葛根素对oxLDL诱导的THP-1巨噬细胞TLR4-NF-κB信号转导通路的影响

葛根素对oxLDL诱导的THP-1巨噬细胞TLR4-NF-κB信号转导通路的影响

论文摘要

目的:研究葛根素对人单核细胞系来源的THP-1巨噬细胞表达的炎症因子及TLR4-NF-κB信号通路的影响,探讨葛根素治疗动脉粥样硬化可能存在的调节机制。方法:100 nmol/L佛波酯(PMA)刺激THP-1细胞24 h,诱导其分化为巨噬细胞,再分别给予oxLDL(50μg/ml)、葛根素低剂量(10μg/ml)和葛根素高剂量(100μg/ml)干预。MTS法检测不同浓度葛根素对THP-1细胞增殖的作用;FCM法检测THP-1细胞凋亡比例;qPCR法检测炎性细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平;Western blot法及细胞免疫荧光法测定TLR4、MyD88、NF-κB蛋白含量和表达定位。结果:10μg/ml和100μg/ml葛根素对THP-1细胞增殖无抑制作用(P>0.05);低剂量(10μg/ml)和高剂量(100μg/ml)葛根素均能降低oxLDL诱导的THP-1细胞凋亡比例(P<0.01),下调炎性细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA水平(P<0.05)及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白质含量(P<0.05);细胞免疫荧光显示TLR4表达于细胞膜,MyD88表达于胞质,NF-κB表达于胞核,且低、高剂量葛根素均能抑制TLR4、MyD88和NF-κB的表达强度。结论:葛根素通过下调oxLDL诱导的THP-1细胞TLR4-NF-κB信号转导通路,进而抑制炎性因子表达,这可能是葛根素抗动脉粥样硬化的机制之一。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养
  •     1.2.2 MTS法检测细胞增殖能力
  •     1.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡
  •     1.2.4 qPCR检测IL-6、TNF-α、IL-1β及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA
  •     1.2.5 Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB表达
  •     1.2.6 细胞免疫荧光对TLR4定位
  •   1.3 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 PMA诱导分化的THP-1巨噬细胞
  •   2.2 不同浓度葛根素对oxLDL诱导的THP-1细胞增殖的影响
  •   2.3 葛根素对oxLDL诱导的THP-1细胞凋亡的影响
  •   2.4 IL-6、TNF-α、IL-1β及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达
  •   2.5 TLR4、 MyD88、 NF-κB蛋白表达
  •   2.6 细胞免疫荧光对TLR4、MyD88、NF-κB定位
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张程美,王高频

    关键词: 葛根素,低密度脂蛋白,炎症因子,动脉粥样硬化

    来源: 中国免疫学杂志 2019年22期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 锦州医科大学附属第一医院

    基金: 辽宁省科学事业公益研究基金(2015001014)资助

    分类号: R285.5

    页码: 2705-2710

    总页数: 6

    文件大小: 817K

    下载量: 335

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