李亚琳[1]2003年在《北方山溪鲵和隆肛蛙精巢的组织学和免疫组织化学研究》文中指出精子发生受多种内外界因素的影响，性类固醇激素是主要的调节因素。本研究运用组织学方法对北方山溪鲵和隆肛蛙每个月精巢的组织结构进行了系统的观察，以揭示其精子发生和精巢发育的年周期变化；并首次运用免疫组织化学方法观察了睾酮、雌二醇、孕酮叁种类固醇激素及其受体在这两种动物精巢中的分布，以探讨这叁种类固醇激素及其受体与精子发生的关系；还观察了原癌基因c-fos和c-myc在这两种两栖动物精巢中的表达，以研究其在精子发生过程中的作用。实验分析得到的结论如下： 1．山溪鲵的精子发生从每年的8月开始，此时精原细胞开始增殖，到冬季停止或减慢进行，然后到次年4-5月份又进入增殖高峰。6-7月为精母细胞成熟分裂期，8-11月为精子形成期，成熟精子一直贮存在精巢内，直到第叁年的3-4月份再排出。因此，从精原细胞增殖到精子完全排出共经历20-21个月。在此期间，成熟精子贮存在精巢小叶末端的管腔内或在输精管内越冬，贮存期为7-9个月。 2．隆肛蛙精子发生的个体差异较明显，就个体而言，从精原细胞开始增殖到精子完全变态所需的时间很短，但就种群而言，其精子发生过程所需的时间持续较长。其精子发生从每年的6、7月份开始，8、9月份形成成熟精子。成熟精子贮存在精巢内越冬，直到第二年的4、5月份排出。精子发生从精原细胞增殖到成熟精子排出共经历11-12个月。精原细胞的增殖是否从11月份就开始还有待探讨。隆肛蛙因对寒冷的气候很敏感，在外界活动的时间短，使其从精原细胞到成熟精子发育的时间很短，精原细胞很快增殖并进行成熟分裂而成为成熟精子。 3．山溪鲵精巢中的间质细胞在每年的4-5月和9-10月产生T，但精原细胞的增殖并不依赖于T，T可能与生殖行为的发生和精子的形成密切相关。隆肛蛙秋季精巢的支持细胞中大量的T可能通过旁分泌作用参与精子的充分成熟。T通过雄激素受体的介导，以基因组效应方式起作用。间质细胞中的AR可能在原位介导T发生作用，通过负反馈方式抑制间质细胞产生类固醇激素。 4．E_2以基因组效应方式起作用，它直接作用于生精细胞启动精子的发生。在两栖动物，E_2可能也通过支持细胞对间质细胞的功能进行负反馈调节，进而影响T的产生。E_2和ER也可能参与精子细胞的变态和精子成熟的调节。 5．P和PR通过基因组效应可能在精子的发育过程中起作用。P和PR与精子的发生和成熟密切相关，P可能参与支持细胞与精子之问的信息传递，也可能直接参与精子的成熟调节。 6．C－fOS产物从精原细胞胞质中转移到胞核中后通过启动DNA的转录而调控精原细胞的增殖，从而促进精子发生的进程。c－厂Os产物还可以直接作用于问质细胞调控其产生类固醇激素，并参与支持细胞与生精细胞的信息传递＊的含量与C－fOS的表达也有直接关系。 7．随着精子发育时期的不同，CngC产物在山溪蜕精巢中有从生殖细胞的胞质向胞核中转移的趋势。ewe也是作为核转录因子通过诱导DNA的转录而调控精子的发育过程。
雷忻[2]2003年在《隆肛蛙和北方山溪鲵卵巢组织学及免疫细胞化学研究》文中研究指明两栖动物卵泡的发育是一个受多种因素调控的极为复杂的过程，性类固醇激素及其受体、原癌基因在这一过程中起着重要的调控作用。性类固醇激素及其受体、原癌基因在卵泡发育周期中的作用、以及叁者之间相互关系的研究，在卵子发育机制的研究中具有重要的意义。本研究以隆肛蛙和山溪鲵为材料，运用组织学方法，对其卵泡发育周期进行分析；并首次运用免疫细胞化学方法，对两种两栖动物类固醇激素雌二醇、孕酮和睾酮及其受体、原癌基因c-myc、c-fos在卵泡发育中的调控作用，以及激素、受体、原癌基因叁者之间的关系进行了初步研究，结果如下： 1．隆肛蛙的卵巢存在着显着的个体差异，就每个雌体而言，一年只排一次卵，排卵时间很短。但就秦岭山区的隆肛蛙种群而言，排卵期为每年的4-6月。10月下旬至翌年3月隆肛蛙卵巢处于休眠期。 2．山溪鲵卵泡发育个体差异较小，为一年一次排卵，时间在每年3-4月，4-10月为卵泡发育阶段，11月下旬至翌年3月为冬眠期。 3．隆肛蛙和山溪鲵卵泡闭锁的意义之一可能是控制卵母细胞的数量，以有限的营养物质保证一定数量卵母细胞成熟。闭锁黄体主要发生在Ⅲ、Ⅳ期卵泡中，可能具有分泌类固醇激素的功能。 4．隆肛蛙卵巢滤泡细胞是合成与分泌雌二醇和孕酮的场所，膜细胞是合成与分泌睾酮的场所，两种类型细胞相互协作，共同完成其分泌活动。从形态学和免疫细胞化学的角度证明，用两类细胞模型解释卵巢类固醇激素的合成与分泌是合理的。 5．山溪鲵叁种卵巢类固醇激素可能都是在滤泡细胞中合成，膜细胞不具有内分泌功能，说明卵巢分泌细胞并未发生功能上的分化，表现出有尾两栖动物生殖功能的原始性。 6．雌二醇在隆肛蛙和山溪鲵的卵黄合成和积累中起重要作用，孕酮与睾酮在隆肛蛙卵母细胞成熟中、孕酮在山溪鲵卵母细胞成熟中起着重要的调节作用。说明，在卵母细胞发育中，有尾两栖类和无尾两栖类性类固醇激素的作用有一些差异。叁种类固醇激素存在相互转化的关系，睾酮可能在雌二醇和孕酮的转化中起着底物的作用，这种转化与某种芳香化酶的活性有关。 7．在隆肛蛙和山溪鲸滤泡细胞中，类固醇激素受体可能在类固醇激素的合成和分泌中起一定的调控作用，并且，在滤泡细胞的生长发育中也有重要的作用。类固醇激素受体在卵母细胞中可能通过两种途径发挥作用，一种是存在于胞质中，作为信号转导因子的非基因组调控机制；另一种是存在于核中，作为核转录活性因于，改变基因转录活动的基因组调控机制。这两种作用方式可能同时存在，相互协作，共同调控卵母细胞的发育和成熟。 8．在隆肛蛙和山溪鲸卵母细胞发育早期，C－p可能起一定的调节作用，而CghS则可能在发育中、后期起作用。在整个发育过程中，两种原癌基因与卵巢类固醇激素有一定的相关性。此外，两种原癌基因还可能在滤泡细胞中发挥作用。 9．隆肛蛙和山溪鳃闭锁黄体具有内分泌功能，可以协助滤泡细胞合成雌二醇，以保证卵黄的合成。闭锁黄体中的雌激素受体可能在其内分泌功能中起着重要的调控作用，维持适量雌二醇的分泌，以保证卵母细胞的正常发育。
参考文献：
[1]. 北方山溪鲵和隆肛蛙精巢的组织学和免疫组织化学研究[D]. 李亚琳. 陕西师范大学. 2003
[2]. 隆肛蛙和北方山溪鲵卵巢组织学及免疫细胞化学研究[D]. 雷忻. 陕西师范大学. 2003