Cre-loxP重组酶技术敲除酿酒酵母丙酮酸脱羧酶编码基因pdc1和pdc5

论文摘要

目的:分别构建含有酿酒酵母丙酮酸脱羧酶基因pdc1和pdc5同源序列loxP-kanMX-loxP的质粒,敲除丙酮酸脱羧酶基因。方法:以两端含40 bp pdc1或pdc5的同源序列为引物,以pUG6质粒DNA为模板,通过PCR扩增loxP-kanMX-loxP基因敲除片段,将其分别插入pMD18-T、pEASY-T3,构建表达载体pTWCL-PDC1与pTWCL-PDC5并测序,构建后的质粒利用醋酸锂转化法转化酿酒酵母H5,经筛选鉴定后进行摇瓶发酵试验。结果:分别含有1693、1672 bp目的片段pdc1-loxP-kanMX、pdc5-loxP-kanMX的质粒pTWCL-PDC1与pTWCL-PDC5构建成功,发酵试验显示重组酿酒酵母H5-01与H5-02较原始菌株的乙醇产量分别下降了14.53%与17.54%,证明pdc1或pdc5基因被敲除。结论:利用Cre-loxP重组酶技术分别敲除了酿酒酵母pdc1和pdc5基因,为后续在酿酒酵母中连续敲除pdc1和pdc5奠定了良好的技术基础。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘磊,王长丽,葛菁萍

关键词: 酿酒酵母,丙酮酸脱羧酶,醋酸锂转化法,丁二醇

来源: 生物技术通讯 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心,黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室

基金: 国家自然科学基金(31570492),黑龙江省教育厅重点项目(HDJCCX-2016Z05)

分类号: Q78

页码: 479-485

总页数: 7

文件大小: 2065K

下载量: 194

相关论文文献

• [1].不同磷源对酿酒酵母发酵代谢产物的影响[J]. 云南化工 2020(08)
• [2].金属阳离子对酿酒酵母J-31发酵影响研究[J]. 中外酒业·啤酒科技 2017(13)
• [3].中国科学家人工合成4条酵母染色体[J]. 生物学教学 2017(08)
• [4].10种非酿酒酵母硫化氢产生能力及动态分析[J]. 中国酿造 2017(06)
• [5].清香型大曲酿酒酵母株系分类及其可挥发代谢产物分析[J]. 中国酿造 2017(09)
• [6].由酿酒酵母开启的重塑生命计划[J]. 科学大众(中学生) 2017(05)
• [7].中国“编写生命密码”将如何改变未来?[J]. 创新时代 2017(05)
• [8].刺梨自然发酵过程中非酿酒酵母多样性分析[J]. 微生物学报 2020(08)
• [9].葡萄酒酿造中非酿酒酵母的应用分析[J]. 农业与技术 2015(24)
• [10].国内生物分子学技术应用于酿酒酵母的研究进展[J]. 酿酒科技 2014(11)
• [11].酿酒酵母菌含量对控制橙汁腐败的影响[J]. 食品工业科技 2009(01)
• [12].酿酒酵母对制取杜梨种子的影响[J]. 北方果树 2020(06)
• [13].影响酿酒酵母发酵过程的因素分析[J]. 酿酒 2018(02)
• [14].一株非酿酒酵母的菌种诱变选育[J]. 中国酿造 2017(01)
• [15].优良非酿酒酵母的分离与发酵性能研究[J]. 酿酒科技 2016(06)
• [16].不同水平酿酒酵母处理玉米浆对玉米秸秆发酵品质的影响[J]. 中国畜牧杂志 2015(17)
• [17].新疆馕用优良酿酒酵母筛选[J]. 食品与生物技术学报 2020(05)
• [18].酿酒酵母几个组蛋白修饰间的因果组合关系分析[J]. 内蒙古大学学报(自然科学版) 2020(04)
• [19].酿酒酵母在传代过程中生理变化研究进展[J]. 生物工程学报 2018(03)
• [20].刺葡萄园土壤酿酒酵母的筛选及耐受性分析[J]. 中国酿造 2020(08)
• [21].景芝本土酿酒酵母的筛选与应用[J]. 酿酒科技 2020(10)
• [22].非酿酒酵母在葡萄酒生产中的作用及研究进展[J]. 中外葡萄与葡萄酒 2019(01)
• [23].酿酒酵母基因工程菌的构建及应用的研究[J]. 食品与生物技术学报 2013(01)
• [24].酿酒酵母中的谷氨酰转肽酶研究进展[J]. 食品科学 2011(11)
• [25].酿酒酵母对豆酱发酵影响研究[J]. 黑龙江八一农垦大学学报 2010(05)
• [26].酿酒酵母在动物生产中的应用研究进展[J]. 饲料研究 2019(07)
• [27].美国科研团队用酿酒酵母进行木糖发酵 生物燃料生产效率提高近一倍[J]. 生物产业技术 2016(06)
• [28].后基因组时代的酿酒酵母研究策略[J]. 中国农业科学 2012(23)
• [29].酿酒酵母中表达神经肉毒素A及其功能研究[J]. 食品与生物技术学报 2019(02)
• [30].酿酒酵母枸杞发酵物抗氧化性能研究[J]. 食品研究与开发 2017(19)

标签：酿酒酵母论文;  丙酮酸脱羧酶论文;  醋酸锂转化法论文;  丁二醇论文;