血竭醇提物对大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影响

血竭醇提物对大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影响

论文摘要

目的:研究血竭醇提物对大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影响。方法:采用只保留穿支血管切断其他血管的方法复制大鼠穿支皮瓣模型,造模成功后,将大鼠分为模型组(外敷,生理盐水)和血竭醇提取物(EESD,血竭素含量为75.08mg/g)组(外敷,0.21 g/cm2),每组10只,连续敷药7 d,每天1次。敷药7 d后测定各组大鼠穿支皮瓣存活率、皮瓣微血管密度。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧缺糖16 h后复氧复糖复制HUVEC缺氧缺糖/复氧复糖细胞模型,造模成功后,将细胞分为正常组、模型组和血竭素高、中、低浓度组(2.5、1.0、0.5μg/m L),于复氧复糖培养24 h后,采用显微镜观察各组细胞的形态,采用MTT法和比色法分别测定各组细胞的活性和细胞中一氧化氮(NO)的含量,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法检测丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达水平,PI3K蛋白的表达以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度。结果:在大鼠实验中,与模型组比较,EESD组大鼠穿支皮瓣存活率、微血管密度均显著增加(P<0.01)。在细胞试验中,与正常组比较,模型组HUVEC细胞存活率、NO含量,PI3K、Akt、eNOS mRNA的表达水平,PI3K蛋白的表达以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度均显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,血竭素高、中、低浓度组HUVEC细胞的存活率、NO含量,PI3K、Akt、eNOS m RNA的表达水平,PI3K蛋白的表达以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:EESD可提高大鼠穿支皮瓣模型的存活率,其机制可能与激活PI3K/Akt/eNOS通路保护内皮细胞有关。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 仪器
  •   1.2 药品与试剂
  •   1.3 动物
  •   1.4 细胞
  • 2 方法
  •   2.1 大鼠实验
  •     2.1.1 造模、给药与分组
  •     2.1.2 大鼠穿支皮瓣存活率测定
  •     2.1.3 穿支皮瓣病理学检查和微血管密度检测
  •   2.2 细胞试验
  •     2.2.1 HUVEC细胞缺氧缺糖/复氧复糖模型的建立及分组
  •     2.2.2 MTT法检测HUVEC细胞存活率
  •     2.2.3 血竭素对HUVEC细胞中NO含量的影响
  •     2.2.4 Akt、PI3K、eNOS的mRNA表达检测
  •     2.2.5 Western blot法检测Akt、PI3K、eNOS、p-Akt、p-eNOS蛋白的表达
  •   2.3 统计学方法
  • 3 结果
  •   3.1 大鼠实验结果
  •     3.1.1 EESD对大鼠穿支皮瓣模型存活的影响结果
  •     3.1.2 各组大鼠穿支皮瓣病理学检查及微血管密度检测
  •   3.2 细胞试验结果
  •     3.2.1 各组HUVEC细胞存活率检测结果
  •     3.2.2 各组HUVEC细胞中NO含量的检测结果
  •     3.2.3 各组HUVEC细胞中PI3K、Akt和e NOS mRNA表达的检测结果
  •     3.2.4 各组HUVEC细胞中PI3K、Akt、eNOS、p-Akt、p-eNOS蛋白表达结果
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张丽,张扬,王绪平,黄孝闻,吴人杰,寿旦

    关键词: 血竭醇提物,血竭素,穿支皮瓣,丝氨酸,苏氨酸激酶,磷脂酰肌醇激酶,内皮型一氧化氮合酶

    来源: 中国药房 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学,基础医学

    单位: 浙江中医药大学药学院,浙江省中医药研究院/中药研究中心

    基金: 浙江省自然科学基金资助项目(No.LQ17H280002),浙江省科技计划项目(No.2017C33165),浙江省中医药科技计划项目(No.2017ZA016)

    分类号: R285.5;R-332

    页码: 3252-3257

    总页数: 6

    文件大小: 1893K

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