孔板法论文_王晶,王红丹,芦云,李玲

导读:本文包含了孔板法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:微孔,乳粉,叶酸,甲基,配方,通量,糖苷。

孔板法论文文献综述

王晶,王红丹,芦云,李玲[1](2019)在《微孔板法检测婴幼儿配方乳粉中维生素B_(12)的含量》一文中研究指出目的建立用微孔板检测婴幼儿配方乳粉中维生素B_(12)的方法。方法基于微生物原理的检测方法,缩小样品的培养体积。样品经提取后,分装到96孔细胞培养板中,在培养基中加入0.05%的菌悬液,混匀后分配到含有样品和标准品的微孔中,培养后直接用酶标仪测定吸光度值。结果本方法标准曲线相关系数0.9987,加标回收实验回收率在92.7%~98.7%之间,重复性实验相对标准偏差在1.03%~1.73%之间, 6种不同含量的样品同时用GB 5413.14-2010方法和本方法检测维生素B_(12),检测结果无显着性差异。结论该方法快速,操作简单,稳定性高,检测成本低,可大批量样品同时检测,适合测定婴幼儿配方乳粉中维生素B_(12)的含量。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年23期)

徐彪,王友红,杜莎莎,Millie,Chen[2](2019)在《微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的方法验证与建立》一文中研究指出小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)为医疗器械遗传毒理试验的重要检测项目(见ISO10993.3和OECD 490),其原理为胸苷激酶(TK)可以使细胞从培养基中吸收胸苷,用于DNA合成。叁氟胸苷(TFT)为胸苷类似物,当添加到培养基后,该类似物经TK途径被磷酸化,通过抑制DNA合成而导致细胞死亡。TK基因座为杂合子(tk~(+/-))的细胞通过一步即可正向突变为tk-/-基因型,从而失去TK激酶活性。这种tk-/-突变细胞具有TFT抗性,在正常培养基中能够存活因为DNA的从头合成不需要外源性胸苷,同时不会将这一有毒性的胸苷类似物整合到DNA中。因此细胞在TFT存在情况下能生长形成的克隆可以被认为是在tk~(+/-)位点发生了突变。本实验有两种方法,一种是软琼脂法,另外一种是液态培养基微孔板法,本设施验证的是液态培养基微孔板法。目的通过选取供试品非PVC膜袋,设置适当的阳性对照(3-甲基胆蒽和4-硝基喹啉N-氧化物),检测其浸提液在添加和不添加外源性代谢活化物情况下诱导小鼠淋巴瘤细胞L5178Y(TK+/--3.7.2C)胸苷激酶(TK)位点突变的能力,验证本中心进行该项试验的能力。方法:本试验使用小鼠淋巴瘤L5178Y细胞株,该细胞来源于英国公共卫生培养物保藏所并在苏州药明康德传代培养并保存在液氮中。将L5178Y细胞暴露于供试品浸提液、阳性对照和阴性对照中,每组每系列设置2个平行。S9代谢活化系统处理4小时,非代谢活化系统处理4小时和24小时。非极性和极性介质给药体积分别为1%(v/v)和10%(v/v)。本试验中未观察到细胞毒性,因此该试验设计一个剂量水平可以接受。表型表达期结束后,调整细胞密度,接种克隆效率微孔板和突变频率微孔板。结果供试品没有降解,浸提结束后肉眼观察浸提液澄清。叁个系列均满足试验接受标准,以4小时加S9为例:极性介质/阴性对照生理盐水平均MF为93.8×10~(-6),平均克隆效率CE为118.7%,平均SG为21.8。对于非极性介质/阴性对照DMSO,平均MF为92.6×10~(-6),平均平板CE为103.8%,平均SG为22.9。对于阳性对照,2.0μg·mL~(-1)的3-甲基胆蒽诱导的突变频率(IMF)为673.6×10~(-6),诱导的小集落突变频率ISMF为303.5×10~(-6)占总突变频率的43.0%。供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液处理过的细胞均进行了克隆,未发现沉淀且无明显的细胞毒性。与当前介质/阴性对照相比,供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液的IMF分别为-2.0×10~(-6)和-3.8×10~(-6),IMF未超过通用评价因子(GEF)126×10~(-6)。结论根据以上结果,介质/阴性对照,在自发突变频率、平板克隆效率和悬浮增长率方面均满足标准,阳性对照诱导后突变频率和小集落比均满足标准,该小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验是有效的,判定非PVC膜袋为阴性,试验结果表明本设施具备开展微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的能力。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17)

范松阳[3](2018)在《微孔板法测定乳粉中叶酸的含量》一文中研究指出维生素是保持生命体正常生理功能和新陈代谢所必须的一类有机物。在机体内含量非常少,需要从食物中获得。长时期缺少某种维生素,会引发机体相应的缺乏症状。水溶性的维生素包含维生素C和B族维生素。而B族维生素是辅酶或辅基的重要组成部分,参加机体内的代谢过程,不能够在机体内长时间贮存或者贮存的含量极少,并且易被消耗代谢,每天都需要补充~([1])。叶酸其实是B族维生素中的一种,它是人体健康中必不可少的部分,所以叶酸的每日叶酸摄取量和叶酸的测定方法及其毒理学作用的研究都是现如今研究的热门话题,而且叶酸的测定方法是研究这些问题的基础和前提,所以叶酸的检测方法则变得特别重要。如何准确测出叶酸的含量就是衡量检测方法好坏的重要标准之一。微生物法是测定叶酸的常用方法,可以准确的检测出具有生化活性的叶酸,结果表示出的是基体中的叶酸含量,这也是微生物测定法不同于其他的检测方法的最大的优点,是仪器测定方法难以达到的。现在大部分国际标准的测定方法都将微生物检测法当做多种维生素检验的第一标准~([2])。在我国现在实行的国家检测标准里也仍然用微生物方法检测乳制品和婴幼儿配方食品中的叶酸。酪乳酸杆菌(ATCC 7469)相对叶酸有极强的特异性,叶酸作为该菌必需的生长因子,而且在一定的生长环境下,该菌生长和增殖的速率与体系中叶酸的含量具有一定的比例关系,微生物法则是依据这个原理对叶酸定量分析的。微生物法的检测过程一般会分为以下六个检测步骤:1)工作菌悬液的制备;2)检测样品和工作标准曲线的制备;3)测试培养基的制备,现在可以应用成品培养基;4)灭菌及接种和培养;5)样品测定,主要方法是光密度法;6)计算。本文基于对微生物方法的原理和基本的分析步骤制定了微孔板的测定方法,通过对十组的未知浓度的样品重复五次测定,得到样品的相对标准偏差均<2%;通过的已知浓度样品的测定,得出实验的相对误差<2%;实验的回收率范围为98%-106%;线性的相关系数也可以达到0.9995以上;同次实验的平行孔间的变异系数也都<5%。所以,微孔板法可以用来准确的测定乳粉中叶酸的含量,并且相比较传统的试管方法,可以大量的缩短实验的操作时间,降低实验的难度,同时节约了实验成本。微孔板法的优势在于成本少、灵敏度高、适用于数量大的样品测定、可操作性强;随着当代的科技迅速发展,很多的仪器检测方法都被开发出来,用以检测低含量的叶酸食品。可仪器检测方法只是对叶酸的衍生物和某种一定结构的叶酸进行检测分析,但是对所有结构形式的叶酸测定分析时,实验的难度和复杂程度会很大,成本也会相应的升高。因此,在进行分析检验时,研究人员可以依据不同的研究目的来决定测定方法。(本文来源于《东北农业大学》期刊2018-12-01)

李静,白广红,魏墚铉,曹琳,王卓[4](2018)在《微孔板法检测痰标本结核分枝杆菌及耐药多因素分析》一文中研究指出目的:评价微孔板法用于检测痰标本结核分枝杆菌(MTB)耐药的临床价值及探讨结核分枝杆菌耐药的影响因素。方法:采用MGIT960快速药敏法(MGIT法)和微孔板法对298例肺结核患者痰标本中的MTB进行药敏试验,并对其耐药多因素进行Logistic回归分析。结果:298例痰液标本中有人结核分枝杆菌293例,牛结核分枝杆菌5例,对比差异无统计学意义(P>0.05)。与MGIT法测定结果比较,微孔板法检测利福平耐药性的敏感度为95.2%,特异度为97.4%;异烟肼耐药性的敏感度为91.8%,特异度为92.3%,Kappa值分别为0.689及0.653。多因素Logistic回归分析结果显示,吸烟史、诊断延误与合并HIV对MTB耐药性影响显着(P<0.05)。结论:微孔板法检测痰标本中MTB耐药性与MGIT960快速药敏法有较高一致性。(本文来源于《大众科技》期刊2018年06期)

高利海[5](2018)在《一种微孔板法检测食品中添加维生素B12含量的方法》一文中研究指出维生素B12(VB12),又称钴胺素(Cobalamin),是人体中非常重要的水溶性维生素之一,主要用于婴幼儿奶粉、谷物食品、保健食品、乳品和功能性饮料等食品中营养强化。目前针对食品中B12检测方法,国标有GB 5009.217《保健食品中维生素B12测定》、GB 5413.14《婴幼儿食品和乳品中维生素B12测定》,但由于食品成分复杂、存在多种干扰因素,因此化学分析法的应用受到限(本文来源于《食品界》期刊2018年06期)

刘凤银,张媚健,李轩,谢丽君,袁学文[6](2018)在《饮用水中亚硝酸盐高通量检测微孔板法的研究》一文中研究指出亚硝酸盐与间苯二胺在强酸性条件下发生重氮化偶联反应,生成橙红色偶联产物环偶氮亚氨基苯。本研究基于该原理,以微孔板为载体,确定最佳测定波长,通过单因素实验、正交实验优化工作条件,建立一种高通量检测饮用水中亚硝酸盐含量的方法。结果表明,最佳测定波长为451 nm,最佳工作条件:盐酸浓度为0.4 mol/L、间苯二胺浓度为30 g/L、反应时间为10 min。该方法的检出限为0.017 mg/L,线性范围为0~5 mg/L,线性相关系数r为0.9997,空白加标回收率在95.24%~103.98%之间,变异系数小于5%。该方法快速、灵敏,抗干扰能力强,操作简便,可进行高通量筛选,用于饮用水等食品样品中亚硝酸盐残留量的定量测定。(本文来源于《食品工业科技》期刊2018年06期)

王红月[7](2016)在《利用微孔板法测定豆豉提取物对葡萄糖苷酶活性抑制的研究》一文中研究指出α-葡萄糖苷酶抑制剂能抑制α-葡萄糖苷酶水解释放葡萄糖,从而降低机体中的血糖浓度,临床上多用作为治疗糖尿病的口服降糖药。DNJ(1-Deoxynojirimycin)即1-脱氧野尻霉素,对α-葡萄糖苷酶有强烈的抑制作用,是一种典型的α-葡萄糖苷酶抑制剂。本研究以DNJ为标准参考物,采用微孔板法检测α-葡萄糖苷酶抑制剂的半数抑制浓度(IC50值),并对该实验的最佳反应条件进行了摸索。结果表明:对于酶浓度,实验中所用批次酶的最适浓度范围为2.0-3.0mg/m L;对于检测波长,在405nm、450nm、492nm、520nm、630nm 5种条件下,520nm和492nm波长检测信号最强,两者强度相当,且检测强度均随着酶浓度的降低而降低;对于蔗糖底物浓度,合适范围应为20-40mM/L;对于反应时间,合适的范围应为20-30min。同时,也对该方法是否适用于测定豆豉提取物IC50值进行了验证。结论表明,在以豆豉提取物为样品的IC50值检测过程中:线性相关系数R2均大于0.98,满足方法的线性要求;精密度试验中,同一试验人员重复性结果良好,不同试验人员间结果的相对标准偏差满足不大于20%的要求;特异性试验中,能有效检测出豆豉提取物的IC50值,对四季豆提取物的检测无效;稳健性实验中,与安利美国研发实验室进行结果比较,安利中国生化分析实验室的结果平均值在两个实验室所有结果平均值的±20%范围内。所以,该法适用于豆豉提取物干粉的IC50值检测。(本文来源于《华南理工大学》期刊2016-11-08)

王珂,陈茜文,张力平[8](2016)在《微孔板法评价碘伏的消毒效果研究》一文中研究指出目的利用微孔板建立微量试验法检测碘伏的抑菌和杀菌效果。方法用微孔板法鉴定中和剂对碘伏的中和效果;用微孔板悬液定量杀菌试验检测碘伏对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的杀灭效果;用微量肉汤法检测碘伏对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的最小抑菌浓度,平板划线后计算最小杀菌浓度。结果微孔板悬液定量杀灭实验显示,310~2 500 mg/L的碘伏随作用时间(30 s~5 min)延长,对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的杀灭作用逐渐增强。碘伏对两种细菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度均为625 mg/L。结论微孔板法可用于检测碘伏对常见细菌的抑菌和杀菌效果。(本文来源于《中国消毒学杂志》期刊2016年09期)

刘学文,高裕锋,邓倩南,陈海宁,林雅慧[9](2016)在《微孔板法测定乳粉中叶酸含量的前处理方法优化》一文中研究指出叶酸,是一类化学结构相似、生化特征相近的化合物统称,由蝶啶、对氨基苯甲酸和一个或多个谷氨酸结合而成,是维生素B复合体之一[1]。它具有促进骨髓中幼细胞成熟,改善血管内皮功能、预防心血管疾病等作用,缺乏叶酸可能引起人体巨红细胞性贫血以及白细胞减少症[2-3]。叶酸是乳粉中重要的营养物质之一,为了保障乳粉的质量安全,开展乳粉中叶酸的检验方法研究显得十分重要。叶酸常用的检测方法有比色法[4]、薄层层析法[5]、同位素放射免疫法[6]、色谱法[7]、微生物法等[8-9]。在我国的(本文来源于《食品安全导刊》期刊2016年23期)

刘爱萍,胡浩,李献林,孔素娟,王晶[10](2015)在《微孔板法检测肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量》一文中研究指出目的微孔板法检测肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量,并对该方法进行验证。方法将常规甲基戊糖测定法应用于微孔板,并优化盐酸半胱氨酸浓度。对建立的方法进行线性、精密度及准确度的验证。用建立的方法检测肺炎球菌多糖样品中甲基戊糖含量及多糖衍生物的分子量分布。结果最佳的盐酸半胱氨酸浓度为15 mg/ml。标准品L-鼠李糖在5~30μg/ml范围内,其浓度与(A396-A430)值呈良好的线性关系,R2>0.999;批内及批间CV值分别为0.9%~1.1%及2.2%~3.2%;加入2.5、5、10μg/ml L-鼠李糖的6B型原糖及多糖衍生物中的甲基戊糖含量的回收率为91.73%~100.70%。微孔板法及常规方法测定的肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量无明显差异(P>0.05),微孔板法测定多糖分子量分布与常规方法有较好的一致性。结论微孔板法可有效、准确、稳定地检测肺炎荚膜多糖及其衍生物中甲基戊糖含量,该方法灵敏度高,操作简便快捷,节约样品、试剂等材料,适用于疫苗生产过程中的质量控制。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2015年10期)

孔板法论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)为医疗器械遗传毒理试验的重要检测项目(见ISO10993.3和OECD 490),其原理为胸苷激酶(TK)可以使细胞从培养基中吸收胸苷,用于DNA合成。叁氟胸苷(TFT)为胸苷类似物,当添加到培养基后,该类似物经TK途径被磷酸化,通过抑制DNA合成而导致细胞死亡。TK基因座为杂合子(tk~(+/-))的细胞通过一步即可正向突变为tk-/-基因型,从而失去TK激酶活性。这种tk-/-突变细胞具有TFT抗性,在正常培养基中能够存活因为DNA的从头合成不需要外源性胸苷,同时不会将这一有毒性的胸苷类似物整合到DNA中。因此细胞在TFT存在情况下能生长形成的克隆可以被认为是在tk~(+/-)位点发生了突变。本实验有两种方法,一种是软琼脂法,另外一种是液态培养基微孔板法,本设施验证的是液态培养基微孔板法。目的通过选取供试品非PVC膜袋,设置适当的阳性对照(3-甲基胆蒽和4-硝基喹啉N-氧化物),检测其浸提液在添加和不添加外源性代谢活化物情况下诱导小鼠淋巴瘤细胞L5178Y(TK+/--3.7.2C)胸苷激酶(TK)位点突变的能力,验证本中心进行该项试验的能力。方法:本试验使用小鼠淋巴瘤L5178Y细胞株,该细胞来源于英国公共卫生培养物保藏所并在苏州药明康德传代培养并保存在液氮中。将L5178Y细胞暴露于供试品浸提液、阳性对照和阴性对照中,每组每系列设置2个平行。S9代谢活化系统处理4小时,非代谢活化系统处理4小时和24小时。非极性和极性介质给药体积分别为1%(v/v)和10%(v/v)。本试验中未观察到细胞毒性,因此该试验设计一个剂量水平可以接受。表型表达期结束后,调整细胞密度,接种克隆效率微孔板和突变频率微孔板。结果供试品没有降解,浸提结束后肉眼观察浸提液澄清。叁个系列均满足试验接受标准,以4小时加S9为例:极性介质/阴性对照生理盐水平均MF为93.8×10~(-6),平均克隆效率CE为118.7%,平均SG为21.8。对于非极性介质/阴性对照DMSO,平均MF为92.6×10~(-6),平均平板CE为103.8%,平均SG为22.9。对于阳性对照,2.0μg·mL~(-1)的3-甲基胆蒽诱导的突变频率(IMF)为673.6×10~(-6),诱导的小集落突变频率ISMF为303.5×10~(-6)占总突变频率的43.0%。供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液处理过的细胞均进行了克隆,未发现沉淀且无明显的细胞毒性。与当前介质/阴性对照相比,供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液的IMF分别为-2.0×10~(-6)和-3.8×10~(-6),IMF未超过通用评价因子(GEF)126×10~(-6)。结论根据以上结果,介质/阴性对照,在自发突变频率、平板克隆效率和悬浮增长率方面均满足标准,阳性对照诱导后突变频率和小集落比均满足标准,该小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验是有效的,判定非PVC膜袋为阴性,试验结果表明本设施具备开展微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的能力。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

孔板法论文参考文献

[1].王晶,王红丹,芦云,李玲.微孔板法检测婴幼儿配方乳粉中维生素B_(12)的含量[J].食品安全质量检测学报.2019

[2].徐彪,王友红,杜莎莎,Millie,Chen.微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的方法验证与建立[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019

[3].范松阳.微孔板法测定乳粉中叶酸的含量[D].东北农业大学.2018

[4].李静,白广红,魏墚铉,曹琳,王卓.微孔板法检测痰标本结核分枝杆菌及耐药多因素分析[J].大众科技.2018

[5].高利海.一种微孔板法检测食品中添加维生素B12含量的方法[J].食品界.2018

[6].刘凤银,张媚健,李轩,谢丽君,袁学文.饮用水中亚硝酸盐高通量检测微孔板法的研究[J].食品工业科技.2018

[7].王红月.利用微孔板法测定豆豉提取物对葡萄糖苷酶活性抑制的研究[D].华南理工大学.2016

[8].王珂,陈茜文,张力平.微孔板法评价碘伏的消毒效果研究[J].中国消毒学杂志.2016

[9].刘学文,高裕锋,邓倩南,陈海宁,林雅慧.微孔板法测定乳粉中叶酸含量的前处理方法优化[J].食品安全导刊.2016

[10].刘爱萍,胡浩,李献林,孔素娟,王晶.微孔板法检测肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量[J].中国生物制品学杂志.2015

论文知识图

基于深孔板法对菌株QF-1-1耐受...一2396孔板法筛选图中右侧为发酵...孔板法模式图96孔板法测定sigB基因敲除对生物...一2796孔板法筛选结果孔板法测药物分子MIC值

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