论文摘要
以PD-1分子为靶点,以中国仓鼠卵巢（CHO）细胞为宿主,构建高表达抗PD-1单克隆抗体的细胞株,优化细胞株筛选工艺,优化工艺参数,得到稳定高表达PD-1细胞株。运用悬浮细胞CHO表达抗PD-1的抗体,首先在质粒构建中,将重链和轻链插到同一个载体上,保证了重链和轻链的比例为1∶1,实现共表达,轻重链在一个载体上,再同PD-1基因共转染,对后面的基因扩增筛选提供基础。采用悬浮培养,使用化学成分确定的培养基CD培养基,支持重组CHO细胞的生长,达到高密度培养,从而得到高表达蛋白。结果表明蛋白表达量稳定性分析表明,筛选出两株表达量较高的细胞株,表达量分别达到2.03 g/L和2.09 g/L,为抗PD-1抗体的生产提供了稳定高产的细胞系。得到了稳定高表达PD-1细胞株,且蛋白质量与原研药一致。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 张勇,覃鸿妮,谢钰珍,王倩文
关键词: 单克隆抗体,细胞株,工艺开发
来源: 生物化工 2019年04期
年度: 2019
分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学
专业: 生物学
单位: 苏州工业园区服务外包职业学院,苏州智享众创孵化管理有限公司
分类号: Q813
页码: 9-13
总页数: 5
文件大小: 1299K
下载量: 279
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