导读:本文包含了真核细胞表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:转染,载体,基因,质粒,细胞,因子,脊髓炎。
真核细胞表达论文文献综述
李君君,廖佩,文锋,罗泽宇,曹翊雄[1]（2019）在《携带TFPI-2基因的真核表达载体对SHI-1细胞生长的抑制作用》一文中研究指出目的:构建人组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)核表达载体,探讨TFPI-2基因对急性单核细胞白血病细胞株(SHI-1)生长的影响。方法:通过基因化学合成的方式得到TFPI-2的cDNA,将TFPI-2基因和线性载体片段进行连接,并插入载体PEGFP-N1多克隆位点处,再将真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2转染SHI-1细胞,在荧光显微镜下观察TFPI-2转染SHI-1细胞的情况;应用MTT法检测TFPI-2基因不同时间段对SHI-1细胞相对生长率的影响;RT-PCR检测TFPI-2转染前后每组细胞中TFPI-2 mRNA表达水平;采用Western blot法检测TFPI-2蛋白表达。将成功转染PEGFP-N1-TFPI-2载体的细胞命名为SHI-1-TFPI-2(实验组),转染空载体pEGFP-N1的细胞和未转染细胞设为对照组,分别命名为SHI-1-V和SHI-1-P。结果:成功构建了人TFPI-2基因真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2;将载体PEGFP-N1-TFPI-2转染SHI-1细胞,24 h后在荧光显微镜下可见荧光细胞,表明载体PEGFP-N1-TFPI-2成功转入SHI-1细胞;48和72 h后荧光细胞数目增多。RT-PCR结果显示:TFPI-2基因与内参β-actin条带灰度比值实验组高于对照组,灰度比值分别为:SHI-1-V组:0.51±0.04、SHI-1-P组:0.52±0.03、SHI-1-TFPI-2组:0.87±0.08;SHI-1-TFPI-2组与SHI-1-V和SHI-1-P组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 :PEGFP-N1-TFPI-2中TFPI-2基因的表达能抑制SHI-1细胞生长,此为未来白血病的基因治疗提供了研究方向。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年06期）
许会静,刘晴,闫冰,刘微,张磊[2]（2019）在《AQP4真核表达载体的构建和AQP4-M23蛋白在中国仓鼠肺细胞系V79中的表达》一文中研究指出目的:构建水通道蛋白4 (AQP4)真核表达载体pmCherry-N1-hAQP4-M23,检测AQP4-M23蛋白在中国仓鼠肺细胞系V79中的表达。方法:采用PCR方法扩增hAQP4-M23基因,经双酶切后与真核表达载体pmCherry-N1连接,构建pmCherry-N1-hAQP4-M23重组表达质粒。采用脂质体将其转染至V79细胞中,将细胞随机分为对照组(未转染重组质粒的V79细胞)和转染组(转染重组质粒的V79细胞)。利用RT-PCR法和荧光显微镜检测2组细胞中hAQP4-M23基因的表达;取视神经脊髓炎(NMO)患者血清中抗AQP4抗体,与2组细胞结合,采用免疫荧光和水通透性法检测2组细胞中hAQP4-M23的活性。结果:成功构建AQP4真核表达载体;荧光显微镜观察,转染组细胞膜清晰表达红色荧光;免疫荧光检测,转染组细胞膜呈现绿色荧光,表明转染组细胞膜AQP4-M23蛋白可与NMO患者血清成分结合;与对照组比较,转染组细胞中hAQP4-M23活性升高(P<0.05)。结论:成功构建表达AQP4基因的真核表达载体,并在V79细胞系中成功表达hAQP4-M23蛋白。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2019年06期）
龚小霞,李超,曹曦月,杨诚诚,黄超[3]（2019）在《人叉头转录因子O亚型6真核表达载体的构建及其对胶质瘤细胞存活的影响》一文中研究指出构建人叉头转录因子O亚型6(forkhead box class O6, FOXO6)基因的真核表达载体,并探究FOXO6对胶质瘤细胞存活的影响。以人神经胶质瘤细胞U251的c DNA为模板,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法扩增FOXO6基因片段,并将其与pRK5-myc载体连接,构建pRK5-myc-FOXO6重组质粒;将构建成功的重组质粒和空载体分别转染至U251细胞中进行表达,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’, 6-diamidino-2-phenylindole, DAPI)染色法分别检测FOXO6对U251细胞中转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1α, PGC-1α)转录水平的影响及其对U251细胞存活的影响。经双酶切鉴定及DNA测序表明:pRK5-myc-FOXO6重组质粒构建成功;FOXO6转染组中的PGC-1α转录水平出现了明显的下降,并出现了明显的细胞凋亡现象。上述结果显示,pRK5-myc-FOXO6重组质粒构建成功,体外实验暗示FOXO6可能通过抑制PGC-1α的表达来抑制U251细胞的能量代谢及抗氧化过程,进而诱导U251细胞的凋亡,这为后续深入研究FOXO6在胶质瘤上的作用机制和靶点奠定了基础。(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2019年05期）
王孜恒,周敬伟,侯筱宇[4]（2019）在《Bax、Bad基因真核表达质粒构建及转染人胚肾细胞后的翻译水平观察》一文中研究指出目的构建Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2相关细胞死亡因子(Bad)基因真核表达质粒pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad,并观察两质粒转染至人胚肾293(HEK293)细胞后Bax、Bad的表达。方法采用TRIzol试剂提取大鼠脑组织总RNA,利用反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Bax和Bad的互补DNA(cDNA)序列,将cDNA分别克隆至pcDNA3.1载体上。采用脂质体转染法将序列正确的pcDNA3.1-Bax和pcDNA3.1-Bad真核表达质粒分别转染至HEK293细胞,免疫印迹法鉴定Bax、Bad在细胞中的表达。结果双酶切和DNA测序分析显示Bax和Bad基因片段成功插入pcDNA3.1载体中,并且与其cDNA(Genbank:NM_017059.2和AF031227.1)序列完全一致。免疫印迹显示pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad真核表达质粒能够在HEK293细胞中高效表达。结论 pcDNA3.1-Bax、pcDNA3.1-Bad真核表达质粒构建成功,Bax、Bad在HEK293细胞中成功过表达。(本文来源于《山东医药》期刊2019年30期）
徐丽,温贵兰,管国丹,张升波,李昌红[5]（2019）在《猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析》一文中研究指出为探讨非结构蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制过程中的作用及机制,本研究构建真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬时转染至HEK293T中,同时设置完整NSP2基因序列重组质粒作为对照,转染48 h后分别用不同的抗体进行间接免疫荧光监测。结果显示,转染对照组中细胞核周围可见特异性荧光,而转染真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不仅在细胞核周围,在细胞核内也可以观察到特异性荧光。本研究成功构建真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T细胞中正确表达,为进一步研究NSP2在PRRSV复制过程中的作用提供依据和基础。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2019年05期）
张寅斌,陈琳,孙诗雨,陈银溪,闫婉君[6]（2019）在《真核表达p27构建胃癌顺铂耐药细胞模型的研究》一文中研究指出目的:构建p27真核表达载体并导入胃癌SGC-7901细胞获得稳定表达p27的稳定细胞株,以研究p27在胃癌SGC-7901细胞顺铂耐药中所发挥的功能。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增出p27编码区,并将其连接到p CDNA 3. 0-Flag载体上,转染293T细胞后分别用定量PCR和Western blot检测其表达情况,并通过Western blot检测SGC-7901细胞过表达Flag-p27稳定细胞株是否构建成功。通过CCK-8药物敏感性实验检测p27在胃癌细胞顺铂耐药中所发挥的功能。结果:双酶切和测序结果表明,pCDNA 3. 0-Flagp27构建成功,并在293T中成功表达,胃癌SGC-7901细胞过表达Flag-p27细胞株建立成功,通过耐药曲线表明过表达p27可以引起SGC-7901细胞顺铂耐药。结论:成功构建了带Flag标签的p27真核表达载体,为进一步研究p27在胃癌耐药中的功能奠定了基础。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年21期）
蔡辉,黄文利,孙朝辉[7]（2019）在《PcDNA3.1(+)/CYP11B2真核表达质粒的构建及其在NCI-H295R细胞中的表达》一文中研究指出目的构建人醛固酮合成酶基因(CYP11B2)的真核表达质粒,并在人肾上腺上皮细胞(NCI-H295R)中表达,为下一步定点突变研究奠定基础。方法从人的肾上腺组织中提取总的RNA,采用RT-PCR扩增法扩增人的CYP11B2全长cDNA并克隆到PMD18-T载体中,然后再亚克隆于PcDNA3.1(+)真核表达载体,通过菌液PCR和酶切鉴定重组真核表达质粒,并以DNA测序证实。利用阳离子脂质体介导体外转染技术瞬时转染NCI-H295R,RT-PCR和放射免疫法(RIA) 检测CYP11B2基因的表达。结果菌液PCR扩增和酶切证实真核表达质粒构建成功,测序表明CYP11B2基因cDNA全长(1 509bp)和GenBank上公布的序列(D13752)相比较,存在一个碱基差异A3323G,这个变异使得第173位的赖氨酸变为精氨酸,核苷酸序列的同源性为99.9%,氨基酸序列的同源性为99.8%。真核表达质粒转染人肾上腺上皮细胞后CYP11B2 mRNA表达增加,细胞上清中的醛固酮含量显着增加。结论①通过查阅国外SNP数据库得知K173R为一个SNP位点,编号为rs4539。②成功构建了人CYP11B2基因的真核表达质粒,阳离子脂质体是NCI-H295R有效的体外转染体系,本实验为进一步研究该基因的结构与功能关系奠定了基础。(本文来源于《中国现代医药杂志》期刊2019年09期）
尹雪莉,张胜权,张学军[8]（2019）在《IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响》一文中研究指出目的构建白介素28受体ɑ(IL28RA)基因的真核表达载体,并转染HaCaT细胞,观察该基因对HaCaT细胞迁移能力的影响。方法从HepG2细胞中提取总RNA,逆转录后以其cDNA为模板PCR扩增IL28RA编码片段。将其插入质粒pCMV6构建pCMV6-IL28RA重组表达体;重组体经酶切分析及测序鉴定,将其转染至HaCaT细胞中,经G418筛选出稳定过表达IL28RA细胞株。为检测转染效率,反转录实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-qPCR)分析转染细胞中IL28RA mRNA相对表达水平。伤口愈合实验检测过表达IL28RA对HaCaT细胞迁移能力的影响。结果 IL28RA基因成功构建并在HaCaT中表达,RT-qPCR检测转染效率显示与对照细胞相比,过表达细胞中IL28RA mRNA相对表达水平显着升高。细胞伤口愈合实验检测显示与对照细胞相比,IL28RA过表达抑制HaCaT细胞迁移能力。结论 IL28RA基因过表达降低HaCaT细胞迁移能力。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2019年11期）
王正印,尹元,陆群[9]（2019）在《SJIR-2基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究》一文中研究指出目的构建SJIR-2基因的真核表达载体,检测该基因在真核细胞内的表达,为进一步研究该基因作为血吸虫免疫疫苗打下基础。方法 PCR反应扩增出目的基因SJIR-2后插入到真核表达载体pEGFP中,双酶切鉴定并进行序列测定,以脂质体介导的方法转染293T细胞,再以Western blot方法检测该基因的编码蛋白在293T细胞内的表达情况。结果 PCR反应扩增出目的基因SJIR-2,构建了p EGFP-SJIR-2真核表达载体,双酶切鉴定插入片段大小正确,DNA测序结果与GeneBank中的SJIR-2基因序列同源性为100%,重组基因成功转染进293T细胞中,Western blot检测出该蛋白在293T细胞内的表达。结论成功构建了pEGFP-SJIR-2真核表达载体,该基因编码的蛋白可以在真核细胞内表达,为我们进一步探索SJIR-2基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用打下基础。(本文来源于《热带病与寄生虫学》期刊2019年03期）
马小静,李继东,许立华[10]（2019）在《牛传染性鼻气管炎病毒gD基因真核表达载体的构建及其在细胞中的表达》一文中研究指出研究目的疱疹病毒包膜糖蛋白D是病毒的主要组成成分且对于病毒侵入细胞是必不可少的,因此是病毒感染细胞期间中和抗体的主要靶标。本实验旨在构建一种能表达g D基因的真核表达载体,进一步研究该真核表达载体携带的g D基因在外源细胞中的表达情况,并深入探究其在诱导保护性免疫方面的作用。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
真核细胞表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建水通道蛋白4 (AQP4)真核表达载体pmCherry-N1-hAQP4-M23,检测AQP4-M23蛋白在中国仓鼠肺细胞系V79中的表达。方法:采用PCR方法扩增hAQP4-M23基因,经双酶切后与真核表达载体pmCherry-N1连接,构建pmCherry-N1-hAQP4-M23重组表达质粒。采用脂质体将其转染至V79细胞中,将细胞随机分为对照组(未转染重组质粒的V79细胞)和转染组(转染重组质粒的V79细胞)。利用RT-PCR法和荧光显微镜检测2组细胞中hAQP4-M23基因的表达;取视神经脊髓炎(NMO)患者血清中抗AQP4抗体,与2组细胞结合,采用免疫荧光和水通透性法检测2组细胞中hAQP4-M23的活性。结果:成功构建AQP4真核表达载体;荧光显微镜观察,转染组细胞膜清晰表达红色荧光;免疫荧光检测,转染组细胞膜呈现绿色荧光,表明转染组细胞膜AQP4-M23蛋白可与NMO患者血清成分结合;与对照组比较,转染组细胞中hAQP4-M23活性升高(P<0.05)。结论:成功构建表达AQP4基因的真核表达载体,并在V79细胞系中成功表达hAQP4-M23蛋白。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
真核细胞表达论文参考文献
[1].李君君,廖佩,文锋,罗泽宇,曹翊雄.携带TFPI-2基因的真核表达载体对SHI-1细胞生长的抑制作用[J].中国实验血液学杂志.2019
[2].许会静,刘晴,闫冰,刘微,张磊.AQP4真核表达载体的构建和AQP4-M23蛋白在中国仓鼠肺细胞系V79中的表达[J].吉林大学学报(医学版).2019
[3].龚小霞,李超,曹曦月,杨诚诚,黄超.人叉头转录因子O亚型6真核表达载体的构建及其对胶质瘤细胞存活的影响[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2019
[4].王孜恒,周敬伟,侯筱宇.Bax、Bad基因真核表达质粒构建及转染人胚肾细胞后的翻译水平观察[J].山东医药.2019
[5].徐丽,温贵兰,管国丹,张升波,李昌红.猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析[J].中国动物传染病学报.2019
[6].张寅斌,陈琳,孙诗雨,陈银溪,闫婉君.真核表达p27构建胃癌顺铂耐药细胞模型的研究[J].现代肿瘤医学.2019
[7].蔡辉,黄文利,孙朝辉.PcDNA3.1(+)/CYP11B2真核表达质粒的构建及其在NCI-H295R细胞中的表达[J].中国现代医药杂志.2019
[8].尹雪莉,张胜权,张学军.IL28RA真核表达载体的构建和对HaCaT细胞迁移能力的影响[J].安徽医科大学学报.2019
[9].王正印,尹元,陆群.SJIR-2基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究[J].热带病与寄生虫学.2019
[10].马小静,李继东,许立华.牛传染性鼻气管炎病毒gD基因真核表达载体的构建及其在细胞中的表达[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
论文知识图
