太平洋牡蛎防御素在毕赤酵母中的重组表达及其抑菌活性

论文摘要

防御素是一类富含精氨酸和半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,是软体动物抵御各种病原微生物侵染的重要免疫因子。太平洋牡蛎防御素（Crassostrea gigas defensin,CgD）近羧基端的43个氨基酸残基构成了其成熟肽区域,决定了CgD的生物学活性。首先通过逆转录PCR和设计特异性引物从太平洋牡蛎外套膜中分离并扩增到3?端添加和不添加6×His标签的两种目的基因CgDH+和CgDH–;与pPICZαA连接后构建的重组表达载体（pPICZαA-CgDH+和pPICZαA-CgDH–）电转至毕赤酵母Pichia pastoris X-33中,使用1.0%甲醇诱导表达目的蛋白CgDH+和CgDH–,最适培养条件为29℃、250 r/min、72 h;通过固化金属离子亲和层析（IMAC）获得分子量为5.78 kDa的纯化的重组蛋白CgDH+,根据其蛋白质浓度推算表达量为2.32 mg/L。经MALDI-TOF-TOF质谱分析证明纯化产物即为预期的目的蛋白。抑菌试验结果显示分别含重组蛋白CgDH+和重组蛋白CgDH–的培养液上清对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和铜绿假单孢菌Pseudomonas aeruginosa都具有抑菌活性,表明重组蛋白中6×His标签的存在与否并不影响其生物学活性。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 崔旭,陶妍,王强厚,张亚莉,颜倩倩

关键词: 太平洋牡蛎,防御素,毕赤酵母,重组表达,抑菌活性

来源: 生物工程学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心

基金: 上海市科委工程中心能力提升项目(No.16DZ2280300)资助~~

分类号: Q78

DOI: 10.13345/j.cjb.180119

页码: 91-101

总页数: 11

文件大小: 2375K

下载量: 197

相关论文文献

• [1].优良牡蛎品种——太平洋牡蛎[J]. 科学种养 2011(06)
• [2].太平洋牡蛎人工育苗及养殖现状[J]. 齐鲁渔业 2008(04)
• [3].福建漳浦太平洋牡蛎微卫星等位基因比较[J]. 福建水产 2011(01)
• [4].四倍体与二倍体太平洋牡蛎离体精子的存活能力比较[J]. 海洋科学 2008(04)
• [5].太平洋牡蛎在活品流通过程中的质谱-肽组学分析[J]. 分析化学 2019(12)
• [6].我国北方太平洋牡蛎育苗及养殖现状[J]. 科学养鱼 2008(06)
• [7].山东省太平洋牡蛎良种场建设通过验收[J]. 科学养鱼 2009(05)
• [8].海湾扇贝养殖中预防太平洋牡蛎危害技术研究[J]. 河北渔业 2010(06)
• [9].P-糖蛋白对太平洋牡蛎在镉富集过程中的作用[J]. 中国食品学报 2018(07)
• [10].太平洋牡蛎与龙须菜互利,共享美丽南澳海区[J]. 海洋与渔业 2018(02)
• [11].太平洋牡蛎和葡萄牙牡蛎养殖群体数量性状比较分析[J]. 海洋通报 2014(01)
• [12].发酵法制备太平洋牡蛎水解液的功能特性及其抗氧化活性[J]. 水产科学 2013(11)
• [13].利用扇贝育苗车间繁育太平洋牡蛎技术[J]. 中国水产 2010(06)
• [14].太平洋牡蛎多糖的提取、分离和结构分析[J]. 中国海洋药物 2014(04)
• [15].单壁碳纳米管对太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)的毒性效应及生物体防御机制研究[J]. 生态毒理学报 2019(01)
• [16].太平洋牡蛎杂交三倍体与诱导三倍体的生长比较[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版) 2011(Z2)
• [17].高盐诱导太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)三倍体的初步研究[J]. 海洋湖沼通报 2015(01)
• [18].渤海湾太平洋牡蛎壳体记录的冬季停止分泌/春季恢复生长的最低水温[J]. 地球学报 2012(06)
• [19].镉在两种经济贝类体内富集与排出的动力学研究[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版) 2013(12)
• [20].太平洋牡蛎内切葡聚糖酶基因的克隆、序列特性和表达分析[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版) 2012(S1)
• [21].捕后干藏-复水处理对太平洋牡蛎活品贮藏稳定性的影响[J]. 大连海洋大学学报 2019(06)
• [22].雌性三倍体太平洋牡蛎减数分裂中期染色体观察[J]. 河北渔业 2014(04)
• [23].多棘海盘车对太平洋牡蛎、紫贻贝、菲律宾蛤仔摄食选择性的研究[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版) 2012(Z2)
• [24].气调包装对太平洋牡蛎冷藏保鲜效果的研究[J]. 食品工业科技 2009(05)
• [25].浒苔腐烂液的生物毒性及其对太平洋牡蛎胚胎发育的影响[J]. 海洋开发与管理 2019(08)
• [26].飞鸾：议政求实效[J]. 人民政坛 2009(01)
• [27].不同盐度下镉对太平洋牡蛎不同组织热休克蛋白70基因表达的影响[J]. 广西科学院学报 2019(04)
• [28].青岛市场上常见贝类铜污染情况调查[J]. 食品安全质量检测学报 2014(02)
• [29].太平洋牡蛎与葡萄牙牡蛎两近缘种间杂交及其早期阶段生长与存活的杂种优势[J]. 水产学报 2012(02)
• [30].太平洋牡蛎与近江牡蛎的种间杂交[J]. 水产学报 2012(08)

标签：太平洋牡蛎论文;  防御素论文;  毕赤酵母论文;  重组表达论文;  抑菌活性论文;