基因较稳定,变异较少;变异均发生在3A的第99、114位氨基酸上,说明FMDV 3A基因的第99、114位氨基酸在一定程度上与宿主嗜性有关。本试验结果为进一步分析O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒基因组的变异奠定了基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2017年08期)
刘斌,陈晓宇,黄银君,牟克斌,张云娟[8](2017)在《口蹄疫基因工程疫苗不同佐剂水相配比优化研究》一文中研究指出[目的]选择一种适合口蹄疫基因工程疫苗生产的佐剂。[方法 ]通过ISA 206和ISA201 VG油佐剂乳化后物理性状检验,参照现有口蹄疫灭活疫苗乳化工艺,选用ISA 206和ISA201 VG油佐剂,分别用4.6:5.4、1:1、5.4:4.6的水相和油相比例进行乳化,制备疫苗,于2~8℃保存15个月,分别于第3、6、9、12、15个月取样,进行疫苗物理性状检验。[结果 ]ISA201VG佐剂疫苗物理性状好于ISA 206油佐剂;疫苗水相和油相最佳配制比例为1:1;疫苗的外观、剂型、稳定性和黏度均符合产品的质量要求。[结论 ]ISA201VG佐剂可以作为口蹄疫基因工程疫苗佐剂使用。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2017年07期)
姚怀兵,赵毅,朱妍,刘梦丽,刘宏[9](2017)在《O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒P1基因分析》一文中研究指出为了明确O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒P1基因变异趋势,将口蹄疫病毒分别接种于牛、乳鼠、猪及BHK-21细胞,获得相应宿主的适应毒,以各宿主适应毒RNA为模板,扩增出P1(1A、1B、1C、1D)基因,将各适应毒株扩增的P1基因序列相互比对。结果表明,牛、乳鼠、猪、BHK-21细胞宿主适应毒株P1基因的核苷酸及其编码的氨基酸序列均未发生缺失;部分关键性氨基酸发生了变异,变异发生在VP1主要抗原区域的141-160位和200-213位、VP2抗原表位的156-166位和217-220位;VP3抗原蛋白发生较少氨基酸变异;VP4均未发生变异。试验结果为进一步分析不同宿主适应毒基因组的变异关系奠定了基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2017年05期)
姚怀兵,赵毅,王金泉,刘梦丽,刘宏[10](2017)在《O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒株P1和3A基因的差异分析》一文中研究指出为了明确O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒株P1和3A基因位点的差异性,研究其遗传变异趋势,找出不同宿主适应毒株在P1和3A基因水平上位点的变异情况,将O型口蹄疫病毒O/XJ/10-11株分别接种于牛、乳鼠、猪及BHK-21细胞,获得相应的宿主适应毒株,提取RNA,反转录并扩增P1和3A基因,目的片段产物经琼脂糖凝胶电泳回收,并将其克隆到pMD19-T载体上,筛选阳性菌落,测序并分析其基因序列。结果表明:牛、乳鼠、猪、BHK-21细胞四种宿主适应毒株,核苷酸和氨基酸序列均未发生缺失,主要抗原位点稳定;P1基因发生了部分变异,变异程度依次为VP1、VP2>VP3>VP4,VP4基因最为保守;3A基因较稳定,变异较少;不同宿主适应毒株的变异程度依次如下:猪适应毒株>BHK-21细胞适应毒株>牛适应毒株>鼠适应毒株。O型口蹄疫病毒在不同宿主传代过程中造成VP1基因的变异,但主要抗原位点稳定;VP2基因的变异均位于抗原表位上;鼠适应毒株作为口蹄疫原始毒种的保存更为有利。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2017年05期)
型口蹄疫基因论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-andmouth disease virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,可感染猪、牛、羊等70多种动物~([1])。该病传染性强、传播快、在世界范围广泛流行。OIE将其列在15个A类动物疫病之首,我国政府也将其排在一类动物传染病的第一位。一年四季均可发病,多发于冬、春寒冷季节~([2])。FMDV是小RNA病毒科口蹄疫病毒属,其核酸为单股正链RNA,大小约8.5kb,由L基因、P1结构
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
型口蹄疫基因论文参考文献
[1].邹兴启,朱元源,包慧芳,孙普,郭晓宇.宿主细胞基因序列插入亚洲1型口蹄疫病毒导致病毒对牛的致病性减弱的研究[J].中国兽医科学.2019
[2].李天芝,于新友.口蹄疫基因工程疫苗研究进展[J].猪业科学.2018
[3].高雅.热稳定性O型口蹄疫基因工程病毒的构建及其特性分析[D].中国农业科学院.2018
[4].刘斌,陈晓宇,牟克斌,黄银君,秦天达.简述包涵体表达口蹄疫基因工程疫苗下游工艺[J].甘肃畜牧兽医.2018
[5].李淑萍,孙世琪,莫亚霞,胡永浩,郭慧琛.O型口蹄疫病毒样颗粒编码基因的真核表达载体构建及表达[J].动物医学进展.2019
[6].李继东,才学鹏.O型口蹄疫病毒VP1基因重组山羊痘病毒活载体疫苗的研究[J].宁夏大学学报(自然科学版).2017
[7].姚怀兵,赵毅,朱妍,张毅,刘宏.O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒3A基因序列分析[J].畜牧与兽医.2017
[8].刘斌,陈晓宇,黄银君,牟克斌,张云娟.口蹄疫基因工程疫苗不同佐剂水相配比优化研究[J].中国动物检疫.2017
[9].姚怀兵,赵毅,朱妍,刘梦丽,刘宏.O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒P1基因分析[J].动物医学进展.2017
[10].姚怀兵,赵毅,王金泉,刘梦丽,刘宏.O型口蹄疫病毒不同宿主适应毒株P1和3A基因的差异分析[J].畜牧兽医学报.2017