导读:本文包含了细胞冬眠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,内分泌,黄鼠,冬眠期,扬子鳄,脂肪瘤,基因治疗。
细胞冬眠论文文献综述
[1]（2019）在《科学家发现可让癌细胞“冬眠”的免疫细胞》一文中研究指出癌细胞难以被彻底消灭,那么是否可以退而求其次,通过使它们进入永久"冬眠"状态来拯救病人呢?澳大利亚研究人员日前发现了一种有这样功能的免疫细胞,有望为治疗癌症提供新思路。澳大利亚泰莱松儿童研究所等机构研究人员在英国《自然》杂志上报告说,他们发现一种名为TRM细胞的免疫细胞能让黑色素瘤细胞处于"冬眠"状态。黑色素瘤是由皮肤上的色素组织发生病变引起的一种癌症,目前尚无有效治疗药物。(本文来源于《科学大观园》期刊2019年03期）
张宜乾[2]（2016）在《PEDF/PEDF-R诱导急性缺血心肌细胞进入“冬眠状态”的作用及相关机制研究》一文中研究指出研究背景急性心肌梗死(acutemyocardial infarction,AMI)是指冠状动脉血流中断,受累区心肌细胞严重而持久缺血导致的一系列综合征。AMI发生后,如果心肌缺血持续存在,梗死区大部分心肌细胞将难免死亡的命运,有部分心肌细胞可在慢性持续缺血状态下,逐渐进入“冬眠状态”,形成冬眠心肌而维持自身存活。然而,近年来的研究表明,这部分冬眠心肌细胞的数量,恰恰与血运重建治疗后心脏的受益程度及预后密切相关。色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族,具有抗血管生成、抗血管渗透、抗炎和营养神经细胞等多种生物学活性。我们在前期研究中发现,心脏缺血区早期,血浆及缺血区心肌的PEDF表达都显着下降;局部心肌转染PEDF后,可以显着减少缺血区心肌细胞的凋亡和程序性坏死,显着保护AMI模型大鼠的心脏功能。研究过程中我们进一步发现体外培养条件下的原代心肌细胞受PEDF蛋白干预后,缺氧时,存活的原代心肌细胞在形态及功能上有别于非干预细胞,进一步的机制研究背景下,我们提出假设:在急性缺血状态下,PEDF能够通过调节代谢和功能重塑,使心肌细胞处于类似于冬眠心肌的“冬眠状态”,从而有效保存了更多心肌细胞,为后续治疗提供了细胞学基础。PEDF是一种分泌性蛋白,须通过细胞膜受体介导才能发挥生物学作用。近年来的研究已经确认心肌细胞上存在一个80kDa的PEDF膜受体,称之为PEDF受体(PEDF receptor,PEDF-R)。PEDF-R具有磷脂酶A2和脂肪酶活性,PEDF与其结合后,能够激活上述两种酶活性而发挥脂解作用,生成的游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)、甘油二酯(diglyceride,DAG)和溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)作为第二信使发挥生物学作用。细胞内FFAs,LPA作为细胞内信号分子,在抗氧化、调节血糖及细胞保护等方面的作用已经被认识;DAG通过激活蛋白激酶C(protein kinase,PKC)在细胞内发挥广泛的作用。综上所述,我们推测:在急性心肌缺血发生时,PEDF通过激活PEDF-R酶活性,释放出FFAs、DAG、PLA,参与了心肌细胞代谢和功能重塑,促使其进入类似于冬眠心肌的“冬眠状态”,暂时性降低心肌细胞的能量消耗,最大限度的提供存活条件。这部分细胞将为心肌梗死后的再血管化提供细胞储备。第一部分预转染目的基因的非开胸大鼠急性心肌梗死模型的建立目的开胸结扎冠脉血管并局部注射转基因动物模型,由于存在基因表达延迟性,在研究急性心肌梗死的基因治疗时具有局限性,因此,设计了一个非二次开胸可实现结扎/松解冠脉血管的动物模型,目的基因病毒预注射,检测基因表达后,再实行非二次开胸的心肌缺血/再灌注损伤,本部分验证动物模型的可行性及有效性,为后续研究提供动物模型基础。方法选择SD大鼠,麻醉后经左侧第四肋间开胸。在冠状动脉左前降支预置结扎线和松解线,同时在其血供区(预测结扎后缺血区),心肌注射携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒。术后第1、3、5、7d检测转染区心肌GFP的蛋白表达,检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor,TNF-α)和白介素-1(interleukin-1,IL-1)的变化,检测血清中C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、血管紧张素 Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)、抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)的变化,并通过心脏超声检测动物心率(HR)、心输出量(CO)、射血分数(EF%)和左室短轴缩短率(FS%)。术后第7dGFP组和sham组都实施缺血/再灌注,Evan's/TTC染色检测动物心肌梗死区面积比。结果预置线并转染携带GFP基因的慢病毒后,转染区GFP表达持续升高,5d后达到稳定状态。转染区TNF-α、IL-1及血清中CRP在术后1-3d逐渐升高,第7d恢复正常水平;血清中Ang II、ADH在术后1-3d逐渐升高,第Sd恢复正常水平。术后第Id HR升高,CO下降,至第5d恢复正常水平;EF%和FS%在术后第Id降低,至第7d恢复正常水平。术后第7d实施缺血再灌注后GFP组动物心肌梗死区与缺血危险区比率与sham组(也实施了I/R)相比,无统计学差异。第二部分PEDF诱导急性心肌梗死大鼠心肌细胞进入“冬眠状态”目的检测PEDF对发生AMI后心脏收缩功能以及心脏储备功能的影响,推断冬眠心肌的形成情况,探究PEDF是否可诱导急性缺血心肌细胞快速进入“冬眠状态”,方法前期动物模型下,冠状动脉左前降支预置结扎线,局部心肌内注射携带PEDF基因的慢病毒,7日后在非二次开胸状态下实施AMI,心脏彩超分别于AMI后第1、2、4、6、8周检测心脏功能,8周后进行多巴酚丁胺负荷试验,心脏彩超检测心脏储备功能。结果AMI后1～2周,PEDF组EF%、FS%降低(与GFP组相比,P<0.05);急性心肌梗死6-8周,PEDF组EF%、FS%升高(与GFP组相比,P<0.05)。急性心肌梗死8周后,多巴酚丁胺负荷试验示:PEDF组心脏储备功能(△EF%、AFS%)显着增高(与GFP组相比,P<0.05)。第叁部分PEDF/PEDF-R诱导缺血心肌细胞进入“冬眠状态”的相关机制目的使用离体培养的H9c2细胞和大鼠乳鼠原代心肌细胞,在对细胞线粒体密度、自噬、Ca2+水平、收缩力等可能与PEDF诱导缺血心肌细胞进入“冬眠状态”有关的条件进行检测,并使用siRNA敲减PEDF-R来探讨相关机制,进一步验证PEDF是否能够诱导急性缺氧心肌细胞收缩力下调,其机制是否与PEDF激活心肌细胞膜上的PEDF-R有关。方法D-Hank's液和缺氧培养模拟心肌缺血;在培养基中加入重组PEDF蛋白;siRNA敲减PEDF-R。Mito-Tracker(?)Red线粒体探针标记线粒体,使用荧光显微镜和流式细胞分析仪检测细胞线粒体密度;Western blot检测细胞中线粒体自噬相关蛋白Atg5表达;透射电镜观察细胞自噬小体的密度,气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析检测细胞内游离FFAs水平;ELISA法检测细胞内DAG水平;Fura2-AM钙离子探针检测各组原代心肌细胞Ca2+水平;视频监测系统观察心肌细胞收缩变化。结果与缺氧对照组相比,加入PEDF后,缺氧条件下H9c2细胞的线粒体密度下降(P<0.05),细胞内自噬小体增多(P<0.05);加入PEDF后,在缺氧不同时间点(6h,12h,18h,24h)检测Atg5蛋白均高于单纯缺氧组(P<0.05);siRNA-PEDF-R可阻断发生(P<0.05)。H9c2细胞缺氧条件下,PEDF组棕榈酸(palmitic acid,PA)和DAG显着增多;siRNA-PEDF-R可阻断发生(P<0.05)。与正常培养的原代心肌细胞相比,缺氧对照组细胞内Ca2+水平升高(P<0.05),PEDF组细胞内Ca2+水平较缺氧对照组低(P<0.05),siRNA-PEDF-R可阻断发生(P<0.05)。缺氧条件下,各组心肌细胞收缩力都随时间延长而下降,与缺氧对照组比,PEDF组心肌细胞收缩力下降速度加快(P<0.05);siRNA-PEDF-R 可阻断发生(P<0.05)。结论:1.本研究AMI动物模型,实现了外源性目的基因充分表达后,非二次开胸实施AMI,提高了缺血心脏基因转染实验研究的科学性。2.PEDF-R介导PEDF增加缺氧心肌细胞脂质分解,经FFAs及DGA信号通路,增加缺氧心肌细胞线粒体自噬、减少肌浆网Ca2+释放,降低心肌收缩力及能量消耗,诱导缺血心肌细胞进入“冬眠状态”。(本文来源于《南京医科大学》期刊2016-05-01）
杨晨希[3]（2014）在《冬眠期达乌尔黄鼠比目鱼肌细胞凋亡与钙稳态相关基因与蛋白表达水平的研究》一文中研究指出研究目的：冬眠动物在长达几个月的冬眠中,骨骼肌处于不活动或极少活动的状态,这个状态会引起非冬眠动物的废用性肌肉萎缩,而冬眠动物在出眠时并没有发生明显的废用性萎缩,其机制尚不明了。有关非冬眠动物的研究表明,肌萎缩主要是因为肌蛋白降解增加和细胞凋亡的发生。胞浆钙超载不仅能激活钙蛋白酶信号通路引起蛋白降解,并且能激活细胞凋亡信号通路,引起细胞凋亡。所以本研究从细胞凋亡调控,蛋白降解与钙稳态调控叁个方面对冬眠不同时期达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus)比目鱼肌细胞进行了研究,探讨其抗废用性肌肉萎缩的分子机制。钙稳态是内环境稳态的重要组成部分。钙稳态失衡是激活Calpains钙蛋白酶系统,进而降解蛋白,导致废用性肌萎缩的主要机制之一。调节细胞内钙稳态的因素主要有降钙与升钙两方面,降钙因素主要有叁个,第一个是位于肌质网膜上的钙泵SERCA2(Ca2+ATPase),能将胞浆中的钙离子泵回肌质网,是降低细胞内钙离子浓度的重要因素；第二个是位于细胞膜上的钠钙交换体NCX (Na+-Ca2+exchanger),可以将钠离子转入细胞内,将钙离子转出细胞,从而起到降低细胞内钙离子浓度的作用；第叁个是钙离子结合蛋白CALMl (calmodulin),能与胞浆中的钙离子结合,从而降低细胞内游离的钙离子浓度；升钙因素主要有两个,一个是细胞膜上的L型钙离子通道,由于该通道是电压门控通道,跨膜电位是影响该通道的主要因素,因此本研究中没有对其基因表达进行研；另一个是线粒体上的H+-Ca2+转换子LETAL (EF hand-containing transmembrane protein1),能把线粒体中钙离子释放到细胞质中,可以避免线粒体钙超载,同时增加了胞浆钙离子浓度。骨骼肌细胞的钙稳态是细胞浆、肌质网与线粒体基质钙离子之间的动态平衡,主要由以上提及的钙通道、钙泵、钙离子结合蛋白以及离子交换体等协同完成。本研究选取了细胞膜上的NCX、肌质网SERCA2、线粒体LETAL以及胞浆的钙离子结合蛋白CALM1,从基因表达的角度,系统研究冬眠对骨骼肌钙稳态的影响。细胞凋亡信号通路中选择了抑凋亡因子Bcl-2,促凋亡因子Bax和半胱氨酸Caspase-3。Bcl-2蛋白和Bax蛋白均属于Bcl-2家族,前者是抗凋亡蛋白,后者是促凋亡蛋白,二者蛋白水平的高低与凋亡调控直接相关。Bcl-2与Bax形成的异源二聚体中二者的比例决定细胞到底该向存活还是死亡的方向发展。Caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶,其激活底物多聚合酶,能剪切核小体上的DNA,从而引起细胞凋亡。蛋白水解信号通路中选择了钙蛋白酶Calpain-1, Calpain-2和钙蛋白酶抑制剂Calpastatin。钙蛋白酶是存在于细胞质中的Ca2+依赖性的半胱氨酸蛋白水解酶,以往研究表明,在骨骼肌蛋白降解过程中,首先是激活Calpain,活化的Calpain会降解细胞骨架蛋白,使肌原纤维从细胞骨架上脱落,然后通过依赖ATP的泛素-蛋白酶水解系统降解成氨基酸。钙蛋白酶抑制剂Calpastatin能特异性地抑制钙蛋白酶Calpain-1和Calpain-2的活性。因为本实验室之前已经对其蛋白表达进行了研究,这次只从基因表达的角度进行研究。研究方法：达乌尔黄鼠(n=24)被划分为四组：冬眠前(PRE,n=6);冬眠中组(HIB,n=6,经过60天的冬眠)；阵间激醒组(IBA,n=6);出眠组(POST,n=6,经过90+12天的冬眠,出眠后两天)；应用western-blot方法检测Bax, Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达变化,应用荧光定量PCR方法检测Bax, Bcl-2, Calpain-1, Calpain-2, Calpastatin, NCX, SERCA2, LETAL和CALM1的基因表达变化,应用电子显微镜观察比目鱼肌细胞Z线的超微结构。研究结果：1.与冬眠前组相比,冬眠中组与出眠组黄鼠的体重分别下降了24%(p<0.05)和38%(p<0.05)；比目鱼肌湿重分别下降了9%(p<0.05)和16%(p<0.05)。与冬眠前组相比,冬眠中组与出眠组比目鱼肌肌重体重比分别升高了33%(p<0.001)和59%(p<0.001)。2.与冬眠前组相比,冬眠中组与出眠组比目鱼肌细胞Z线排列整齐,Z线的宽度没有明显的变化。3.与冬眠前组相比,冬眠中组,阵间激醒组和出眠组抗凋亡基因Bcl-2的表达水平分别升高了74.4%(p<0.001),106.6%(p<0.001)和48.8%(p<0.001)；冬眠中组和阵间激醒组促凋亡基因Bax的表达水平分别升高了85%(p<0.001)和55%(p<0.001)；冬眠中组和阵间激醒组促凋亡基因Bax与抗凋亡基因Bcl-2的比值分别降低了18%(p<0.001)和26%(p<0.001),出眠组的Bax/Bcl-2则无显着变化。4.与冬眠前组相比,冬眠中组,阵间激醒组和出眠组抗凋亡基因Bcl-2的蛋白表达水平分别升高了500%(p<0.001),262%(p<0.05)和385%(p<0.001)；与冬眠前组相比,冬眠中组促凋亡基因Bax的蛋白表达水平降低了58%(p<0.001)；与冬眠前组相比,阵间激醒组Caspase-3蛋白表达升高了29%(p<0.001,)；与冬眠前组相比,冬眠中组促凋亡蛋白Bax与抗凋亡蛋白Bcl-2的比值降低了92%(p<0.001)。5.与冬眠前组相比,冬眠中组,阵间激醒组和出眠组钙蛋白酶抑制剂Calpastatin基因的表达水平分别升高了61%(p<0.001),111.3%(p<0.001)和69.6%(p<0.001)。6.与冬眠前组相比,冬眠中组,阵间激醒组和出眠组SERCA2基因的表达水平分别增加了50.3%(p<0.05),131.5%(p<0.001)和36.6%(p<0.001)；钙离子结合蛋白CALM1基因的表达水平分别增加了18.2%(p<0.05),33.9%(p<0.001)和32.5%(p<0.001)；与冬前组相比,冬眠中组钠钙交换体NCX基因表达降低了19.7%(p<0.05)；与冬眠中组相比,阵间激醒组线粒体上的H+-Ca2+转换子LETA1基因表达增加了43%(p<0.05)。研究结论：1.冬眠黄鼠比目鱼肌湿重下降幅度小于体重的下降幅度,支撑单位体重的比目鱼肌重量出现上升。2.冬眠黄鼠比目鱼肌细胞Z线的超微结构没有发生明显的退行性变化。3.冬眠黄鼠能通过上调抗凋亡因子Bcl-2的基因表达和蛋白表达水平,主动抑制比目鱼肌细胞凋亡的发生。4.冬眠黄鼠能通过上调钙蛋白酶抑制剂Calpastatin的表达水平,主动抑制Calpain-1和Calpain-2的活性,防止骨骼肌蛋白的降解。5.冬眠黄鼠能通过上调肌质网膜上的钙泵SERCA2和细胞质中的钙离子结合蛋白CALM1的基因表达水平,从而防止细胞内钙超载的发生,阵间激醒时线粒体LETA1基因表达水平的升高可以避免线粒体基质钙离子超载。总之,冬眠达乌尔黄鼠能通过维持骨骼肌细胞的钙稳态,避免钙超载,从而避免Calpain激活,避免骨骼肌蛋白的降解。另一方面,胞浆钙稳态的维持与抗凋亡因子Bcl-2的显着上调,协同抑制细胞凋亡的发生。(本文来源于《西北大学》期刊2014-12-01）
陈慧,郭慧,方翔,彭莉,韩敏捷[4]（2014）在《饥饿和冬眠期牛蛙胃肠胰系统内分泌细胞的变化》一文中研究指出所有散在分布于消化道黏膜和胰腺分泌肽类或胺类激素的内分泌细胞统称为胃肠胰(Gastro-Entero-Pancreatic,GEP)系统内分泌细胞,其与神经系统和外分泌腺互相配合,共同调控和调节消化、吸收及体内一些其他生理过程[1—6]。目前,对脊椎动物GEP内分泌系统已进行广泛而深入的研究,发现了30多种类型的内分泌细胞[1]。(本文来源于《水生生物学报》期刊2014年01期）
周乃珍,赵帅,周永康,王朝林,张盛周[5]（2013）在《扬子鳄消化道Ghrelin免疫活性细胞的分布及其在冬眠期的密度变化》一文中研究指出目的研究扬子鳄(Alligator sinensis)消化道中生长素释放肽ghrelin免疫活性(IR)细胞的分布、组织定位及其在冬眠期的变化。方法应用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组织化学方法结合生物统计学分析。结果 Ghrelin-IR细胞在扬子鳄的小胃密度最高,在胃贲门部、胃体和胃幽门部有少量分布,主要位于胃腺上皮细胞之间。在食管、十二指肠、空肠、回肠和直肠中均未检测出ghrelin-IR细胞。冬眠期小胃ghrelin-IR细胞显着性减少(P<0.01),其它部位无显着性变化(P>0.05)。结论扬子鳄消化道ghrelin-IR细胞的分布同其它动物有相似之处,也有其一定的特异性。Ghre-lin在扬子鳄冬眠期的代谢变化和能量稳态的调节中起重要作用。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2013年03期）
吴昊[6]（2013）在《东北林蛙冬眠期前后消化道内分泌细胞的比较研究》一文中研究指出本文应用Grimelius银染法对东北林蛙冬眠前期、冬眠期和冬眠后期消化道嗜银细胞的分布密度及形态进行比较研究。结果表明：冬眠期前后消化道各段均有嗜银细胞的存在，分布于上皮细胞之间、上皮细胞基部和腺泡上皮细胞之间，密度最高峰在各期并不完全相同，冬眠前后期最高峰在胃幽门部，冬眠期最高峰在胃部，不同时期消化道嗜银细胞形态相似，其中以锥体形、椭圆形为主，通过形态学观察得出嗜银细胞具有内分泌、外分泌和旁分泌叁种功能。本文还利用免疫组织化学ABC法（avidin-biotin compex method），应用5-羟色胺（5-HT）、生长抑素（SS）、胃泌素（GAS）、胰高血糖素（GLU）、胰多肽（PP）和P-物质（SP）六种特异性抗血清，对东北林蛙冬眠期前后消化道内分泌细胞进行研究，结果显示：冬眠前期、冬眠期和冬眠后期东北林蛙消化道内均发现有5-HT、SS、GAS叁种细胞，GLU细胞仅分布于冬眠前期的胃幽门部和冬眠后期的胃体，而PP细胞和SP细胞在这叁个时期中均未检测到，被检测到的内分泌细胞为深棕色，背景为蓝色。5-HT细胞分布广泛，在东北林蛙冬眠期前后叁个时期的整个消化道（即从食管到直肠）都有分布，且叁个时期中5-HT细胞分布密度最高峰均为胃幽门部。SS细胞的分布也较广泛，在东北林蛙叁个时期的消化道中，除了直肠部未见外，从食管至回肠均有SS细胞分布，冬眠前期和冬眠后期SS细胞密度分布高峰分别在胃贲门部和胃幽门部，而冬眠期此种细胞的分布密度高峰有两个，即胃贲门部和幽门部。GAS细胞在东北林蛙冬眠前期、冬眠期和冬眠后期叁个时期中分布也不相同，冬眠前期GAS细胞分布在胃贲门、胃体、空肠至直肠段，分布密度高峰在胃体，冬眠期分布于胃贲门、胃体、空肠和回肠中，且密度高峰位于胃体；冬眠后期分布于胃贲门、胃体、十二指肠至直肠各段，密度分布高峰位于胃贲门部。内分泌细胞形态多样，以锥体形和椭圆形为主，其次还有圆形和梭形等。根据其内分泌细胞的不同形态，可以认为其消化道内分泌细胞具有内分泌、外分泌和旁分泌的功能。(本文来源于《哈尔滨师范大学》期刊2013-06-01）
徐瑞金,纪霞,孙元芬,黎霞,潘茗[7]（2012）在《缬沙坦对家兔慢性冬眠心肌细胞中肝细胞生长因子水平和心功能的影响》一文中研究指出目的观察缬沙坦对慢性冬眠心肌细胞中肝细胞生长因子(HGF)和心功能的影响。方法 36只新西兰大白兔用简单随机抽样法分为3组:假手术组、慢性冬眠心肌组、缬沙坦组各12只。结扎冠状动脉左室支制备慢性冬眠心肌模型,在此基础上给予血管紧张素Ⅱ受体(AT1)的拮抗剂缬沙坦干预8周后,用多功能生理记录仪检测左心室功能,酶联免疫吸附法(ELISA)测定心肌组织中HGF含量,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果与假手术组比较,慢性冬眠心肌组左心室功能减退,心肌组织中HGF含量降低[(2.99±0.57)ng/g组织比(5.16±0.64)ng/g组织,P<0.01];与慢性冬眠心肌组比较,缬沙坦组心肌组织中HGF含量升高[(4.65±0.72)ng/g组织比(2.99±0.57)ng/g组织,P<0.01],细胞凋亡指数降低(99.45±17.32比120.129±15.97,P<0.01),且与心肌组织中HGF含量呈负相关(r=-0.666,P<0.01),缬沙坦可抑制慢性冬眠心肌组织间质纤维化,改善心功能(P<0.01)。结论慢性冬眠心肌中HGF含量降低,缬沙坦可保护缺血心肌。(本文来源于《中国心血管杂志》期刊2012年04期）
常静瑶[8]（2011）在《达乌尔黄鼠冬眠过程中细胞因子变化规律的研究》一文中研究指出冬眠作为一种复杂的生理适应现象,与免疫系统的调节是分不开的。本项研究用大鼠的MILLIPLEX~(TM) MAP细胞因子检测试剂盒和液相芯片扫描仪,ELISA试剂盒双抗体夹心法两种方法检测了达乌尔黄鼠不同状态的24种细胞因子,即IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12(p70)、IL-13、IL-17、IL-18、EGF、Eotaxin、G-CSF、GM-CSF、GRO/KC、IP-10、MCP-1、MIP-1α、TNF-α、VEGF、Rantes、Leptin。得到了两种方法细胞因子的浓度值,能够充分地反应达乌尔黄鼠体内细胞因子的变化情况,证实了用大鼠的细胞因子试剂盒检测达乌尔黄鼠的细胞因子是可行的。实验结果表明影响动物冬眠的细胞因子主要为:Leptin、Rantes、MIP-1α、VEGF。达乌尔黄鼠在冬眠诱导过程中体温逐渐降低,到深入冬眠期,达乌尔黄鼠的体温降到最低,腹温平均6.8℃,肛温平均6.2℃,随着光照培养箱温度升高,诱导达乌尔黄鼠出眠,它的体温也逐渐升至正常水平。达乌尔黄鼠在夏季和秋季大量的觅食,贮存能量,体重增加,在冬眠过程中,自发的调节其代谢率,靠分解贮存的脂肪来维持漫长的冬季的能量消耗,经过冬眠过程,达乌尔黄鼠的体重普遍下降了100g左右。达乌尔黄鼠冬眠移植的验证实验中,自体移植和异体移植两种方法,达乌尔黄鼠都没有死亡现象。两种方法的细胞因子检测结果无太大差别,两种方法移植前后体温的变化也是相同的,实验证明两种方法本身并没有对冬眠移植的最终结果产生大的影响,都是可行的。冬眠移植2天后达乌尔黄鼠的体温普遍降低,冬眠移植后10天,6只黄鼠中有4只进入了冬眠,移植成功率达到了67%。从移植后冬眠组和不冬眠组的对比中发现IL-6和IL-17两种细胞因子对冬眠移植的最终结果影响是最大的。(本文来源于《天津商业大学》期刊2011-05-01）
李春梅[9]（2010）在《嗜铬细胞瘤合并冬眠瘤误诊一例报告》一文中研究指出患者,女,28岁,因大量出汗2年,心慌、头晕2个月入院。近2年来,患者无明显大量出汗诱因,曾到多家医院求治,诊断不详,给予口服中西药治疗无效。近2个月来无明显诱因出现阵发性心慌、头晕,每次持续5分钟左右自行缓解,共发作5次左右,无明显头痛、恶心、呕吐表现(本文来源于《青海医药杂志》期刊2010年07期）
李淑兰,刘超,吕晓慧,付桂荣,赵丽[10]（2010）在《黑龙江林蛙冬眠和非冬眠消化道内分泌细胞的比较研究》一文中研究指出目的应用5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)、胃泌素(GAS)、胰高血糖素(Glu)、胰多肽(PP)和P-物质(SP)6种特异性抗血清,对黑龙江林蛙冬眠期和非冬眠期消化道内分泌细胞进行检测。方法应用卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(avidin-biotin-peroxidase complex,ABC)免疫组织化学法。结果在冬眠期和非冬眠期黑龙江林蛙消化道内检测到5-HT细胞、SS细胞和Glu细胞,而GAS细胞、PP细胞和SP细胞均未检测到。5-HT细胞分布广泛,存在于黑龙江林蛙冬眠期和非冬眠期从食管到直肠的整个消化道中,在冬眠期分布密度高峰为胃幽门部和十二指肠,而非冬眠期则为胃幽门部;SS细胞分布也较为广泛,在黑龙江林蛙冬眠期和非冬眠期消化道中,除了直肠以外,均有分布,且这两个时期SS细胞的分布密度高峰均在胃幽门部。Glu细胞在冬眠期仅在胃贲门部、胃体、空肠和回肠检测到,而在非冬眠期除以上四个部位外直肠部也检测到了Glu细胞,并且Glu细胞分布密度高峰都在胃体部。结论黑龙江林蛙在冬眠期和非冬眠期消化道中内分泌细胞分布型的不同,可能与机体适应不同时期的生理功能有关。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2010年03期）
细胞冬眠论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景急性心肌梗死(acutemyocardial infarction,AMI)是指冠状动脉血流中断,受累区心肌细胞严重而持久缺血导致的一系列综合征。AMI发生后,如果心肌缺血持续存在,梗死区大部分心肌细胞将难免死亡的命运,有部分心肌细胞可在慢性持续缺血状态下,逐渐进入“冬眠状态”,形成冬眠心肌而维持自身存活。然而,近年来的研究表明,这部分冬眠心肌细胞的数量,恰恰与血运重建治疗后心脏的受益程度及预后密切相关。色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族,具有抗血管生成、抗血管渗透、抗炎和营养神经细胞等多种生物学活性。我们在前期研究中发现,心脏缺血区早期,血浆及缺血区心肌的PEDF表达都显着下降;局部心肌转染PEDF后,可以显着减少缺血区心肌细胞的凋亡和程序性坏死,显着保护AMI模型大鼠的心脏功能。研究过程中我们进一步发现体外培养条件下的原代心肌细胞受PEDF蛋白干预后,缺氧时,存活的原代心肌细胞在形态及功能上有别于非干预细胞,进一步的机制研究背景下,我们提出假设:在急性缺血状态下,PEDF能够通过调节代谢和功能重塑,使心肌细胞处于类似于冬眠心肌的“冬眠状态”,从而有效保存了更多心肌细胞,为后续治疗提供了细胞学基础。PEDF是一种分泌性蛋白,须通过细胞膜受体介导才能发挥生物学作用。近年来的研究已经确认心肌细胞上存在一个80kDa的PEDF膜受体,称之为PEDF受体(PEDF receptor,PEDF-R)。PEDF-R具有磷脂酶A2和脂肪酶活性,PEDF与其结合后,能够激活上述两种酶活性而发挥脂解作用,生成的游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)、甘油二酯(diglyceride,DAG)和溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)作为第二信使发挥生物学作用。细胞内FFAs,LPA作为细胞内信号分子,在抗氧化、调节血糖及细胞保护等方面的作用已经被认识;DAG通过激活蛋白激酶C(protein kinase,PKC)在细胞内发挥广泛的作用。综上所述,我们推测:在急性心肌缺血发生时,PEDF通过激活PEDF-R酶活性,释放出FFAs、DAG、PLA,参与了心肌细胞代谢和功能重塑,促使其进入类似于冬眠心肌的“冬眠状态”,暂时性降低心肌细胞的能量消耗,最大限度的提供存活条件。这部分细胞将为心肌梗死后的再血管化提供细胞储备。第一部分预转染目的基因的非开胸大鼠急性心肌梗死模型的建立目的开胸结扎冠脉血管并局部注射转基因动物模型,由于存在基因表达延迟性,在研究急性心肌梗死的基因治疗时具有局限性,因此,设计了一个非二次开胸可实现结扎/松解冠脉血管的动物模型,目的基因病毒预注射,检测基因表达后,再实行非二次开胸的心肌缺血/再灌注损伤,本部分验证动物模型的可行性及有效性,为后续研究提供动物模型基础。方法选择SD大鼠,麻醉后经左侧第四肋间开胸。在冠状动脉左前降支预置结扎线和松解线,同时在其血供区(预测结扎后缺血区),心肌注射携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的慢病毒。术后第1、3、5、7d检测转染区心肌GFP的蛋白表达,检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor,TNF-α)和白介素-1(interleukin-1,IL-1)的变化,检测血清中C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、血管紧张素 Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)、抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)的变化,并通过心脏超声检测动物心率(HR)、心输出量(CO)、射血分数(EF%)和左室短轴缩短率(FS%)。术后第7dGFP组和sham组都实施缺血/再灌注,Evan's/TTC染色检测动物心肌梗死区面积比。结果预置线并转染携带GFP基因的慢病毒后,转染区GFP表达持续升高,5d后达到稳定状态。转染区TNF-α、IL-1及血清中CRP在术后1-3d逐渐升高,第7d恢复正常水平;血清中Ang II、ADH在术后1-3d逐渐升高,第Sd恢复正常水平。术后第Id HR升高,CO下降,至第5d恢复正常水平;EF%和FS%在术后第Id降低,至第7d恢复正常水平。术后第7d实施缺血再灌注后GFP组动物心肌梗死区与缺血危险区比率与sham组(也实施了I/R)相比,无统计学差异。第二部分PEDF诱导急性心肌梗死大鼠心肌细胞进入“冬眠状态”目的检测PEDF对发生AMI后心脏收缩功能以及心脏储备功能的影响,推断冬眠心肌的形成情况,探究PEDF是否可诱导急性缺血心肌细胞快速进入“冬眠状态”,方法前期动物模型下,冠状动脉左前降支预置结扎线,局部心肌内注射携带PEDF基因的慢病毒,7日后在非二次开胸状态下实施AMI,心脏彩超分别于AMI后第1、2、4、6、8周检测心脏功能,8周后进行多巴酚丁胺负荷试验,心脏彩超检测心脏储备功能。结果AMI后1～2周,PEDF组EF%、FS%降低(与GFP组相比,P<0.05);急性心肌梗死6-8周,PEDF组EF%、FS%升高(与GFP组相比,P<0.05)。急性心肌梗死8周后,多巴酚丁胺负荷试验示:PEDF组心脏储备功能(△EF%、AFS%)显着增高(与GFP组相比,P<0.05)。第叁部分PEDF/PEDF-R诱导缺血心肌细胞进入“冬眠状态”的相关机制目的使用离体培养的H9c2细胞和大鼠乳鼠原代心肌细胞,在对细胞线粒体密度、自噬、Ca2+水平、收缩力等可能与PEDF诱导缺血心肌细胞进入“冬眠状态”有关的条件进行检测,并使用siRNA敲减PEDF-R来探讨相关机制,进一步验证PEDF是否能够诱导急性缺氧心肌细胞收缩力下调,其机制是否与PEDF激活心肌细胞膜上的PEDF-R有关。方法D-Hank's液和缺氧培养模拟心肌缺血;在培养基中加入重组PEDF蛋白;siRNA敲减PEDF-R。Mito-Tracker(?)Red线粒体探针标记线粒体,使用荧光显微镜和流式细胞分析仪检测细胞线粒体密度;Western blot检测细胞中线粒体自噬相关蛋白Atg5表达;透射电镜观察细胞自噬小体的密度,气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析检测细胞内游离FFAs水平;ELISA法检测细胞内DAG水平;Fura2-AM钙离子探针检测各组原代心肌细胞Ca2+水平;视频监测系统观察心肌细胞收缩变化。结果与缺氧对照组相比,加入PEDF后,缺氧条件下H9c2细胞的线粒体密度下降(P<0.05),细胞内自噬小体增多(P<0.05);加入PEDF后,在缺氧不同时间点(6h,12h,18h,24h)检测Atg5蛋白均高于单纯缺氧组(P<0.05);siRNA-PEDF-R可阻断发生(P<0.05)。H9c2细胞缺氧条件下,PEDF组棕榈酸(palmitic acid,PA)和DAG显着增多;siRNA-PEDF-R可阻断发生(P<0.05)。与正常培养的原代心肌细胞相比,缺氧对照组细胞内Ca2+水平升高(P<0.05),PEDF组细胞内Ca2+水平较缺氧对照组低(P<0.05),siRNA-PEDF-R可阻断发生(P<0.05)。缺氧条件下,各组心肌细胞收缩力都随时间延长而下降,与缺氧对照组比,PEDF组心肌细胞收缩力下降速度加快(P<0.05);siRNA-PEDF-R 可阻断发生(P<0.05)。结论:1.本研究AMI动物模型,实现了外源性目的基因充分表达后,非二次开胸实施AMI,提高了缺血心脏基因转染实验研究的科学性。2.PEDF-R介导PEDF增加缺氧心肌细胞脂质分解,经FFAs及DGA信号通路,增加缺氧心肌细胞线粒体自噬、减少肌浆网Ca2+释放,降低心肌收缩力及能量消耗,诱导缺血心肌细胞进入“冬眠状态”。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞冬眠论文参考文献
[1]..科学家发现可让癌细胞“冬眠”的免疫细胞[J].科学大观园.2019
[2].张宜乾.PEDF/PEDF-R诱导急性缺血心肌细胞进入“冬眠状态”的作用及相关机制研究[D].南京医科大学.2016
[3].杨晨希.冬眠期达乌尔黄鼠比目鱼肌细胞凋亡与钙稳态相关基因与蛋白表达水平的研究[D].西北大学.2014
[4].陈慧,郭慧,方翔,彭莉,韩敏捷.饥饿和冬眠期牛蛙胃肠胰系统内分泌细胞的变化[J].水生生物学报.2014
[5].周乃珍,赵帅,周永康,王朝林,张盛周.扬子鳄消化道Ghrelin免疫活性细胞的分布及其在冬眠期的密度变化[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2013
[6].吴昊.东北林蛙冬眠期前后消化道内分泌细胞的比较研究[D].哈尔滨师范大学.2013
[7].徐瑞金,纪霞,孙元芬,黎霞,潘茗.缬沙坦对家兔慢性冬眠心肌细胞中肝细胞生长因子水平和心功能的影响[J].中国心血管杂志.2012
[8].常静瑶.达乌尔黄鼠冬眠过程中细胞因子变化规律的研究[D].天津商业大学.2011
[9].李春梅.嗜铬细胞瘤合并冬眠瘤误诊一例报告[J].青海医药杂志.2010
[10].李淑兰,刘超,吕晓慧,付桂荣,赵丽.黑龙江林蛙冬眠和非冬眠消化道内分泌细胞的比较研究[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2010
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