导读:本文包含了嗜碱性芽孢杆菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:芽孢,碱性,环糊精,杆菌,蛋白酶,葡萄糖,纤维素酶。
嗜碱性芽孢杆菌论文文献综述
杨丽[1]（2015）在《嗜碱性类芽孢杆菌产β-环糊精葡萄糖基转移酶发酵条件的优化》一文中研究指出以一株Ε-环状糊精葡萄糖基转移酶高产菌株YR为研究对象,对其发酵条件及酶学特性进行初步研究。对该菌株发酵培养基的碳源、氮源和p H进行单因子分析,并对该3个因素进行正交实验确定该菌的最佳发酵培养基配方为:0.3%马铃薯淀粉,0.5%酵母膏,0.13%K2HPO4?3H2O,0.5%Na2CO3,0.02%Mg SO4?7H2O,p H为9.0。在该条件下,菌株YR产Ε-CGTase的酶活由优化前1620.28U/m L提高到4456.34U/m L,比出发菌酶活提高了2.75倍。(本文来源于《轻工科技》期刊2015年04期）
岳艳[2]（2014）在《棕帘固定化嗜碱性芽孢杆菌制备CGTase的研究》一文中研究指出环糊精工业生产过程中，菌种生长产酶是最关键的步骤之一。然而，由于受到环境和操作条件等因素影响使其极不稳定。固定化细胞的方法可以增加菌种的生长稳定性，缩短种子培养周期，并且能够反复多次使用。棕帘具有环境友好、耐腐蚀性强、可循环利用等特点，常用于水产养殖附苗。本文首次利用棕帘为载体对嗜碱性芽孢杆菌ATCC21783进行固定化，研究了固定化条件、摇瓶发酵条件、发酵罐发酵条件及应用在环糊精生产中的效益，初步确定了棕帘固定化细胞在工业生产环糊精中的可行性。固定化方法和载体的选择。研究了以棕帘、丝瓜瓤为载体的吸附固定化和以棕帘—海藻酸钠、丝瓜瓤—海藻酸钠为载体的包埋固定化细胞方法对ATCC21783产酶的影响，以游离细胞作为对比，结果显示固定化细胞比游离细胞有明显的可循环使用优势。以棕帘为载体的吸附固定化连续使用10个循环，第7循环酶活仍可达到第一循环酶活的83.5%；以棕帘-海藻酸钠、丝瓜瓤-海藻酸钠为载体的包埋固定化连续使用10个循环，第8循环酶活仍可达到第一循环酶活的80%以上。由于棕帘吸附固定化操作简单，因此，被用来作为本实验的固定化载体。分析了固定化对细胞产酶的影响原因。发现细胞产生酶活与生物量有关，通过对每个循环中生物量的测定和棕帘固定化细胞扫描电镜分析，认为棕帘固定化细胞能持续产生高活力环糊精糖基转移酶（CGTase）的原因为：细胞通过物理吸附作用黏着在棕帘表面特殊的凹陷结构中；固定化细胞生长停滞期短，生长速度快，发酵液中维持高细胞密度，为高酶活产出提供了条件。优化了固定化条件和固定化细胞摇瓶发酵条件。以CGTase酶活为指标，首先确定了最佳固定化条件为固定时间1d，接种量3%，棕帘数量3片；其次采用单因素试验探究了温度、初始pH、转速、装液量对发酵过程的影响，最终确定最佳发酵条件为温度40℃，初始pH9.5，转速220r/min，装液量40mL；得到酶活5469.25U/mL。最后通过正交实验得出各试验因素对固定化细胞产酶影响程度大小为：温度>转速>装液量>pH。优化了固定化细胞在5L发酵罐中扩大培养条件。通过分析生物量和酶活、pH、溶氧之间的相互关系，发现通过提高转速和通气量来提高发酵液中的溶氧能够增加酶活，优化后的最佳发酵罐发酵条件为搅拌转速400r/min，通气量4.5L/min，此时酶活达到5539.36U/mL，发酵周期缩短为24h，比工艺优化前缩短16h。对固定化细胞用于β-环糊精工业生产的效益进行了分析。计算表明：利用固定化细胞的新工艺与原工艺收益之差存在如下关系（x为新工艺比原工艺减少的天数，单位d）：y=3699799/(8-x)-28262.2-491180=3699799/(8-x)-519442.2当方程中y=0时，x=0.88d，这就说明新工艺的生产时间减少量如果大于0.9d，收益增加，并且减少1d会增加收益9100元（每月）；如果新工艺比原工艺所用时间减少小于0.9d，则收益会比原工艺减少。(本文来源于《江南大学》期刊2014-06-01）
杨冬[3]（2012）在《碱性芽孢杆菌γ-环糊精葡萄糖基转移酶的产物特异性及晶体结构初步研究》一文中研究指出环糊精葡萄糖基转移酶(Cyclodextrin Glycosyltransferase,简称CGT酶,EC 2.4.1.19)能通过环化反应转化淀粉及相关基质合成环糊精。由于环糊精可与疏水性客体分子形成包合物,因此被广泛应用于食品、医药等领域。然而利用野生型CGT酶生产的均是α-、β-、γ-环糊精的混合物,需通过一系列的步骤才能从混合物中分离纯化出单一类型的环糊精,导致其生产成本高,限制了其大规模应用。为了研究CGT酶产物特异性的分子机制,选用产物特异性高的碱性芽孢杆菌γ-CGT酶为研究对象,将其在Escherichia coli BL21(DE3)中进行了胞外表达,然后对亚位点-7处6个氨基酸的缺失对产物特异性的影响进行了分析。为了深入研究γ-CGT酶叁维结构与产物特异性之间的关系,通过X-衍射晶体学的方法对其结构进行了初步解析。主要研究内容如下:(1)将γ-CGT酶基因与带有OmpA信号肽的质粒pET-20b(+)连接,构建表达载体pET-20b(+)/γ-cgt,并将其转入表达宿主E. coli BL21 (DE3)。E. coli BL21 (DE3) (pET-20b (+)/γ-cgt)在TB培养基,25℃,200 rpm摇瓶发酵72 h后,其胞外环化活力为4 U/mL。(2)重组γ-CGT酶带有6×His标签,因此先使用镍离子亲和色谱柱进行纯化,但目的蛋白不能有效地结合到色谱柱上。选用阴离子交换和疏水相互作用色谱柱对目的蛋白进行分离纯化,最终得到了电泳纯蛋白。(3)运用重迭PCR的方法,在γ-CGT酶亚位点-7处添加6个氨基酸,造成插入突变。将突变基因与pET-20b(+)连接并在E. coli BL21(DE3)中表达。对其突变前后产物特异性进行分析发现,突变酶转化生成的3种环糊精中,γ-环糊精所占的比例从76.0%降至12.5%,而α-、β-环糊精分别从8.7%和15.2%提高至37.5%和50%。(4)在20℃条件下采用座滴气相扩散法进行晶体的培养和筛选,通过初筛和复筛,最终得到两种晶型较好的晶体。在上海同步衍射中心收集到一套分辨率为1.65?的衍射数据,用HKL2000进行数据处理,然后运用分子置换法,成功解析得到γ-CGT酶的晶体结构。(5)解析得到的γ-CGT酶晶体结构与蛋白质结构数据库中保存的CGT酶结构进行比对发现,在亚位点-7处,β-CGT酶的环状结构较大,而γ-CGT酶的环状结构较小。突变前,野生型γ-CGT酶亚位点-7处较小的环状结构使得底物结合凹槽空间较大,从而为较长葡萄糖链的结合提供了足够的空间,因此这种构象更适合于γ-环糊精的生成。突变后,这6个氨基酸会与相应的葡萄糖残基相互作用,使得葡萄糖链所能结合的空间变小,从而限制了较长葡萄糖链的结合,因此这种构象不利于γ-环糊精的生成。(本文来源于《江南大学》期刊2012-03-01）
陈娜,生吉萍,申琳[4]（2011）在《碱性芽孢杆菌木聚糖酶基因的克隆及表达》一文中研究指出本实验从广西红树林土壤中筛选出一株产木聚糖酶的耐碱菌HSL38,经过16S rDNA鉴定,其与碱性芽孢杆菌Bacillus halodurans C-125(GenBank:NC_002570.2)的同源性达到99%。参考Bacillus halodurans C-125的β-1,4-木聚糖酶基因xynA设计引物,扩增出HSL38中的β-1,4-木聚糖酶基因xyl-BH-G10,其与xynA的同源性达到99%,编码396个氨基酸残基(45.27kD),属于糖基水解酶GH10家族。将xyl-BH-G10基因与表达载体pET-30a-c(+)连接,构建重组载体,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白。结果表明,在最佳诱导条件下,木聚糖酶基因xyl-BH-G10在大肠杆菌细胞内高效表达,酶活力达到55.28U/mL,是原菌株HSL38发酵液酶活力的4倍。(本文来源于《食品科学》期刊2011年05期）
孙同毅,陈坤,郝继兴,路福平,杜连祥[5]（2007）在《嗜碱性芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达》一文中研究指出从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,Mapr分别插入到大肠杆菌载体pET-22b(+)和枯草芽孢杆菌载体pWB980中构建成重组分泌型表达载体pET22b(+)-Mapr、pWB980-Mapr。碱性蛋白酶基因分别在大肠杆菌宿主BL21和枯草芽孢杆菌DB104中得到表达。SDS-PAGE分析,重组蛋白酶的分子量为28kD。在大肠杆菌,所得酶活为231U/ml,而在枯草芽孢杆菌,其酶活为1563U/ml。大概是由于碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌折迭成熟机制与大肠杆菌的不同造成的。(本文来源于《生物技术通报》期刊2007年05期）
王荫榆,王媛,张红发,任大明,郭本恒[6]（2007）在《来源嗜碱性芽孢杆菌N-227β-环糊精葡基转移酶基因分析及在大肠杆菌中的诱导表达》一文中研究指出很多细菌可以产生环糊精葡基转移酶,对来源于嗜碱性芽孢杆菌N-227菌株染色体上一段编码β-环糊精葡基转移酶基因、包含有自己的启动子且能够直接在大肠杆菌中表达的DNA序列进行测序分析,该片断DNA包含有4114bp,从745位点到2883位点包含2139个碱基,为一个推定的编码713个氨基酸的蛋白质阅读框,和来源于Bacillus circulansA11的β-环糊精葡基转移酶氨基酸完全一致;具有环糊精葡基转移酶典型的五个结构域A-E,在A-B结构域中包含有七个属于α-淀粉酶家族的保守区域(I-VII)。对该酶基因进行PCR并克隆到表达载体pET28b上,利用乳糖进行诱导表达,获得了高效表达,环化活性为11.75mg/min/mL。这对于β-环糊精葡基转移酶的应用和降低成本具有重要的价值。(本文来源于《工业微生物》期刊2007年03期）
吴襟,彭平,沈文,马延和,张树政[7]（2005）在《嗜碱性芽孢杆菌碱性α淀粉酶的纯化和性质》一文中研究指出One Gram-positive bacteria,Bacillus sp.strain BG-CSN,was isolated from the muds with hypersaline and alkaline water at the beach of Banger Soda Lake in Tibet,China.After cultivating in liquid medium for 48 hours,an extracellular α-amylase AmyBGC from the strain BG-CSN was purified 23-fold reaching to electrophoretic homogeneity by sequentially ammonium sulfate precipitation,Octyl-Sepharose CL-4B column chromatography,DEAE-Sepharose Fast Flow chromatography,DEAE-Toyopearl 650M chromatography and Sephadex G-100 chromatography.The enzyme had a molecular mass of 87 kD estimated by SDS-PAGE.The enzyme was optimally active at pH 10.5 and 52.5℃ and showed stability at pH range of 5.0 to 11.5 at the temperature below 35℃. The enzyme activity was inhibited by Hg+ and Fe 3+.The activity was not prevented at all by chelating reagents EDTA and SDS at high concentrations.This enzyme efficiently hydrolyzed starch to yield a series of maltooligosaccharides,including maltose after completion of the reaction.These results indicate that AmyBGC is classified as a liquefying endo-1,4-D-α-amylase(EC-3.2.1.1).(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2005年06期）
苑琳,戚薇,路福平,杜连祥[8]（2004）在《嗜碱性芽孢杆菌产高碱碱性蛋白酶发酵培养基及发酵条件的研究》一文中研究指出对一株高产高碱碱性蛋白酶的嗜碱性芽孢杆菌的发酵培养基及发酵工艺进行了优化。确定了发酵培养基所采用的棉籽饼粉最适粒度为 80目 ,麦芽糊精的最佳DE值为 3 0 %。并确定了该菌株的最适发酵培养基配方为 ( g/1 0 0mL) :棉籽饼粉 3 ,酵母浸粉 1 75 ,麦芽糊精 1 0 ,柠檬酸钠 0 3 ,CaCl2 0 3。K2 HPO4 1 ;最适摇瓶发酵条件为 :种龄 1 2h ,接种量 2 %,装液量 5 0mL/2 5 0mL ,摇床转速 2 0 0r/min ,3 4℃ ,发酵 5 4h ,碱性蛋白酶的发酵单位可达 3 3 985u/mL ,比优化前提高了5 4 48%。此外 ,还进行了 5L罐放大实验 ,在 5L罐所确定的最适工艺条件下 ,发酵单位可达3 65 79u/mL。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2004年06期）
舒勤[9]（2004）在《嗜碱性芽孢杆菌Bacillus sp.AC-2产纤维素酶的研究》一文中研究指出由细菌产生的纤维素酶其最适反应pH值通常为中性到碱性，近年来，这类酶制剂在纸浆脱油墨和洗涤剂等工业领域中得到了成功的应用，对于这类酶制剂的研究具有重要的学术意义和实际应用价值。 本文选用嗜碱性芽孢杆菌Bacillus sp.AC-2发酵生产纤维素酶，在摇瓶条件下对Bacillus sp.AC-2的产酶工艺进行了研究，包括种子培养时间、接种量、初始pH值、培养温度、碳源、C／N、氮源、无机盐和表面活性剂等。采用优化后的培养基及培养条件，发酵44小时，Bacillus sp.AC-2所产纤维素酶在pH7.0和pH9.5条件下分别为111.25U／mL和76.04U／mL。 进一步在3.7L发酵罐中进行产酶研究。确立了适宜的通气量和搅拌速度分别为0.2vvm和200rpm；在最佳发酵条件下，中性纤维素酶和碱性纤维素酶产量达到了136.77U／mL和93.48U／mL。这一结果已达到同类文献报道的先进水平，显示了良好的应用前景。 对Bacillus sp.AC-2纤维素酶的酶学性质研究表明：该酶除了主要具有内切-β-葡聚糖酶(CMC酶)活性外，还有一定的淀粉酶活力和少量的滤纸酶活力，未测出纤维二糖酶活力。Bacillus sp.AC-2纤维素酶的最佳反应温度和pH值分别为60℃和7.0；在pH6.0～10.0、温度低于70℃条件下比较稳定；不同的金属离子对酶活具有一定的激活或者抑制作用。 Bacillus sp.AC-2纤维素酶在纸浆酶法脱墨方面展示了良好的应用前景，经它处理过的纸浆不仅白度好，而且对纤维的破坏程度也小；酶用量以100U／g为适宜；吐温80和适当的机械作用可以提高酶法脱墨效果。初步实验表明，Bacillussp.AC-2纤维素酶在洗涤剂工业中具有巨大的应用潜力，当酶的添加量为2％、水洗时间1小时，该酶能有效地提高洗衣粉对污布的水洗能力。 芽孢杆菌所产的纤维素酶具有重要的工业应用价值，目前对这类酶制剂的工业化生产国内尚属空白。本论文的研究结果在学术上和应用中都具有重要意义。(本文来源于《浙江大学》期刊2004-02-01）
田亚平,全文海[10]（1998）在《嗜碱性芽孢杆菌碱性纤维素酶酶系的研究》一文中研究指出本文研究了各种碳、氮源、ｐＨ、通风量等工艺条件对嗜碱性芽孢杆菌Ｖ－５产酶酶系的影响，通过酶在表面活性剂中的实验，分析不同表面活性剂对酶系中各组分的影响，初步研究酶系与去污力的关系，认为除以内切酶为主外，酶系中另二个组分，在去污效果中的辅助作用不容忽视。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊1998年03期）
嗜碱性芽孢杆菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
环糊精工业生产过程中，菌种生长产酶是最关键的步骤之一。然而，由于受到环境和操作条件等因素影响使其极不稳定。固定化细胞的方法可以增加菌种的生长稳定性，缩短种子培养周期，并且能够反复多次使用。棕帘具有环境友好、耐腐蚀性强、可循环利用等特点，常用于水产养殖附苗。本文首次利用棕帘为载体对嗜碱性芽孢杆菌ATCC21783进行固定化，研究了固定化条件、摇瓶发酵条件、发酵罐发酵条件及应用在环糊精生产中的效益，初步确定了棕帘固定化细胞在工业生产环糊精中的可行性。固定化方法和载体的选择。研究了以棕帘、丝瓜瓤为载体的吸附固定化和以棕帘—海藻酸钠、丝瓜瓤—海藻酸钠为载体的包埋固定化细胞方法对ATCC21783产酶的影响，以游离细胞作为对比，结果显示固定化细胞比游离细胞有明显的可循环使用优势。以棕帘为载体的吸附固定化连续使用10个循环，第7循环酶活仍可达到第一循环酶活的83.5%；以棕帘-海藻酸钠、丝瓜瓤-海藻酸钠为载体的包埋固定化连续使用10个循环，第8循环酶活仍可达到第一循环酶活的80%以上。由于棕帘吸附固定化操作简单，因此，被用来作为本实验的固定化载体。分析了固定化对细胞产酶的影响原因。发现细胞产生酶活与生物量有关，通过对每个循环中生物量的测定和棕帘固定化细胞扫描电镜分析，认为棕帘固定化细胞能持续产生高活力环糊精糖基转移酶（CGTase）的原因为：细胞通过物理吸附作用黏着在棕帘表面特殊的凹陷结构中；固定化细胞生长停滞期短，生长速度快，发酵液中维持高细胞密度，为高酶活产出提供了条件。优化了固定化条件和固定化细胞摇瓶发酵条件。以CGTase酶活为指标，首先确定了最佳固定化条件为固定时间1d，接种量3%，棕帘数量3片；其次采用单因素试验探究了温度、初始pH、转速、装液量对发酵过程的影响，最终确定最佳发酵条件为温度40℃，初始pH9.5，转速220r/min，装液量40mL；得到酶活5469.25U/mL。最后通过正交实验得出各试验因素对固定化细胞产酶影响程度大小为：温度>转速>装液量>pH。优化了固定化细胞在5L发酵罐中扩大培养条件。通过分析生物量和酶活、pH、溶氧之间的相互关系，发现通过提高转速和通气量来提高发酵液中的溶氧能够增加酶活，优化后的最佳发酵罐发酵条件为搅拌转速400r/min，通气量4.5L/min，此时酶活达到5539.36U/mL，发酵周期缩短为24h，比工艺优化前缩短16h。对固定化细胞用于β-环糊精工业生产的效益进行了分析。计算表明：利用固定化细胞的新工艺与原工艺收益之差存在如下关系（x为新工艺比原工艺减少的天数，单位d）：y=3699799/(8-x)-28262.2-491180=3699799/(8-x)-519442.2当方程中y=0时，x=0.88d，这就说明新工艺的生产时间减少量如果大于0.9d，收益增加，并且减少1d会增加收益9100元（每月）；如果新工艺比原工艺所用时间减少小于0.9d，则收益会比原工艺减少。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
嗜碱性芽孢杆菌论文参考文献
[1].杨丽.嗜碱性类芽孢杆菌产β-环糊精葡萄糖基转移酶发酵条件的优化[J].轻工科技.2015
[2].岳艳.棕帘固定化嗜碱性芽孢杆菌制备CGTase的研究[D].江南大学.2014
[3].杨冬.碱性芽孢杆菌γ-环糊精葡萄糖基转移酶的产物特异性及晶体结构初步研究[D].江南大学.2012
[4].陈娜,生吉萍,申琳.碱性芽孢杆菌木聚糖酶基因的克隆及表达[J].食品科学.2011
[5].孙同毅,陈坤,郝继兴,路福平,杜连祥.嗜碱性芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达[J].生物技术通报.2007
[6].王荫榆,王媛,张红发,任大明,郭本恒.来源嗜碱性芽孢杆菌N-227β-环糊精葡基转移酶基因分析及在大肠杆菌中的诱导表达[J].工业微生物.2007
[7].吴襟,彭平,沈文,马延和,张树政.嗜碱性芽孢杆菌碱性α淀粉酶的纯化和性质[J].中国生物化学与分子生物学报.2005
[8].苑琳,戚薇,路福平,杜连祥.嗜碱性芽孢杆菌产高碱碱性蛋白酶发酵培养基及发酵条件的研究[J].食品与发酵工业.2004
[9].舒勤.嗜碱性芽孢杆菌Bacillussp.AC-2产纤维素酶的研究[D].浙江大学.2004
[10].田亚平,全文海.嗜碱性芽孢杆菌碱性纤维素酶酶系的研究[J].食品与发酵工业.1998
论文知识图
