导读:本文包含了夹心免疫分析论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:纸基电极,磁性石墨烯,电化学发光,免疫分析
夹心免疫分析论文文献综述
陈钰,王捷,刘仲明[1]（2017）在《一种基于磁性石墨烯的纸基电化学发光夹心免疫分析方法》一文中研究指出基于电化学发光及磁悬浮免疫分析策略,结合磁性石墨烯独特的物理化学特性以及纸基电极价格低廉、样品用量少的优势,建立了一种新型免疫分析方法。以人免疫球蛋白G(IgG)为分析物,采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺/N-羟基硫代琥珀酰亚胺(EDC/NHS)法将一抗(Ab_1,捕获抗体)固定在磁性石墨烯上,通过直接标记法进行二抗(Ab_2,信号抗体)的电化学发光试剂标记,采用磁悬浮夹心免疫技术最大程度减少非特异性吸附,通过纸基电化学发光检测技术测定目标物的浓度。考察了捕获抗体及信号抗体的固定(标记)效果,发现采用的磁性石墨烯不仅提高了免疫物质的负载量,还可以促进电子传递,构建的磁悬浮纸基电化学发光夹心免疫分析法的电化学发光响应峰面积在0.32~1000 ng/mL浓度范围内,与IgG浓度对数值呈良好的线性关系,检出限为6.4 pg/mL。本方法可实现IgG的定量检测,在低成本、快速免疫检测领域有一定的应用前景。(本文来源于《分析化学》期刊2017年10期）
兰韬,席兴军,初侨,任吉存[2]（2016）在《高灵敏光子爆发均相夹心免疫分析法的建立及其在甲胎蛋白(AFP)检测上的应用》一文中研究指出金纳米粒子(GNPs)在高聚焦的激光束照射下可发出很强的共振散射光,并由此产生强烈的光子爆发现象~([1]),可通过雪崩型光电二极管将爆发的光子信号转换为电信号记录下来。研究发现光子爆发数与GNPs浓度之间存在良好的线性关系,同时该方法具有很好的重现性~([2])。作为一种超灵敏的单分子检测技术,在生物分析上具有广阔的应用前景。本文发展了一种新颖的基于单个纳米粒子共振光散射光子爆发计数技术的均相夹心免疫方法,并将该方法应用一种癌症标志物—α-甲胎蛋白(AFP)的检测中。其方法的原理类似于散射相关光谱方法,采用金纳米粒子标记抗体或抗原。在夹心免疫分析中,免疫反应后GNPs会形成一些二聚或者低聚体,导致了溶液中粒子数目减少,进而引起光子爆发数目减少,这一变化可以通过光子爆发计数检测技术灵敏的表征。由实验室自行搭建的共振光散射光子爆发检测系统~([3])可以非常灵敏的记录竞争反应前后GNPs光子爆发的变化。基于此平台,对AFP进行了定量分析,并对免疫反应的条件进行了系统优化。在最佳状态下,此方法的线性范围为1 pM—10 nM,方法检测限为1 pM。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第叁分会：纳米传感新原理新方法》期刊2016-07-01）
饶美芳,伍伟健,许超,毛小晓,徐振林[3]（2016）在《小分子化合物开放夹心免疫分析研究进展》一文中研究指出基于抗原-抗体识别的免疫分析技术在小分子监测领域占有重要地位,已成功应用于生理活性物质、化学有害物、农兽药等的快速检测,在临床诊断、环境、食品以及卫生领域发挥重要作用。由于缺乏结合位点,小分子化合物的分析大多采用竞争模式,与传统的叁明治夹心法相比,稳定性和灵敏度往往都难以满足实际检测需求。近几年来,科学家开始尝试建立针对小分子化合物的非竞争模式免疫分析方法,比如基于抗独特型抗体、基于抗体可变区片段、基于抗异型抗体及抗免疫复合物多肽。其中基于抗体重链和轻链结合的开放夹心免疫分析由于具有只需要单个抗体、快速非竞争的均相检测小分子等优点,备受研究者关注。本文主要综述基于抗体可变区片段的小分子非竞争免疫分析方法,重点介绍了建立小分子非竞争检测模式所需要抗体可变区的获得及筛选途径、几种形式信号放大载体的研究现状,最后对其在小分子物质检测领域的应用前景进行了评述,期望能为本领域研究提供借鉴。(本文来源于《食品科学》期刊2016年07期）
张挺[4]（2014）在《热加工食品中α-乳白蛋白双抗夹心酶联免疫分析法的建立》一文中研究指出建立热加工食品中α-乳球蛋白的双抗夹心酶联免疫检测检测方法。以热处理的α-乳白蛋白为抗原,制备抗α-乳白蛋白的高特异性单克隆抗体,并将以此蛋白作为包被抗体,构建双抗夹心ELISA方法。本方法标准曲线的IC50为360 ng/mL,方法的灵敏度为10 ng/mL。以尿素作为提取液可以大大提高热加工食品中α-乳白蛋白的提取率,添加回收率在76%~89%之间,相对标准偏差小于15%。该方法能准确地识别热加工的奶制品,避免了传统免疫方法在热加工奶制品检测上的假阴性。(本文来源于《广东轻工职业技术学院学报》期刊2014年03期）
张留圈,张霄,刘媛,徐重新,张存政[5]（2014）在《基于磁珠和双抗夹心免疫分析的Bt Cry1Ac毒素单链抗体筛选与鉴定》一文中研究指出【目的】通过设计并优化生物素-亲和素标记磁珠筛选策略,建立针对Cry1Ac毒素的新型双抗夹心ELISA检测方法,为研究灵敏、快速的Bt毒素的检测方法建立一种新的检测模式。【方法】采用磁珠液相正负筛选方法,经过4轮筛选后,对每轮筛选后抗Cry1Ac毒素特异性结合噬菌体抗体的富集效果进行鉴定,通过单克隆ELISA方法从第4轮筛选得到的次级库中获得特异性结合Cry1Ac的阳性克隆,并对其进行PCR鉴定和DNA测序,确定有完整插入的scFv片段后进行后期相关试验。将相对结合活性最好的阳性克隆scFv-A12替换宿主菌HB2151中进行可溶性诱导表达并纯化。利用纯化后的scFv-A12作为"捕获抗体",Anti-Cry1Ac兔多克隆抗体作为"检测抗体",建立针对Cry1Ac的双抗夹心ELISA检测方法。【结果】以生物素化的Cry1Ac蛋白为包被原,利用噬菌体抗体库对其进行了4轮液相筛选。结果显示,相对产出率随着筛选轮数的增加而提高,第4轮较第1轮提高了42倍;单克隆噬菌体ELISA鉴定抗Cry1Ac噬菌体抗体,以试验孔OD450/阴性孔OD450大于2.1为阳性标准,从第4轮筛选后的培养皿中随机挑选了300个菌落,经单克隆ELISA鉴定出6个阳性克隆,分别命名为hsCry1Ac-C5、hsCry1Ac-D8、hsCry1Ac-C12、hsCry1Ac-A12、hsCry1Ac-F9和hsCry1Ac-F4。其中,hsCry1Ac-A12具有相对较高的亲和力。对上述6个阳性克隆进行菌液PCR检测发现,在935 bp处均有明显的目的条带,通过对其进行测序和氨基酸序列比对,最终得到4株不同氨基酸序列的阳性克隆。hsCry1Ac-A12在成功替换宿主菌HB2151后,经1 mmol·L-1 IPTG诱导表达,于30℃条件下培养过夜。其表达产物经His Trap HP镍亲和柱纯化后SDS-PAGE检测,hsCry1Ac-A12蛋白分子量约为30 kD。通过方阵滴定对抗体浓度进行优化后,利用单链抗体为"捕获抗体",多抗为"检测抗体",建立了Cry1Ac双抗夹心ELISA检测方法。在1.25—2.43μg·mL-1线性检测范围内,线性回归方程为Y=0.2522X+1.2832(R2=0.9564),检测限为1.08 ng·mL-1。【结论】利用磁珠液相筛选方法,建立了针对Cry1Ac毒素的双抗夹心ELISA检测方法,为快速、准确检测转基因食品中Cry1Ac提供了一种新的检测模式。(本文来源于《中国农业科学》期刊2014年09期）
张留圈[6]（2014）在《基于磁珠和双抗夹心免疫分析的Bt Cry1Ac毒素单链抗体筛选、鉴定及应用》一文中研究指出苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis，简称Bt）在芽孢期会产生一种伴孢晶体，也称为杀虫晶体蛋白（insecticidal crystal proteins，ICPs），有很强的杀虫活性。长期以来，Bt毒素被认为是安全的抗虫类药物，同时Bt基因也是转基因食品中使用最广泛且最有效的杀虫基因，并且被广泛应用于基因工程中。近年的大量研究结果表明，随着Bt基因作物的大面积种植，在带来极其显着的经济效益的同时，对环境存在着一定的生态风险，同时对人类和其他哺乳动物也有安全隐患。因此，无论是对于环境中的Bt毒素残留量，还是对于转Bt基因作物的蛋白表达量，都需要建立一套操作简单、反应灵敏及准确度高的检测方法。Cry1Ac蛋白是应用范围最广泛的一种Bt毒素，近年来对其检测方法主要有聚合酶链式反应（PCR）、酶联免疫反应（ELISA）、生物测定、免疫PCR、放射性免疫分析、时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）、蛋白质印迹法等。目前检测Cry类毒素的ELISA检测方法均是基于单、多抗的双抗夹心检测模式，而利用高亲和力、高特异性的基因工程抗体-单链抗体（Single-chain variable fragments, scFv）进行检测的报道很少。本研究在国内外研究基础上，避开传统的固相筛选方法，充分利用抗原立体结构暴露的特点，选用磁珠液相筛选模式，利用该方法筛选效率高、节约抗原等优势，以期从人源噬菌体抗体库中筛选出抗Cry1Ac蛋白毒素的单链抗体，以期为转基因食品中Bt毒素的分布研究与检测奠定基础。主要试验结果包括以下几个方面：1、通过设计并优化生物素-亲和素标记磁珠筛选策略，采用磁珠液相正负筛选方法，从库容约为108的人源噬菌体抗体库中筛选出抗Cry1Ac毒素单链抗体。2、通过方阵滴定方法对双抗夹心ELISA反应条件进行优化，单链抗体作为双抗夹心ELISA的捕获抗体，其包被最佳稀释倍数为125倍，双抗夹心检测模式Anti-Cry1Ac-PAbs作为检测抗体的最佳稀释倍数为1:1000。根据优化结果，建立双抗夹心ELISA方法检测Cry1Ac毒素，所得出的线性回归方程式为Y=0.4111X+0.0821(R2=0.9751)，最低检测限为0.91ng∕mL，线性检测范围在1.04ng∕mL~3.49μg∕mL。3、将Cry1Ac毒素及其它毒素作为抗原检测抗体的特异性，表明Cry1Ac毒素组呈显着阳性反应，与阴性孔OD值之比为5.16，Cry1Ab、Cry1C、Cry1B、Cry1F这几种Cry1Ac毒素类似物均呈阴性反应，与阴性孔OD值比均小于2.1，因此，该抗Cry1Ac毒素的单链抗体对Cry1Ac毒素具有明显特异性。4、对Cry1Ac毒素进行添加回收试验，经统计学处理后的变异系数（CV）值均小于15%，说明该检测结果具有良好的重复性和准确度，该方法能满足Cry1Ac毒素蛋白质残留的检测要求。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01）
张世伟,赖心田,陈血剑,陈薇,张秦蕾[7]（2013）在《双抗夹心酶联免疫分析法检测燕窝中唾液酸糖蛋白》一文中研究指出为鉴定假冒伪劣售燕窝产品,建立一种燕窝中唾液酸糖蛋白双抗夹心酶联免疫检测检测方法。以唾液酸糖蛋白为抗原,分别制备唾液酸糖蛋白的多克隆和单克隆抗体。将单克隆抗体为包被抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆抗体为二抗构建燕窝唾液酸糖蛋白的双抗夹心ELISA方法。本方法的IC50为2.3 ng/mL,样品的添加回收率为92%-96%,相对标准偏差小于10%。本方法稳定可靠,能满足燕窝中唾液酸糖蛋白准确、快速的定量检测需要。(本文来源于《食品工业》期刊2013年06期）
谭玉华,孙勇,吴道贫,陈建起[8]（2013）在《丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法的建立》一文中研究指出目的建立丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法。方法采用丙型肝炎病毒基因重组多表位嵌合蛋白作为包被抗原,生物素标记抗原作为桥接抗原,链霉亲和素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰叁氟丙酮为主要成分的增强液,自建方法的校准品以国家标准血清物质GBW(E)090047为溯源,应用桥式双抗原夹心法建立丙型肝炎病毒抗体时间分辨荧光免疫分析法。结果自建方法在0.031～4.00NCU/ml内,相关系数可达0.99;分析内和分析间变异系数均小于10%;灵敏度可达0.016NCU/ml;校准品的效价比在0.90～1.10,平均回收率为101.47%;与相关疾病的抗原或抗体无明显交叉反应,其表观浓度值均小于0.03NCU/ml;参考值为0.05NCU/ml;符合国家检定标准的要求;37℃恒温箱烘烤7d后检测性能无明显改变;与同类方法学比对符合性好。结论自建方法精密度好,灵敏度高,特异性强,准确性好,线性范围宽,符合率高,能满足临床检测需要。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2013年09期）
苏军,李瑞娟,杨萌萌,李鹏聪,张鑫[9]（2013）在《夹心与竞争化学发光免疫分析检测人血清透明质酸的比较分析》一文中研究指出目的:比较人血清透明质酸(HA)夹心化学发光免疫分析和竞争化学发光免疫分析,对两种方法的相关性、线性范围和检测效果进行评价。方法:分别应用人血清HA夹心和竞争化学发光免疫分析对197例血清样本进行HA含量检测,并对检测结果进行分析,同时对两种方法的精密度、回收率和灵敏度进行比较。结果:夹心法的准确性和精密度都要高于竞争法,在95%可信限下其检测灵敏度能达到0.66μg/L,而竞争法只能达到7.26μg/L,两种方法均能准确测定血清中HA含量,其相关性良好,线性关系为y=1.1893x-25.974(r=0.9871),两组数据之间没有显着性差异(t=1.966,P>0.05)。结论:两种方法都能准确测量人血清中HA含量,但夹心化学发光免疫分析的灵敏度、重复性、回收率都优于竞争法。(本文来源于《放射免疫学杂志》期刊2013年01期）
张世伟,赖心田,洪晓明,王珍妮,李锐[10]（2012）在《双抗夹心酶联免疫分析法检测食品中鸡蛋过敏原》一文中研究指出[目的]建立食品中鸡蛋过敏原的酶联免疫检测方法。[方法]以卵白蛋白为检测对象,分别制备抗卵白蛋白的多克隆和单克隆抗体。将单克隆抗体作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记多克隆抗体为二抗构建卵白蛋白的双抗夹心ELISA方法。[结果]该方法的IC50为260 ng/ml,检出限为10 ng/ml,样品的添加回收率为84.2%～89.8%,相对标准偏差小于10%。[结论]该试验建立的分析方法稳定可靠,能满足食品中鸡蛋过敏原准确、快速的检测需要。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2012年32期）
夹心免疫分析论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
金纳米粒子(GNPs)在高聚焦的激光束照射下可发出很强的共振散射光,并由此产生强烈的光子爆发现象~([1]),可通过雪崩型光电二极管将爆发的光子信号转换为电信号记录下来。研究发现光子爆发数与GNPs浓度之间存在良好的线性关系,同时该方法具有很好的重现性~([2])。作为一种超灵敏的单分子检测技术,在生物分析上具有广阔的应用前景。本文发展了一种新颖的基于单个纳米粒子共振光散射光子爆发计数技术的均相夹心免疫方法,并将该方法应用一种癌症标志物—α-甲胎蛋白(AFP)的检测中。其方法的原理类似于散射相关光谱方法,采用金纳米粒子标记抗体或抗原。在夹心免疫分析中,免疫反应后GNPs会形成一些二聚或者低聚体,导致了溶液中粒子数目减少,进而引起光子爆发数目减少,这一变化可以通过光子爆发计数检测技术灵敏的表征。由实验室自行搭建的共振光散射光子爆发检测系统~([3])可以非常灵敏的记录竞争反应前后GNPs光子爆发的变化。基于此平台,对AFP进行了定量分析,并对免疫反应的条件进行了系统优化。在最佳状态下,此方法的线性范围为1 pM—10 nM,方法检测限为1 pM。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
夹心免疫分析论文参考文献
[1].陈钰,王捷,刘仲明.一种基于磁性石墨烯的纸基电化学发光夹心免疫分析方法[J].分析化学.2017
[2].兰韬,席兴军,初侨,任吉存.高灵敏光子爆发均相夹心免疫分析法的建立及其在甲胎蛋白(AFP)检测上的应用[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第叁分会：纳米传感新原理新方法.2016
[3].饶美芳,伍伟健,许超,毛小晓,徐振林.小分子化合物开放夹心免疫分析研究进展[J].食品科学.2016
[4].张挺.热加工食品中α-乳白蛋白双抗夹心酶联免疫分析法的建立[J].广东轻工职业技术学院学报.2014
[5].张留圈,张霄,刘媛,徐重新,张存政.基于磁珠和双抗夹心免疫分析的BtCry1Ac毒素单链抗体筛选与鉴定[J].中国农业科学.2014
[6].张留圈.基于磁珠和双抗夹心免疫分析的BtCry1Ac毒素单链抗体筛选、鉴定及应用[D].西北农林科技大学.2014
[7].张世伟,赖心田,陈血剑,陈薇,张秦蕾.双抗夹心酶联免疫分析法检测燕窝中唾液酸糖蛋白[J].食品工业.2013
[8].谭玉华,孙勇,吴道贫,陈建起.丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法的建立[J].中华临床医师杂志(电子版).2013
[9].苏军,李瑞娟,杨萌萌,李鹏聪,张鑫.夹心与竞争化学发光免疫分析检测人血清透明质酸的比较分析[J].放射免疫学杂志.2013
[10].张世伟,赖心田,洪晓明,王珍妮,李锐.双抗夹心酶联免疫分析法检测食品中鸡蛋过敏原[J].安徽农业科学.2012