马铃薯stuProT1.2基因的克隆与非生物胁迫的表达分析

马铃薯stuProT1.2基因的克隆与非生物胁迫的表达分析

论文摘要

为了探究马铃薯脯氨酸转运蛋白在逆境下的功能,以马铃薯GS393 (Solanum commersonii-LZ3.4-Wisconsin, United States)为试验材料,采用PCR的方法,克隆得到2个脯氨酸转运蛋白基因分别命名为stuProT1和stuProT2,它们的开放阅读框长度分别为504 bp和600 bp,分别编码189个和199个氨基酸。系统进化树分析结果表明,这2个蛋白和番茄ProT蛋白具有高度同源性。实时荧光定量PCR表明,stuProT1和stuProT2基因在GS393不同组织(根,茎,叶,匍匐茎和块茎)中均有表达,其中根和茎的表达量较高。q PCR分析这2个基因在不同激素、重金属、低温、干旱和盐胁迫下的表达情况。分析结果表明:ABA抑制stuProT1和stuProT2基因表达(36 h内);2个基因分别在GA3、IAA、6-BA处理的2 h、8 h、24 h出现诱导表达峰值。供试重金属都能诱导2个基因的表达,其中Al、Cd、Hg处理48 h内始终处于上调水平,不同处理诱导表达峰值出现时间不同;Cu处理下2 h时出现表达峰值,其他时间回调。stuProT1和stuProT2基因对PEG-6000处理十分敏感,处理时间内始终高水平表达。NaCl处理2~8 h内出现高水平表达,之后回调。4℃和-4℃处理下2个基因都表现为先下调后回升的特点。综合分析表明stuProT2比stuProT1在各种胁迫条件下的响应更强烈。本研究弄清了在非生物胁迫下,ProT是脯氨酸高度选择的运输的转运体。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 stuProT1和stuProT2的克隆与序列分析
  •   1.2 stuProT1和stuProT2序列特征
  •   1.3 stuProT1和stuProT2蛋白同源性及系统进化树分析
  •   1.4 stuProT1和stuProT2基因启动子序列分析
  •   1.5 stuProT1和stuProT2基因的表达分析
  •     1.5.1 组织表达特异性分析
  •     1.5.2 对不同激素胁迫的响应分析
  •     1.5.3 对不同重金属胁迫的响应
  •     1.5.4 对干旱和盐胁迫的响应
  •     1.5.5 对低温胁迫胁迫的响应
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 试验材料
  •   3.2 材料处理
  •   3.3 总RNA的提取
  •   3.4 引物设计和PCR反应体系
  •   3.5 序列生物信息学分析
  •   3.6 实时定量PCR反应
  •   3.7 数据分析
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王明,谢洁,丁红映,熊兴耀,王万兴,秦玉芝

    关键词: 马铃薯,脯氨酸转运蛋白,基因克隆,表达分析,非生物胁迫

    来源: 分子植物育种 2019年19期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,农作物

    单位: 湖南农业大学园艺园林学院,中国农业科学院蔬菜花卉研究所,湖南农业大学南方粮油作物协同创新中心

    基金: 国家自然科学基金项目(31371683),国家重点研发计划(2017YFD0101905),国家马铃薯产业技术体系-长沙综合试验站(CARS-09-ES16)共同资助

    分类号: S532;Q943.2

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.006243

    页码: 6243-6255

    总页数: 13

    文件大小: 3457K

    下载量: 124

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