论文摘要
hyBl（hygB-like）基因簇是内生链霉菌SAT1中的次级代谢基因簇,经分析它与潮霉素B基因簇具有52%的相似性,可能在SAT1抑制栗疫菌（Cryphonectria parasitica）的过程中发挥主要作用。为了深入研究该菌的抑菌机制和hyBl基因簇的功能,以hyBl为目标,利用CRISPR/Cas9技术建立SAT1的基因簇敲除体系。在实验过程中,通过protospacer的筛选、敲除载体的构建、接合转移供体菌、Ca2+和Mg2+的选择以及接合时间等多个条件的探索,建立了SAT1的基因簇敲除体系。最终以E. coli ET12567（pUZ8002/pCRISPomyces2-CB）为供体菌,在MS培养基(含10 mmol Mg2+)上接合16-18 h,成功获得突变株SAT1△hyBl（缺失14 kb的hyBl基因簇）。突变株对栗疫菌的抑制带宽较野生株降低了77%,这说明该基因簇指导合成的次级代谢产物在抑制栗疫菌方面具有重要的功能。本研究证明了利用CRISPR/Cas9系统可以对内生链霉菌SAT1进行基因簇编辑,也为深入研究该菌的抑菌机制、基因工程法验证未知基因簇功能提供了良好的技术支撑。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 田文佳,窦桂铭,王莎,孙靖雅,马玉超
关键词: 系统,内生链霉菌,接合,基因簇敲除
来源: 生物技术通报 2019年06期
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学
单位: 北京林业大学生物科学与技术学院,北京林业大学林学院
基金: 中央高校基本科研业务费(2017ZY14),国家林业局公益项目(201304409),北京市科技新星项目(2011033)
分类号: Q78
DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-1080
页码: 1-8
总页数: 8
文件大小: 2487K
下载量: 416
相关论文文献
- [1].激活细菌沉默基因簇的研究进展[J]. 沈阳药科大学学报 2020(01)
- [2].四氢嘧啶基因簇在假单胞菌基因组中的分布研究[J]. 科技与创新 2020(12)
- [3].单细胞水平原钙黏蛋白基因簇的转录分析[J]. 江苏农业科学 2017(02)
- [4].基于基因簇判别的人类miRNA功能预测研究[J]. 中国细胞生物学学报 2016(12)
- [5].微生物沉默基因簇激活方法的研究进展[J]. 科技通报 2016(02)
- [6].空肠弯曲菌脂寡糖核心区合成相关基因簇遗传多样性研究[J]. 疾病监测 2020(01)
- [7].微生物源化合物合成基因簇异源表达研究进展[J]. 中国粮油学报 2015(09)
- [8].生物固氮基因簇结构与进化研究进展[J]. 中国农业科技导报 2013(04)
- [9].miR-106-363基因簇在脊椎动物中的进化分析[J]. 基因组学与应用生物学 2012(02)
- [10].鸡mir-17-92基因簇的结构、功能及其调控[J]. 动物学研究 2012(05)
- [11].MicroRNA基因簇的多样性与进化[J]. 中国科学(C辑:生命科学) 2009(01)
- [12].miR-1/133基因簇的进化及其调控网络[J]. 华中师范大学学报(自然科学版) 2018(02)
- [13].苏云金芽胞杆菌3-羟基丁酮代谢基因簇的转录调控[J]. 微生物学报 2015(09)
- [14].miR-17-92基因簇研究进展[J]. 国际妇产科学杂志 2014(02)
- [15].鸡miR-17-92基因簇上游调控区功能分析[J]. 遗传 2016(08)
- [16].人miR-17-92基因簇载体构建及其在293T细胞中的表达验证[J]. 生物技术通讯 2016(06)
- [17].基因组挖掘指导下的新颖Ⅰ型羊毛硫肽合成基因簇的解析及其异源表达体系的构建[J]. 生命的化学 2020(05)
- [18].MicroRNA-183基因簇对癌症诊断和调控机制的研究进展[J]. 生命科学 2018(06)
- [19].吸烟和CHRNA5-A3-B4基因簇上rs588765位点多态性与肺癌的关联[J]. 中华疾病控制杂志 2015(01)
- [20].人食管鳞状细胞癌细胞株hsa-miR-143/145基因簇表达生物学信息的分析[J]. 中华肿瘤防治杂志 2012(23)
- [21].通过CRISPR/Cas系统构建miR-17-92基因簇双切载体[J]. 东北林业大学学报 2017(02)
- [22].两性霉素B合成基因簇及其组合生物学进展[J]. 科技导报 2017(19)
- [23].DHRS4基因簇缺失型神经母细胞瘤细胞株的克隆和鉴定[J]. 解剖学研究 2011(02)
- [24].猪链球菌血清未分型菌株的荚膜多糖基因簇分析[J]. 疾病监测 2016(11)
- [25].番茄串联重复SlHSP20基因簇特征及差异表达分析[J]. 沈阳农业大学学报 2020(04)
- [26].MiR-183基因簇对动物感觉器官功能和发育及肿瘤发生的调控[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2012(07)
- [27].霍乱弧菌中TLC基因簇的变异性分析[J]. 中国卫生检验杂志 2011(06)
- [28].鸡miR-17-92基因簇靶基因ZFPM2的鉴定及功能分析[J]. 遗传 2017(04)
- [29].miR-17-92基因簇microRNAs对哺乳动物器官发育及肿瘤发生的调控[J]. 遗传 2009(11)
- [30].基因组挖掘默诺霉素生物合成基因簇的比较分析[J]. 基因组学与应用生物学 2019(09)