论文摘要
目的探讨微小RNA-216（miR-216）靶向调控高迁移率族蛋白A2（HMGA2）对宫颈癌细胞侵袭和迁移的影响。方法采用RT-qPCR法检测人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、CaSki和人正常宫颈上皮细胞H8中miR-216表达,选取miR-216表达最低的宫颈癌细胞进行后续实验。将miR-216表达最低的宫颈癌细胞随机分为观察组与对照组,分别转染miR-216 mimics、miR-216 NC。转染24 h,收集细胞,采用RT-qPCR法检测转染效率,采用Transwell迁移实验和Boyden侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用Western blotting法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达。采用TargetScan软件预测HMGA2 3′UTR与miR-216的结合位点。取上述miR-216表达最低的宫颈癌细胞,随机分为miR-216 mimics+HMGA2 WT组、miR-216 mimics+HMGA2 MUT组、miR-216 NC+HMGA2 WT组、miR-216 NC+HMGA2 MUT组,miR-216 mimics+HMGA2 WT组转染miR-216 mimics和HMGA2 WT,miR-216 mimics+HMGA2 MUT组转染miR-216 mimics和HMGA2 MUT,miR-216 NC+HMGA2 WT组转染miR-216 NC和HMGA2 WT,miR-216 NC+HMGA2 MUT组转染miR-216 NC和HMGA2 MUT。转染24 h,收集细胞,采用双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性。结果 HeLa、SiHa、CaSki细胞miR-216相对表达量均明显低于H8细胞（P均<0.05）。在宫颈癌细胞中以HeLa细胞miR-216相对表达量最低,故选择HeLa细胞进行后续实验。观察组miR-216相对表达量明显高于对照组（P<0.05）。Transwell迁移实验和Boyden侵袭实验时,观察组穿膜细胞数均低于对照组（P均<0.05）。观察组MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量均低于对照组（P均<0.05）。TargetScan软件预测结果显示,HMGA2是miR-216的靶基因。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-216 mimics+HMGA2 WT组荧光素酶活性低于miR-216 NC+HMGA2 WT组（P<0.05）,而miR-216 mimics+HMGA2 MUT组与miR-216 NC+HMGA2 MUT组荧光素酶活性比较P>0.05。结论 miR-216能够通过靶向调控HMGA2抑制宫颈癌细胞侵袭和迁移。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 曾康康,郑蓉,刘永珍,贺敏
关键词: 宫颈癌,微小,高迁移率族蛋白,细胞侵袭,细胞迁移
来源: 山东医药 2019年31期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 妇产科学,肿瘤学
单位: 十堰市太和医院
分类号: R737.33
页码: 14-18
总页数: 5
文件大小: 172K
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