吸附交联法固定化蔗糖异构酶及其在异麦芽酮糖制备中的应用

论文摘要

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,采用吸附交联法对重组短小芽孢杆菌来源的蔗糖异构酶进行固定化。以表观酶活力回收率为指标,对壳聚糖浓度、戊二醛加量、游离酶加量、固定化时间等条件进行了优化;并考察了温度、pH、固定化酶加量、反应时间以及底物浓度等因素对固定化蔗糖异构酶转化生产异麦芽酮糖的影响。结果表明,最佳固定化条件为:壳聚糖质量浓度3g/dL、戊二醛加量(体积分数)0.75%、酶加量50 U/g、固定化时间16 h,此时固定化酶活力回收率达到70.3%;最佳转化条件为:温度30℃、初始pH 4.5、酶用量15 U/g,转化10 h,蔗糖质量浓度600 g/L,异麦芽酮糖最大产物得率达到87.8%。在最佳的转化条件下连续转化16次,产物得率仍保持在87.52%,显示该固定化酶具有良好的操作稳定性及较高的异麦芽酮糖合成能力。

论文目录

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器

1.2 试验方法

1.2.1 蔗糖异构酶游离酶的制备

1.2.2 蔗糖异构酶固定化方法的优化

1.2.3 酶活力测定

1.2.4 固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖工艺优化

1.2.5 HPLC检测法计算异麦芽酮糖产物得率

1.2.6 固定化酶的操作稳定性研究

2 结果与讨论

2.1 蔗糖异构酶游离酶的制备

2.2 蔗糖异构酶固定化方法的优化

2.2.1 壳聚糖质量浓度对固定化酶活回收率的影响

2.2.2 戊二醛加量对固定化酶活回收率的影响

2.2.3 游离酶加量对固定化酶活回收率的影响

2.2.4 固定化时间对固定化酶活回收率的影响在壳聚糖质量浓度为3.0 g/dL、

2.3 固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖工艺优化

2.3.1 温度对固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖的影响

2.3.2 初始pH对固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖的影响

2.3.3 底物质量浓度对固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖的影响

2.3.4 固定酶用量对固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖的影响

2.3.5 反应时间对固定化蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖的影响

2.4 固定化酶的操作稳定性研究

3 结语

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 耿梦华,陈晟,吴敬,吴丹

关键词: 蔗糖异构酶,固定化,异麦芽酮糖

来源: 食品与生物技术学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 食品科学与技术国家重点实验室江南大学,江南大学工业生物技术教育部重点实验室

基金: 国家杰出青年基金项目(31425020),江苏高校优秀科技创新团队项目[111计划(111-2-06)]

分类号: Q814.2

页码: 104-110

总页数: 7

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吸附交联法固定化蔗糖异构酶及其在异麦芽酮糖制备中的应用

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